Biologia Molecolare Clinica

Biologia molecolare clinica

Disordini cromosomici

• Variazioni del numero
• Riarrangiamenti

Disordini mendeliani o monogenici

Mutazioni di singole proteine

Disordini multifattoriali

Coinvolgimento di più meccanismi, anche ambientali

Valutazione della lesione molecolare

Marcatori molecolari (enzimi, proteine, geni) T Ea Eb EcA A B C D

Metaboliti prossimali

Metaboliti remoti

• Il marcatore metabolico generalmente indica la via metabolica colpita, raramente ci consente di effettuare una diagnosi accurata
• Pertanto, nella maggior parte dei casi è necessario ricorrere all’analisi molecolare

Per analisi molecolare si intende:

• Analisi dell’attività enzimatica da cellule o tessuto
• Studio del gene verosimilmente interessato

Strategie di analisi dei marcatori molecolari

(Enzimi, proteine, geni) T Ea Eb EcA A B C D

Enzima (autonomo, dipendente, regolatorio)

Proteina (trasportatore, recettore, canale)

• L’analisi proteica o enzimatica può essere fatta su omogenati di cellule coltivate o su biopsie d’organo
• La proteina interessata può funzionare da sola o con l’ausilio di altre proteine o cofattori la cui mancanza genera lo stesso difetto biochimico
• In alcuni casi si conosce il gene e la proteina ma non si conosce l’esatto ruolo biochimico
• I difetti molecolari monogenici sono quelli più facili da studiare

Alterazioni cromosomiche

Variazioni della struttura dei cromosomi

• Delezione (perdita di un tratto di cromosoma)
• Duplicazione (raddoppiamento di un tratto di un cromosoma)
• Inversione (pericentrica o paracentrica)
• Traslocazione (cambiamento di posizione di un segmento di cromosoma)
• Effetto di posizione
• Siti fragili

Ulteriori applicazioni della biologia molecolare

• Malattie genetiche
  • Identificazione di alterazioni a livello del DNA
• Malattie infettive
  • Identificazione di DNA di patogeni esogeni
• Identificazione individuale
  • Analisi di individualità genetica
  • Paternità
  • Identificazione da tracce

Variabili nella fase pre-analitica

Campionamento

• Tipologia del campione biologico di partenza (sangue intero, midollo, sangue secco, buffy-coat, saliva, acqua di lavaggio buccale, sezioni tissutali, tessuti fissati, etc.)
• Vetreria
• Invio dei campioni al laboratorio
• Conservazione dei campioni

Scopo: ottenere un campione quantitativamente e qualitativamente utile.