Istochimica

Istologia e istochimica

L'istochimica serve ad evidenziare sostanze chimiche all'interno della cellula o nell'ambiente extracellulare (matrice extracellulare o sostanza fondamentale). Questi metodi sono impiegati quando la popolazione cellulare è eterogenea, come nel caso dei tessuti o degli organi, e quindi nel momento in cui si vogliono identificare sostanze chimiche in organuli o componenti cellulari che in genere non sono facilmente separabili tramite metodi biochimici.

Se vogliamo vedere in situ, in loco, le determinate sostanze presenti, facciamo riferimento a queste tecniche. Una prerogativa fondamentale infatti delle reazioni istochimiche è che la reazione deve essere specifica per la sostanza che si vuole mettere in evidenza e che questa sostanza non deve subire spostamenti. Il prodotto di reazione, per esempio fra lipidi e colorante, deve cadere, corrispondere, esattamente al sito, al luogo, in cui si trova quella determinata sostanza in modo da poter identificarla nella cellula o tessuto.

Macromolecole principali evidenziabili con l'istochimica

Con l’istochimica possiamo mettere in evidenza le 4 macromolecole principali:

• Glucidi (mono, oligo e polisaccaridi; di riserva come amido, di sostegno come cellulosa)
• Lipidi (di deposito come negli adipociti, di struttura come i lipidi delle membrane plasmatiche, doppio strato membrano plasmatico)
• Proteine (peptidi semplici o coniugati come lipoproteine e glicoproteine, fibrose come nel tessuto connettivo, globulari come enzimi e ormoni)
• Acidi nucleici (nucleotidi, DNA, RNA)

Reazioni più comuni per l'evidenziazione

È necessario ricordare le reazioni più comuni. Per i carboidrati, la reazione più comune è la reazione PAS o reazione dell'acido periodico-Schiff, spesso associata con alcian blu (colorante per gruppi acidi). Una reazione PAS è una reazione d’elezione per mettere in evidenza le componenti glucidiche.

Sfruttiamo le reazioni chimiche per effettuare un trattamento con l’acido periodico che ossida in gruppi aldeidici i gruppi glicolici degli zuccheri (è una reazione vera e propria, non una colorazione) e questi gruppi aldeidici verranno poi messi in evidenza con un colorante che colora di rosso, così tutte le componenti glucidiche possono essere messe in evidenza tramite PAS, che mette in evidenza anche una componente fondamentale del tessuto epiteliale: la membrana basale.

Esempi di PAS: sezione trasversale dell'intestino, i villi intestinali sono rivestiti da un epitelio caratterizzato da numerosissime cellule mucipare caliciformi che contengono il muco (componente polisaccaridica, un carboidrato) messo in evidenza con PAS. O negli epatociti, ricchi di glicogeno (carboidrato) messo in evidenza.

Reazioni per i lipidi

Per i lipidi esistono particolari reazioni perché, come abbiamo visto in un comune preparato istologico, in genere i lipidi...