Genetica - Schemi

Genetica

Esperimenti e Scoperte

• Avery, MacLeod e McCarty: ricerca della molecola informazionale (batteri IIR e IIIS)
• Hershey, Chase: ricerca della molecola informazionale (E. Coli e Fago T2)
• Meselson, Stahl: scoperta del modello di replicazione del DNA
• Chambon: scoperta delle sequenze introniche ed esoniche
• Test di fluttuazione (Luria, Delbrück): ricerca dello scenario delle mutazioni
• Test di replica plating (coniugi Lederberg): ricerca dello scenario delle mutazioni
• Cairns: ricerca dello scenario delle mutazioni
• Lederberg, Tatum: scoperta del meccanismo di coniugazione batterica
• Jacob e Monod: scoperta degli enzimi inducibili ed elaborazione del modello dell’operone
• Ingegneria genetica: meccanismo di formazione della “chimera” molecolare

CdL in Scienze Biologiche

Avery, McCarthy, Lead (1942)

• Batteri III R, Se iniettati nel topo.

• Esperimenti di Griffith:

Cercano il p. trasformante

• III S → L. d. c. d.c.;
• III S → Stabile;
• III S + i. prot. + c. c. e. p. d.s.;
• III S → L. d.c.;
• III S + i. rib.;
• III S + c. totale d.c.;
• III S + d. d. c. d.c.;

(enzimi che degradano)

DNA o RNA?

• III S → 2 L. d. c. cu.

1. 1. → III S + RNAse: →
2. 2. → III S + DNAse:

N.B.:

Le proteasi usate non degradavano completamente le proteine, di conseguenza questi esperimenti non confermavano che fosse il DNA il p. trasf.

A.M.

Test di Fluttuazione (Luria-Delbrück)

• Mi ca determinare se mut. sono pre-ad. o post-ad.
• Si consideri: ↻ frequenza di mutanti post-ad. 1/10⁶

Esperimento di controllo

E.C._s Sensibili al T₂

*Saggio bacon

Si disperde di 1000 c/ml

Dato la f. di mut. del circa 1/10⁶, il prob. di avere ↻ mut. è molto basso

Terapo specie

Fatte molt tplature fino ad avere 10⁸ c/ml

1/ml ↻ 10⁸ cellule

T₂ T₂ T₂ T₂ T₂ T₂ T₂ T₂

• Si possono avere due scenari:
  • Mut. pre-ad. → I mutanti at appaiono nelle piastre → Stesso numero di nuclosi: in ogni piastra
  • Mut. post-ad. → Stesse preparza sololotivo → Stesso numero di mutanti in ogni piastra
• L’esperimento di controllo serve che se di determinare il numero di mutanti in ogni piastra

Esperimento di verifica

E.C._s Sensibili al T₂ + saggio benco

9 ditiquote di 1000 c/ml

Terapo specie

Fatte molt tplature fino ad avere 10⁸ c/ml

1/10 ml ↻ 10⁷ cellule

Plosiare con il T₂

• Si possono avere due scenari:
  • Mut. post-ad. → Stesso card del controllo → Stesso numero di mut del controllo
  • Mut. pre-ad. → Diversi diverni di mut. in ogni piastria in quanto le mutazioni sono più avviate nel tempo

A.M.

Jacob e Monod (1950-1960)

Scoperta degli enzimi inducibili:

• E. Coli = fonte di energia: glucosio(Funge anche da β-galattosidasi)
• In assenza di glucosio: lattosio(Fonte di β-galattosidasi)

1. Semina di E. Coli su terreno minimo e glucosio (MH + glu.)↓L'attività enzimatica della β-g.(attività basale)
2. Semina di E. Coli su terreno minimo e lattosio (MH + lat.)↓Picco dell'attività enzimatica della β-g.
3. Aggiunta del glucosio al terreno minimo con solo lattosio (MH + glu. + lat.)↓Lieve mantenimento del picco dell'attività enzimatica e successivo declino(blocco attività dell'enzima)

L'esperimento dimostra che la β-galattosidasi è un enzima inducibile.

Dimostra che il solo lattosio è una condizione necessaria ma non sufficiente: anchenella regolazione dell'enzima, dove esserne presente basta il glucosio.

A.M.

Genetica

Fago λ

Ciclo litico e lisogeno

• Schema del meccanismo di regolazione dell'espressione dei geni necessari all'ingresso in una o l'altra via

CdL in Scienze Biologiche

Anno Accademico 2019-2020

A.M.