Emocoltura

L'EMOCOLTURA

Il risultato ottimale di questo esame dipende da molteplici fattori fra cui principalmente il volume del campione, il momento del prelievo, l'intervallo ed il numero dei prelievi, l'accuratezza del prelievo (disinfezione della cute), le caratteristiche del mezzo di coltura, la capacità del sistema analitico di evidenziare lo sviluppo batterico. P. Urbano 2008 L'Emocoltura è fra gli esami di laboratorio che vengono richiesti meno di quanto sarebbe appropriato. Per esemplificare vengono riportate qui di seguito le principali situazioni cliniche in cui è importante eseguire il test:

• Endocarditi ed infezioni endovascolari
• Epiglottite acuta
• Polmonite batterica
• Pielonefrite ascendente
• Osteomielite ematogena
• Meningite batterica
• Ascessi addominali
• Immunodepressioni
• Cateterismi venosi e arteriosi
• Sindromi ematologiche maligne
• Infezioni sistemiche ecc. P. Urbano 2008

% di positività in varie situazioni:

• Endocarditi ed infezioni

• endovascolari 85 - 95
• Epiglottite acuta 80 - 90
• Polmonite batterica 5 - 30
• Pielonefrite ascendente 30 - 50
• Osteomielite ematogena 30 - 50
• Meningite batterica 50 - 80
• Ascessi endoaddominali varia
• Febbre di origine sconosciuta varia
• P. Urbano 2008

Falsi negativi

• Per situazioni cliniche
• Pregressa terapia antibiotica (60% dei negativi)
• Uremia
• Per difficoltà di isolamento
• Abiotrophia : "Nutritionally variant streptococci"
• Miceti
• Brucella sp.
• Nocardia sp.
• Bartonella sp.
• Altri batteri a lento o lentissimo sviluppo
• Per non utilizzo delle tecniche elettive
• Micobatteri
• Leptospira sp.
• Legionella sp
• Borrelia sp.
• Perché il germe non è coltivabile
• Chlamydia sp. (febbre Q)
• Coxiella burneti
• Rickettsiae (Whipple Disease Bacillus)
• Tropherina whippleri
• P. Urbano 2008

Falsi positivi

• Per contaminazione del campione
• Dal 30 al 50% dei risultati positivi sono falsi positivi.
• Per identificarli:
• Aspetti clinici
• Decorso clinico non tipico
• Non riscontrata l'infezione primaria con lo stesso isolato
• Assenza di

leucocitosi o deviazione a sinistra

Aspetti microbiologici

Flora polimicrobica

Positività dopo 5-6 giorni di incubazione

Unico isolamento da più flaconi di un contaminante comune (per esempio: Stafilococchi non aurei)

Il giudizio di positività vera deriva quindi da molteplici fattori che devono tener conto dei giorni necessari alla positivizzazione del test, della presenza di positività in più flaconi, della classe di rischio clinico e della categoria di microrganismo. P. Urbano 2008

L'ASEPSI è ESSENZIALE evita i falsi positivi (contaminazione con germi opportunisti)

Il sangue prelevato da arteria o CVC spesso dimostra la colonizzazione del catetere intravascolare e non la batteriemia. Per cui ha scarso significato un'emocoltura eseguita da CVC a meno che non si voglia dimostrarne la contaminazione. P. Urbano 2008

MODALITÀ DI PRELIEVO

Selezionare un diverso punto per ogni prelievo.

1) Disinfettare accuratamente la zona della puntura venosa

2) con

soluzione di disinfettante battericida volatile iniziando in cerchi concentrici coprendo un'area di circa 4-5 cm. Lasciare asciugare e introdurre l'ago senza ripalpare la zona disinfettata; se fosse necessario palpare di nuovo la zona disinfettata, usare guanti sterili. Disinfettare con uguale disinfettante il tappo di ogni bottiglia e lasciare asciugare. Introdurre il sangue nella bottiglia e agitare bene per impedire la formazione del coagulo. Porre sul flacone l'etichettatura prevista per identificare il paziente senza coprire eventuali codici a barre già stampati sul flacone stesso. P. Urbano 2008 BacT/Alert system blood culture bottles: aerobic, anaerobic, and pediatric. Each contains a colorimetric photosensor bonded to the bottom of the bottle. P. Urbano 2008 Materiale necessario P. Urbano 2008 Nota bene il prelievo il prima possibile e prima della terapia antimicrobica. Effettuare il prelievo prima del rialzo febbrile (60-90 minuti prima è il

Momento in cui il numero dei batteri nel sangue è maggiore) Se questo non è prevedibile allora prelevare all'inizio del rialzo febbrile [al brivido] sempre il quesito diagnostico dato che i tempi di incubazione possono variare in funzione dei diversi patogeni in causa può non evidenziare una batteriemia.

Un solo prelievo intermittente e rende difficile interpretare il significato clinico dell'isolamento di certi microrganismi P. Urbano 2008

Obtaining Blood Culture

Poor/Improper Venipuncture Technique

• No hand hygiene prior to beginning venipuncture
• Hub not disinfected prior to obtaining blood specimen
• Lack of blood transfer device within 30 minutes
• Inadequate skin disinfection before venipuncture

Poor/Improper Line Draw Technique

• Lack of safety devices for venipuncture
• IV fluids not discontinued prior to obtaining blood cultures
• Chlorhexidine/alcohol skin prep not used

Poor/Improper Supplies

• Incorrect length of transfer device

Poor/Improper Time

• No hand hygiene prior to beginning venipuncture
• Once obtained, blood specimen not sent to lab

Contamination of Vascular access

• Contamination of vascular access
• Hub not disinfected prior to obtaining blood specimen

notvenipuncture site changed with local skin Infusion device according to Waste blood anesthetic components policy aspirated prior Improper timing of outdate/not Site contaminated to culture repeated cultures changed when palpation Multiple lumens according to occurs after skin of CVC used for policy preparation multiple blood Improper or lack of cultures Vascular end time notation on Multiple sticks Wrong blood care in line bottles/reports Flawed with same culture bottle(s) with blood left needle Blood used in the end cap Culture Top of culture bottle Nurses are too Not enough blood Results Inexperienced not disinfected prior busy to follow drawn clinicians to blood transfer policy Resident unfamiliar Blood transfer Inability to Insufficient volume with policy device MDs too busy to determine time added to culture follow policy contaminated due to positivity of bottle Policy variations to reuse or bottles between nursing Agency, pool incorrect use and phlebotomy staff not familiar with policy Once in lab, cultures not No

Written/processed within 30 minutes

Policy: Policy unavailable to physicians and staff

Ruth Carrico PhD RN CIC

School of Public Health and Blood Education Microbiology Staffing Information Sciences

Contamination University of Louisville

During Transfer Volume Acuity/Time Rev 09/07 of Blood to ruth.carrico@louisville.edu

P. Urbano 2008

Culture Bottle

Suggerimenti per una corretta esecuzione dell'esame

• Relazione diretta fra volume di sangue prelevato e sensibilità diagnostica
• Mantenimento del rapporto inoculo/terreno
• Nell'adulto usare circa 10 ml di sangue per flacone;
• Nel bambino, che ha cariche microbiche maggiori, da 1 a 5 ml di sangue per flacone.

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati

Sospetta sepsi meningite, osteomielite, artrite, polmonite ecc.:

Due o tre prelievi diversi a distanza di circa mezz'ora e prima di iniziare la terapia antimicrobica.

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati 2

(NB L'incidenza di emocoltura negativa in Sospetta

Endocardite acuta: il corso di endocardite varia dal 2.5 al 64%. Seguendo criteri diagnostici molto rigorosi e tecniche colturali ottimali, i casi di negatività sono intorno al 5%.

Primo accertamento: Tre prelievi diversi a distanza di circa mezz'ora e prima di iniziare la terapia antimicrobica. Segnalare sempre sulla scheda di richiesta il sospetto diagnostico di endocardite per consentire il prolungamento dell'incubazione oltre i consueti 5-7 giorni.

Controlli successivi: Due, tre prelievi diversi a distanza di circa mezz'ora al 7° - 14° - 28° - (42°) giorno, dopo 1 mese dalla sospensione della terapia antimicrobica e, ove indicato, dopo 3 - 5 mesi. Segnalare sulla scheda di richiesta che si tratta di un controllo e indicare il microrganismo eventualmente isolato nel primo accertamento.

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati:

Sospetta endocardite sub-acuta o cronica: Tre prelievi diversi a distanza di circa mezz'ora e prima di iniziare la terapia antimicrobica.

Ripetere dopo 24 ore.

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati 4

Sospetta endocardite, sepsi ed altre cause di batteriemia in paziente sotto trattamento antibiotico:

Due prelievi diversi per tre giorni consecutivi e lontano dalla somministrazione del farmaco.

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati 5

Paziente trattato con antibiotici 1-2 settimane prima:

Due prelievi separati nel giro di circa un'ora per tre giorni consecutivi.

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati 6

Febbre di origine sconosciuta:

Due prelievi diversi a distanza di circa mezz'ora per tre giorni consecutivi

P. Urbano 2008

Protocolli consigliati 7

Età pediatrica:

Campioni di 1-2 ml per 2-3 volte nella giornata.

P. Urbano 2008

Tipi di flaconi attualmente in uso:

BACTEC (con resine)

TAPPO BLU (aerobi)

TAPPO ARANCIONE (anaerobi)

TAPPO VERDE (specifici per miceti e da usare solo per scopi particolari: prendere accordi

P. Urbano 2008