Principi della diagnosi microbiologica
Concetti principali
Una malattia da infezione deve essere necessariamente preceduta dall'instaurarsi di uno stato infettivo, che può essere provocato da un batterio, un parassita o un virus. Mentre la malattia da infezione è sempre preceduta dall'infezione, l'infezione può non essere seguita dalla comparsa della malattia clinicamente conclamata.
Tipi di diagnosi
- Diagnosi clinica: permette di identificare la malattia sulla base dei sintomi (aspetti soggettivi della malattia) e i segni (aspetti oggettivi della malattia).
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Diagnosi microbiologica: prevede l'identificazione dell'agente eziologico che ha causato l'infezione. Può essere di due tipi: diretta o indiretta.
- La diagnosi microbiologica diretta consiste nell'individuazione nel campione prelevato al paziente dell'agente eziologico o dei suoi componenti quali flagelli, acido nucleico, elementi capsulari, ecc.
- La diagnosi microbiologica indiretta invece consiste nel dimostrare la presenza di una risposta immunitaria specifica verso l'agente eziologico nell'organismo infettato.
Esami di diagnosi microbiologica diretta
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Esame microscopico:
- Vantaggi: velocità di esecuzione; economicità.
- Svantaggi: non permette di effettuare l'antibiogramma o la biotipizzazione; ha una scarsa specificità; non è automatizzabile né miniaturizzabile.
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Esame colturale:
- Vantaggi: elevata specificità; permette di fare l'antibiogramma e la biotipizzazione; permette di mantenere nel tempo il ceppo isolato.
- Svantaggi: non è automatizzabile né miniaturizzabile.
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Esame molecolare: consiste nel ricercare con sonde molecolari specifici profili molecolari, come sequenze nucleotidiche.
- Vantaggi: elevata specificità e sensibilità, permette la biotipizzazione e l'antibiogramma, è miniaturizzabile e automatizzabile.
- Svantaggi: costi elevati.
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Esame antigenico:
- Vantaggi: elevata sensibilità e specificità, economicità di esecuzione, automatizzabile e miniaturizzabile.
- Svantaggi: non permette l'antibiogramma né la biotipizzazione.
La diagnosi microbiologica indiretta consiste nell'esame sierologico che non permette l'antibiogramma, non permette la biotipizzazione, ha una elevata sensibilità e specificità, è miniaturizzabile e automatizzabile.
Tecniche di microscopia
Esistono diversi tipi di microscopio:
- Microscopio ottico: ha un potere di risoluzione di 0,2 micrometri e permette di vedere microorganismi e cellule sia vivi che non viventi.
- Microscopio in campo scuro: permette di vedere organismi non viventi.
- Microscopio in contrasto di fase: permette di vedere organismi vivi.
- Microscopio elettronico a trasmissione: permette l'esame ultrastrutturale di cellule e virus con immagini bidimensionali.
- Microscopio elettronico a scansione: fornisce immagini tridimensionali.