Diagnosi di laboratorio sulle malattie infettive

Trasporto dei campioni

Linee guida: I campioni devono essere trasportati il più velocemente possibile al laboratorio (entro 2 ore dal prelievo). Se ciò non è possibile, si deve usare adeguato terreno di trasporto e temperatura ottimale. Comunque non superare le 12 ore. Per piccoli volumi (< 1ml, < 1 cc), entro 15-30 min. Germi sensibili alla temperatura sono: Shigella spp, Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis, Haemphilus influenzae, Streptococcus pneumoniae e gli anaerobi. Nessun campione deve essere mai refrigerato (se non indicato diversamente dalle specifiche linee guida).

Esame microscopico batteriologico

Utile per l'osservazione di batteri in materiali normalmente sterili (liquor, sangue).

PROCEDIMENTO TECNICO

1. Si distende una piccola quantità del materiale in esame sul vetrino portaoggetti.
2. Si fissa (calore o metanolo).
3. Si colora.

Esame microscopico batteriologico utile per l'osservazione di batteri in materiali normalmente sterili (liquor,...

minerali delle specie microbiche (colonie)

Esame colturale- segue

Terreni diTerreni selettivi Terreni cromogeniciarricchimento

Contengono sostanzeContengono sostanze Contengono sostanze cheche favoriscono loche selezionano lo determinano lo svilupposviluppo di speciesviluppo di alcune colorato di alcune specieesigentispecie

Agar sale-mannite Agar sangue Candida spp.: Chromagar

Esame colturale- segue

PROCEDIMENTO TECNICO Incubazione delle colture su terreno solido o liquido37°C x 1-2 gg (in alcuni casi per qualche settimana) Identificazionesistemi di identificazione biochimica) tecniche di biologia molecolare (PCRper l’amplificazione di tratti specifici di DNAo di RNA del microbo ricercato)

Esame colturale - ANTIBIOGRAMMAE’ un test utile per verificare la sensibilità/resistenza di un microboagli antimicrobiciDopo aver seminato su terrenosolido il germe in esame siappoggiano sulla superficie deiantibiotici-dischetti imbevuti deglitest. Incubazione.Il mancato sviluppo del

germe(alone di inibizione) significa sensibilità a quell'antibiotico

Esame colturale in micologia

Terreni di coltura:

Terreno di Sabouraud (peptoni, glucosio, acqua con o senza agar)

Incubazione : t.a., 37°C x 24-48 h fino a 20 gg

Identificazione: prove biochimiche per i lieviti, osservazione morfologica per funghi filamentosi

Fungo filamentoso lievito

Esame colturale in parassitologia

I terreni di coltura sono poco usati perché la maggior parte dei protozoi sono difficili da coltivare. (Es. terreno NNN o di Tobie per Leishmania)

Identificazione: di routine è su base morfologica

In alternativa: tecniche immunologiche o di biologia molecolare

DIAGNOSI INDIRETTA

Esame sierologico

Ricerca di anticorpi nel siero

Ricerca di antigeni nel siero