Appunti degli studenti per corsi ed esami del Prof. Fortina Mariagrazia

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Nel seguente documento di Microbiologia generale vengono analizzati i diversi generi dei microrganismi partendo da batteri, lieviti, muffe e tutti gli altri generi prendendo anche in considerazione le modalità di analisi dei diversi microrganismi.

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Biotecnologie genetico-molecolari

Facoltà Agraria

Dal corso del Prof. M. Fortina

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Appunti di biotecnologie genetico-molecolari basati su appunti personali del publisher presi alle lezioni della prof. Fortina, dell’università degli Studi di Milano - Unimi, facoltà di agraria, Corso di laurea in scienze e tecnologie alimentari. Scarica il file in formato PDF!

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Biotecnologie genetico molecolari

Facoltà Agraria

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Appunti completi del corso di Biotecnologie genetico molecolari e case study basati su appunti personali del publisher presi alle lezioni della prof. Fortina, dell’università degli Studi di Milano - Unimi, facoltà di agraria. Scarica il file in formato PDF!

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Domande biotecnologie genetico molecolari

Facoltà Agraria

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Domande d'esame complete per l'esame di biotecnologie genetico molecolari basate su appunti personali del publisher presi alle lezioni della prof. Fortina, dell’università degli Studi di Milano - Unimi, facoltà di agraria. Scarica il file in formato PDF!

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Metodologie di analisi

Esame Metodologie di analisi

Facoltà Agraria

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Gli appunti scritti sulla base dell'ascolto delle registrazioni delle lezioni. Esempio Ricordiamo innanzi tutto qual è il flusso dell’informazione genica: abbiamo le informazioni portate a livello del DNA che vengono poi trascritte in mRNA a singolo filamento, il quale va ai ribosomi per la sintesi proteica. Due parole sul processo di trascrizione: i vari geni posseggono a monte una regione nucleotidica che non è codificante ma che è riconosciuta dalla RNA polimerasi che è in grado di svolgere il processo di trascrizione sull’RNA. Questa sequenza si chiama sito promotore ed è caratteristico di ciascun gene presente nel genoma. L’RNA, dunque, giunge ai ribosomi che sono dotati di due subunità attive; i ribosomi completi dei batteri si chiamano 70 S dove S significa Swetter dal nome del ricercatore che per primo ha classificato i ribosomi e le varie unità in funzione della loro densità.

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Biotecnologie microbiche, prof. Fortina

Facoltà Agraria

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Appunti di Biotecnologie microbiche elaborati dal publisher sulla base di appunti personali e frequenza delle lezioni della professoressa Fortina, dell'università degli Studi di Milano - Unimi, facoltà di agraria. Scarica il file con le esercitazioni in formato PDF!

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Riassunto Biotecnologie Microbiche - Unità' Didattica: Biotecnologie Genetico-Molecolari

Facoltà Agraria

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Appunti di biotecnologie microbiche sulle biotecnologie genetico-molecolari basati su appunti personali del publisher presi alle lezioni della prof. Fortina dell’università degli Studi di Milano - Unimi, facoltà di Agraria. Scarica il file in formato PDF!

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Biotecnologie genetico-molecolari

Facoltà Agraria

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1. Premessa 5 1.1 Ricombinazione genetica 6 1.2 Il DNA 8 1.3 L’RNA 8 1.4 Il codice genetico e degenerazione del codice 9 1.5 Il gene e l’Open Reading Frame 9 1.6 La replicazione del DNA 9 1.7 La trascrizione 10 1.7.1 Il sito promotore 10 1.7.2 Il Ribosomal Binding Site (RBS) 10 1.8 Gli operoni. Esempi di operoni: l’operone ribosomiale e l’operone LAC 11 1.9 Strategie per la regolazione della trascrizione 11 1.10 La variabilità genetica 12 1.10.1 La trasposizione: trasposoni semplici e complessi 13 1.11 Gli enzimi di restrizione 14 1.12 Breve riassunto di quanto trattato fino a qui 14 2. Operare con il DNA 15 2.1 Estrarre del DNA 15 2.1.2 Quantificare il DNA estratto: assorbanza, effetto ipercromico e Tm 16 2.2 Visualizzazione del DNA estratto 17 2.3 Quantificazione del peso molecolare del DNA estratto 19 2.4 Riassunto del paragrafo precedente 20 2.5 Il DNA plasmidico 20 2.4.1 Valutazione della presenza di DNA plasmidico: denaturazione alcalina e ultracentrifugazione in gradiente di cloruro di cesio 20 2.4.2 Le conformazioni del DNA plasmidico 21 2.5 Riassociazione molecolare DNA-DNA o ibridazione molecolare DNA-DNA 29 2.5 La PCR (Polymerase Chain Reaction) 31 2.5.1 I primer 33 2.6 Costruzione dei primer (anche di quelli per l’amplificazione inversa) 34 2.7 Il primo impiego della PCR: la costruzione di sonde specie-specifiche 38 2.7.1 Applicazione delle sonde specie-specifiche: reattivi e procedimento 39 2.7.2 Le sonde specie-specifiche: riassunto di quanto fino ad ora detto e approfondimento 39 2.8 I primer universali: l’identificazione di un microrganismo ed il controllo positivo 40 2.8.1 Primer universali per la RS (RSA) 41 2.9 Il typing molecolare 42 2.9.1 RAPD (Random Amplification of Polymorphic DNA) 42 2.9.2 REP PCR (Repetitive Extragenic Palindromic PCR) 43 2.10 PCR multiplex 43 2.11 Ibridazione su membrana 44 2.11.1 Ibridazione su membrana DOT-BLOT 44 2.11.2 Ibridazione su membrana southern: localizzazione del gene a livello cromosomale o plasmidico, determinazione del numero di copie di un gene, ribotyping 46 2.12 PCR quantitativa (Real Time PCR -qPCR-) 48 2.12.1 Applicazione della qPCR: quantificazione in tempi utili delle cellule totali del batterio M. morganii 50 2.13 RT-PCR (Reverse Transcriptase PCR) 51 2.13.1 Applicazione della RT-PCR: quantificazione relativa dell’espressione genica del gene HDC in M. morganii in differenti condizioni di pH 52 3. Ingegneria genetica 53 3.1 Il clonaggio molecolare 53 3.1.1 Componenti necessarie per la tecnica del clonaggio 53 3.1.2 Tappe del clonaggio 53 3.1.3 I vettori di clonaggio 54 3.2 Il sequenziamento 56 3.2.1 Il sequenziamento manuale 56 3.2.2 Il sequenziamento automatico 56 4. Esercizi 57 4.1 Identificazione di un gene all’interno di una sequenza 57 58 58 4.2 Verifica dell’espressione di un gene 59 4.3 Utilizzo software NCBI 59 4.4 Possibili domande 59 4.5 Schematizzazione delle risposte alle domande precedenti 63

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Biotecnologie genetico molecolari

Facoltà Agraria

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Appunti delle lezioni 2018-2019 di biotecnologie genetico molecolari (corso di biotecnologie microbiche) basati su appunti personali del publisher presi alle lezioni della prof. Fortina dell’università degli Studi di Milano - Unimi. Scarica il file in formato PDF!

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Biotecnologie microbiche - Appunti

Facoltà Agraria

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