Relazione laboratorio di Biologia molecolare aggiornata al 2024

sono determinati dai sistemi ABO e Rh, e nel caso specifico. Il mio gruppo sanguigno è A. Ho

eseguito delle analisi del sangue in quanto tempo fa non ero a conoscenza del mio gruppo

sanguigno.

Labster 3 : Clonazione molecolare

In questo laboratorio abbiamo affrontato la modifica del genoma e la produzione di un nuovo organismo.

Abbiamo monitorato l'espressione del gene Rad52, focalizzandoci sui meccanismi di riparazione del DNA

indotti dalla radiazione, e abbiamo constatato l'importanza del gene Rad52 nella riparazione dei danni del DNA.

Il gene Rad52 è fondamentale poiché partecipa alla ricombinazione omologa, un processo che utilizza una

copia intatta del DNA come modello per riparare il DNA danneggiato.

Per confermare il coinvolgimento del gene Rad52, abbiamo eseguito diversi esperimenti per ottenere prove

riproducibili. Abbiamo introdotto un gene reporter EGFP per il gene Rad52, che ci ha permesso di monitorare

l'espressione del gene in tempo reale tramite la fluorescenza. Successivamente, abbiamo proceduto con

l'assemblaggio di un plasmide di espressione e la trasformazione delle cellule di lievito con esso, al fine di

introdurre il gene reporter nelle cellule e studiarne l'espressione del Rad52. Esponendo le cellule trasformate

alla radiazione, abbiamo valutato la loro risposta al danno del DNA.

Durante il laboratorio, ho incontrato una difficoltà nella fase di preparazione del vettore. Dopo aver eseguito i

passaggi, ho avuto difficoltà nell'identificare gli enzimi di restrizione con estremità piatte. Successivamente, ho

studiato più approfonditamente e ho compreso che dovevo valutare come il DNA era stato tagliato; gli enzimi

con estremità piatte presentano il suffisso "I" nel loro nome. Inoltre, ogni enzima riconosce una sequenza

specifica di basi del DNA.

E’ stato molto interessante durante le lezioni trattare argomenti come La tecnica PCR. Per me è stato più chiaro

ora il perché va inserito il DNA per ultimo. Va inserito per ultimo per evitare contaminazioni.

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