Istochimica

10/3

ISTOLOGIA

ISTOCHIMICA: Serve ad evidenziare sostanze chimiche all’interno della cellula o

nell’ambiente extracellulare (matrice extracellulare o sostanza fondamentale), sono metodi

impiegati quando la popolazione cellulare è eterogenea, come nel caso dei tessuti o degli

organi e quindi nel momento in cui si vogliono identificare sostanze chimiche in organuli o

componenti cellulari che in genere non sono facilmente separabili tramite metodi

biochimici. Se vogliamo vedere in situ, in loco, le determinate sostanze presenti facciamo

riferimento a queste tecniche, una prerogativa fondamentale infatti delle reazioni

istochimiche è che la reazione deve essere specifica per la sostanza che si vuole mettere

in evidenza e che questa sostanza non deve subire degli spostamenti, il prodotto di

reazione, per esempio fra lipidi e colorante deve cadere, corrispondere, esattamente al

sito, al luogo, in cui si trova quella determinata sostanza in modo da poter identificarla

nella cellula o tessuto.

Con l’istochimica possiamo mettere in evidenzia le 4 macromolecole principali:

GLUCIDI (mono, oligo e polisaccardi; di riserva (amido), di sostegno (cellulosa))

LIPIDI (di deposito (adipociti), di struttura (lipidi membrane plasmatiche, doppio strato

memb. Plasmatica))

PROTEINE (peptidi semplici o coniugati (lipoproteine,glicoproteine), fiborse (tessuto

connettivo),globulari (enzimi, ormoni))

ACIDI NUCLEICI (nucleotidi, dna, rna)

E’ necessario ricordare le reazioni più comuni.

Per i carboidrati la reazione più comune è la reazione PAS o REAZIONE DELL’ACIDO

PERIODICO SCHIFF, spesso associata con ALCIAN BLU (colorante per gruppi acidi), una

reazione PAS è una reazione d’elezione per mettere in evidenza le componenti glucidide.

Sfruttiamo le reazioni chimiche per effettuare un trattamento con l’acido periodico che

ossida in gruppi aldeidici i gruppi glicolici degli zuccheri (è una reazione vera e propria,

non una colorazione) e questi gruppi aldeidici verranno poi messi in evidenza con un

colorante che colora di rosso e così tutte le componenti glucidiche possono essere messe

in evidenza tramite PAS che mette in evidenzia anche una componente fondamentale del

tessuto epiteliale: la membrana basale.

Esempi di Pas: sezione trasversale dell’intestino, i villi intestinali sono rivestiti da un

epitelio caratterizzato da numerossissime cellule mucipare caliciformi che contengono il

muco (componente polisaccaridica, un carboidrato) messo in evidenza con PAS. O negli

epatociti, ricchi di glicogeno (carboidrato) messo in evidenza.

Per i lipidi esistono particolari reazioni perché come abbiamo visto in un comune

preparato istologico in genere i lipidi vengono sciolti da tutta la scala di alcoli (procedura

solita) e quindi ciò che di fatto noi vediamo è una situazione nell’adipocita in cui vediamo

una grossa goccia bianca vuota non colorata perché questa era la goccia lipidica che è

stata sciolta.