Istologia ed Embriologia - preparazione campione

Preparazione Campione per Microscopia

24/11/2013

Inclusione naturale utilizza materiali come l'ambra, che è una resina naturale, in cui può essere incluso un insetto ad esempio. Inclusione è anche artificiale con l'uso di cere come la PARAFFINA, prima però si immerge in XILORO che è il solvente della paraffina poi in soluzioni di xilo- paraffine e poi va in stufe.

Il Microtomo si usa per il taglio e le sezioni da 2 µm fino a 20 µm. Sezioni seriate sono quelle fatte di continuo, una dietro l'altra. Si pone poi le sezioni in vaschetta a 30 gradi e poi si raccoglie con vetrino e si asciuga.

Il nucleo è acido (quindi basofilo), il citoplasma basico (quindi acidofilo). La colorazione con EMATOSSILINA-EOSINA (ee) è la colorazione di base nello studio microscopico. L'ematossilina è colorante basico colora il nucleo e quindi maggiormente in blu-violetto. L'eosina colorante invece in rosso-rosso componenti basic contiene positivimente come il citoplasma.

I coloranti residui devono essere rimossi al termine del lavoro e colorare. Si usa xilolo per togliere la paraffina in eccesso e poi aclcolo in grado decadente per disidratare e poi si toglie l'ideale in eccesso con lavaggio in acque distillate poi si può

Preparazione Campione per Microscopia

Inclusione naturale utilizza materiali come l’ambra che è una resina naturale in cui può essere incluso un insetto ad esempio. Inclusione è anche artificiale con l’uso di cere come la PARAFFINA. Prima però si immerge in XYLOLO che è il solvente della paraffina, poi in soluzioni di xilolo-paraffina in paraffina e poi va in stufa.

Il Microtomo si usa per il taglio e le sezioni da 2 μm fino a 20 μm. Sezioni seriali sono quelle fatte di continuo, una dietro l’altra. Si pone poi la sezione in vaschetta a 30 gradi e poi si raccoglie con vetrino e si asciuga. Il nucleo è acido (quindi basofilo), il citoplasma basico (quindi acidofilo). La colorazione con EMATOSSILINA-EOSINA (ee) è la colorazione di base nello studio microscopico. L’ematoxilina colorante basico colora il nucleo carico negativamente in blu-viola. L’eosina colora invece in rosso-rosso componenti basici carichi positivamente come il citoplasma.

I coloranti pericolosi devono essere acidicci opposte al tessuto che vanno a colorare. Si usa xilolo per togliere la paraffina in eccesso e poi alcool in grado decrescente per disidratare e poi si toglie l'eccesso con lavaggio in acqua distillata poi si può

colorare il passo perde è idratato e il colorante

è idrosolubile. Avviene poi il [...] che è

il cambiamento di colore a causa nel particolare

orientamento dei sali nell'equipe. Gli osservatori

il passo dobbiamo seguire il montaggio, siccome

il balsamo di canada ne mettiamo una

goccia sul vetrino e mettiamo un altro vetrino

di sopra che si chiama vetrino copri oggetti.

Si usa il balsamo di Canada perché ha

lo stesso indice di rifrazione del vetrino.

Si fa di nuovo passaggio in acqua decal e

xilolo (essenceite alcole) perde lo xilolo è

il solvente del balsamo di canada.

Il POTERE di Risoluzione è una distanza fra

due punti, è uno generale definita come la

distanza minima alla quale riusciamo a

distinguere due oggetti.

R = ^λ/_2n∙sena

λ = LAMBDA=Lunghezza d'onda di

radiazione elettromagnetica

2n = Indice di rifrazione del mezzo

interposto che è vetro nell'ottica.

sena = Angolo apertura delle lenti.

La risoluzione dell’occhio umano è di 0,2mm.

Le lenti in un occhio sono 3: film lacrimale

(liquido che bagna cornea), le conrea, l’uma

acqueo (liquido connevale esterno e (posteriore),

cristallino e corpo vitreo. La risoluzione del

microscopio ottico è di 0,2 μm (micron=micrometro).

Sena varia variante, dal tipo di lente. Le

risoluzione è svelato dell’ingrandimento.

La colorazione BICROMATICA è eseguito da due colori disuniti e poi ci sono colorazioni MONOCROMATICHE che usano una specie di colorante e TRICROMATICHE di AZAN-

–MALLORY, si usa come tecnica istologica per distinguere le cellule dalle matrici extracellulari e per sfruttare il residuo le fibre di collegare col il tessuto connettivo. Poi abbiamo una colorazione DIFFERENZIALE detta MAY-GRUNWALD/GIEMSA che si usa per differenziare i globuli bianchi e altri componenti del sangue è una colorazione specifica di se segui e visibile sono in cui differenze i coloranti acidi da colorano le parte basic delle cellule e i coloranti basic che colorano le parte acide. È una miscela di 2 coloranti: EOSINA e BLU DI METILENE (non-nome blu-violetta) e MAY- GRUNWALD. Il GIEMSA è formato da: EOSINA e AZURRA (esso colorazione non-nome assurra-grafia).

I due colorazioni May e Giemsa si risolvono in alcool metilico non si risolvono in acque. I due colorazioni Hanno composti dei sostanze diverse non vengono usati in successione recando una colorazione primarida ad una reacando.

ZIONE ARGENTICA si usa in tessuti inediti di cellule (tipo osseo o nervoso). Colorazione specifica per un determinato tessuto, nervoso, tipo cellulare miele

usato per mettere in evidenza localizzare o cercare una patologia ed esempio. (TEM)

Nella microscopia elettronica a trasmissione le velocità di penetrazione del tenuto dovrebbero lento. una curatrice che le post-fissazione si utilizzano atomi pesanti di peso atomico = 180, una punta di mezzo atomico. Se per esempio vogliamo che l'OSIO si leghi al tenue in questione; mettiamo il tetraossido di osmio in soluzione (OSO₄) dopo facciamo fissazione disitratatione e disporzione con acetone, il processo non diventa diretto senza e l'ossido e diversta viene preso all'OSIO. Si include in una resina più resistente il peso in generale in numerosi copie elettronice. Si può usare il DURCOPAN che è un resina idorosolubile formetta di 4 componenti miscelatoi che piu' espulsierano un calore oumbratto. Questa resina diverasta diuviuerà celolore generales quindi in uno la trufte. Si usa poi per il taglio, l'ultramicrotomo con lama di diamante o cristallo; le resezioni hanno uno spessore di 20 mM (nanometri) o anche di più. Si può al riflesso della luce divise il nelle sessioni o misurano i pesi, caloni diversi in base al colore secondo le pesione del peso. Questa sessioni vengono poi appogiate su un dischetto in reene o nickel (del dimetro di 3 MM) foruitatto a rete. Nel microsopo dove persone gli elettroni c'è il vuoto a 10^-4 atmosfere e 100 mila volts di effiuono di

potenziale.

Si possono usare Acetato di uranile (UO2) e citrato di piombo per colorare atomi pesanti e tenuti, così gli elettroni che attraversano il preparato vengono bloccati dagli atomi pesanti e nuclei dal preparato. L’emi e creo ombra relativa quelli che pensano entrano in fondo e in esea l’immagine nel diretto di 15 cm fluorescente in fondo al microscopio.

MICROSCOPIO A SCANSIONE (SEM)

può dare immagini del preparato in 3Dimensioni. Usano CO2 o Azoto liquido per sostecamento al punto critico. Acetato di parte insieme al passo poi portiamo CO2 da sostrinire l’acetato poi facciamo portare al punto critico emettendo e tagliendo acquei. Dobbiamo poi eseguire METALLIZZAZIONE per non far penetrare gli elettroni mettendo sul tenuto una sezione sottile di oro che viene usato così, per piacere il passo con 20 A (camnkio) d’oro. A unite di numero di leglossa non fai l’etro del sistema intrascendibile extra-ST).Gli elettroni che attraversano il preparato sono primari e secondari : i primi cioè riflessi i primari primaria denico le qualità del tenuto da esso è formato e secondari: doenne benepini in 3D aperti da una parte.

MICROSCOPIO AD EFFETTO TUNNEL,

è un potente strumento per il rilevamento di superfici a livello atomico. Le indentifasi e di passaggi di neutrone, più

microscopi:

OTTICO = 0,2 μM

TRASMISSIONE 'TEM' = 2 00 nM

SCANSIONE 'SEM' = 5 nM

STM EFFETTO TUNNEL = 0,4 nM e 0,04 nM

Microscopio A FORZA ATOMICA è uno strumento eccellente

ed un mezzo potentissimo di indagine.

Composto di una leva alla cui estremità è

montata una punta ricoperta (tip) di Silicio,

che ha un raggio di curvatura di nanometri.

Vengono eliminate le vibrazioni della leva e

della punta che vibrano a contatto con le

molecole. Coltur e in vitro e in seguito inducente

i proemi voci di processo progetti per ora in

vivo invece i hc piccole cellule sono vive

e attive durante l'osservazione.

Microscopio A CONTRASTO DI FASE e sem particole a

microscopio ottico che sfrutta l'interferenza luminosa.

MICROSCOPIO A LUCE è sem particole ottico

che sfrutta la luce cioè che vibra in

una sola direzione ('FOTONI').

Spermatogenesi e Ovogenesi

06/12/2013

• Aumento della PGE₂
  • Aumento permeabilità vascolare
• Aumento della PGF_2alpha
  • Ischemia cellulare con abbassamento del PH
• Aumento volumetrico follicolare
  • Compressione sui vasi superficiali del follicolo

Rottura parete follicolare

• Rilascio enzimi
  • Labillizzazione delle membrane lisosomiali
  • Aumento lisosomi
  • Aumento sintesi enzimi litici
  • Aumento sintesi enzimi della via asteroidea
• Aumento attività collegenastica
• Riduzione estrogeni
• Aumento del progesterone
• Edema strutture follicolari

Nelle cellule del l'epitelio germinativo

Picco pre-ovulatorio di LH

Ovvulazione