Cromatografia

Cromatografia

è una tecnica in cui i componenti di una miscela sono separati in funzione della velocità con cui sono trasportati attraverso una fase stazionaria da una fase mobile liquida o gassosa

BIOLOGIA, FARMACOLOGIA, AGROALIMENTARE, SCIENZE

Fase mobile (eluente)(soluzione contenente gli analiti di interesse)

GlI analiti scorrono lungo la colonna con velocità differente in base alle interazioni che hanno con la superficie della fase stazionaria.Gli analiti che non hanno molte interazioni con la fase stazionaria scorrono più veloci, essi attraversano la colonna stazionaria molto velocemente.

Cromatografia: ve ne sono molti tipi, ma le più usate sono: LIQUIDA e GASSOSA

Fase mobile liquida:

• Assorbimento liquido/solido
• Ripartizione liquido/liquido
• Scambio ionico liquido/solido

Fase mobile gassosa:

• Assorbimento gas/solido
• Ripartizione gas/liquido

Assorbimento:

accumulo di materiale su passaggio alla superficie del solido; dovuto alla forza attrattiva che la fase solida esercita sulle molecole di gas (fenomeno che avviene nei chimici secondari).

a = p^m_n a e m dipendono dalla natura del gas e del solido e dalla temperatura

Cromatografia

... è una tecnica ... in cui i componenti di una miscela sono separati in funzione ... con cui sono transportati attraverso ... una fase stazionaria da una fase mobile liquida e gassosa.

Colonne Usate

• 1903 - Mikhail Tsvet, botanico russo
• 1952 - Sviluppo cromatografia, Premio Nobel
• 1937-2000 15 premi Nobel riguardo la cromatografia

Cromatografia = biologia, farmacologia, agraria, scienze

Fase mobile (eluente) (solvente contenente gli analiti di interesse) - Gli analiti scorrono lungo la colonna ... con velocità ... degli analiti dipendono dalle interazioni che hanno ... molecole della fase stazionaria.

Gli analiti meno hanno molte interazioni con la fase stazionaria scendiamo ... colonna stazionaria molto velocemente.

... cromatografia ve ne sono molti tipi, ma le più usate sono: liquida e gassosa.

Fase mobile liquida:

• Assorbimento liquido/solido
• Ripartizione liquido/liquido
• Scambio ionico liquido/solido

Fase mobile gassosa:

• Assorbimento gas/solido
• Nepulizzazione gas/liquido

Assorbimento: ... di molecole su passività ... superfici del solido ... dovuto alla forza attrattiva che la fase solida esercita sulle molecole di gas ... interazioni...

_X = ... a ... pn ... dipendono dalla natura del gas e del solido ... dalla temperatura ...^a

... molecole solide ...

... Viaggiano più lentamente ... viaggiano più velocemente.

Ripartizione

= quando un soluto si trova a contatto con due solventi differenti, esso si distribuisce tra i due secondo un rapporto costante che dipende dalla solubilità nei due.

Esempio: zucchero in H₂O e olio

Legge di ripartizione di Nernst

K = C_x/C_y

C_x = concentrazione soluto nel solvente x

C_y = concentrazione soluto nel solvente y

Cromatografia su carta

Cromatografia su colonna (più diffusa)

Gas Cromatografo

Bombola -> Gas di trasporto -> Regolatore di flusso -> Camera di iniezione

del campione -> Colonna -> Display

Termostato

Rivelatore

Misuratore di flusso

Acquisizione dati

Nel GAS CROMATOGRAFO le colonne sono molto lunghe, quindi per evitare queste enormi grandezze si attorcigliano le colonne su se stesse per ridurre lo spazio.

Risultato

Cromatogramma

Tipo di rivelazione

Picco cromatografico

Analisi qualitativa

Analisi quantitativa

Intensità

Tempo

T_R = Tempo di ritenzione di una sostanza che non interagisce con la colonna definito con il tempo di non rite.

1° picco

Poche inter.

Area

Molte interazioni

Rivelatore in assenza di analita

I picchi sono diversi perché il numero di interazioni è diverso.

Il tempo di ritenzione è il punto in cui si incontrano le

tangenti del picco, è il tempo impiegato da una sostanza per giungere alla colonna.

Se non ci sono correzioni: Tr = Tn

w: interazioni temporali con picco e la base di base

Area del picco cromatografico

Fattore di capacità = 1 sostanza

K’_A = ^K_AV_s/_Vm

V̅ = u · ¹/_{1 + K’A}

K’_A = ^{T_R - T_M}/_Tm

K’_A : Fattore di capacità

T_R : Tempo di ritenzione

T_M : Tempo morto

Esempio

K’ = ^{t_R - T}