Spiegazione esercizi Microbiologia

n = (logN – logN0)/0,301

n = [(9log10 + log 1,3) – (7log10 + log2)]/0,301

n = [(9+0,113) – (7 + 0,301)]/0,301

n = 1,812/0,301 = 6,01

6) Avete seguito delle diluizioni successive di una coltura di Saccharomyces Cerevisiae in fase

stazionaria. Avete piastrato 1 ml delle diluizioni 10^-5 e 10^-6 e, dopo aver incubato le

piastre a 28 °C per 24 ore, contate 260 colonie per la diluizione 10^-5 e 24 colonie per la

diluizione 10^-6. Quante cellule per ml sono presenti nella coltura di partenza?

260 colonie x 10^5 = 2,6 x 10^7 CFU/ml

24 x 10^6 = 2,4 x 10^7 CFU/ml

Ora faccio la media aritmetica tra questi due valori: 2,5 x 10^7 CFU/ml

7) Qual è il numero di cellule che si ottiene se si integra per 20 ore un terreno di coltura per

10^2 cellule di un microrganismo che ha un tempo di generazione di 60 minuti?

n = 20/1 = 20

N = 10^2 x 2^20

8) Avete inoculato in 100 ml di terreno a base di triptone ed estratto di lievito 2x10^5 cellule di

Escherichia Coli provenienti da una coltura in fase esponenziale.

Dopo 3 ore avete 10^6 cellule/ml. Calcolare il tempo di divisione.

2 x 10^5/100 ml = 2 x 10^3 cellule/ml

n= (logN – logN0)/0,301 n = 8,9 cioé 9

Conoscendo il num. Di generazione e il tempo, possiamo calcolare t/n ovvero il tempo di

generazione:

g = t/n → 3h/9 → 0,333 h → 20 min

9) La coltura di partenza aveva la concentrazione cellulare pari a 1,5 x 10^10 CFU/ml. Ho fatto

una serie di diluizioni e ho ottenuto una coltura la cui concentrazione cellulare è 5 x 10^2

CFU/ml. Qual è il fattore di diluizione?

1,5 x 10^10/5 x 10^2 = 0,3 x 10^8 = 3 x 10^7

10) La coltura iniziale è di 8 x 10^1

2. Quali sono i tipi di diluizioni successivi che bisogna fare per arrivare a contare su una

piastra 32 colonie?

Ci chiediamo: Quale sarà il volume finale di ciascuna diluizione che dobbiamo fare?

Ce lo chiediamo perché nell'esercizio non c'è scritto!

Ricordare che il risultato finale non sarà in CFU/ml ma in numero di colonie.

Da 8 x 10^12 ne semino 0,1 ml. Quello che vedrò sarà una crescita a patina.

Per arrivare a quelle 32 è evidente che devo ancora diluire.