Crescita Microbica

Il controllo della crescita microbica

Crescita microbica

Crescita microbica = aumento del numero di cellule. I batteri si duplicano per fissione binaria (20 min. per E. coli).

Concetto di crescita e tasso di crescita microbica

• Tempo di duplicazione cellulare
• Crescita esponenziale

Parametri di crescita

1 cell. 2 cell. 4. cell. 8 cell n cell.

0 1 2 3 n

N = N₀ 2ⁿ (n = numero di generazioni nella fase esponenziale)

^{Log N = Log N₀ + n Log 2}

^{Log N - Log N₀ = n Log 2}

n = ^{Log N - Log N₀} / log 2 = 0,301

n = 3,3 (Log N - Log N₀)

Tempo di generazione

Tempo necessario ad una popolazione microbica per raddoppiare: g = t/n

Esempio: in 2 ore una popolazione microbica passa da 5 x 10⁷ a 1 x 10⁸ cell/ml; qual è il tempo di generazione?

Identificazione dei microrganismi

Identificare una particolare specie microbica.

• Metodi colturali e non colturali
• Osservazione diretta delle cellule
• Studio delle proprietà metaboliche
• Studio delle proprietà immunologiche
• Studio del genotipo

Test della catalasi

La catalasi è un enzima posseduto da alcuni gruppi microbici. Tale enzima catalizza la reazione: 2 H₂O₂ ➔ 2 H₂O + O₂.

Bacillus +, Clostridium –, Streptococcus -, Staphylococcus +, LAB – (v), Enterobacteriaceae +, Pseudomonas +

Test della catalasi (procedura)

• Porre su un vetrino 1 goccia di H₂O₂ al 3% v/v.
• Stemperarvi una colonia prelevata con un’ansa da una piastra di isolamento.
• Verificare la formazione di bolle di gas (O₂).

Test della ossidasi

Enzima citocromo c ossidasi, presente in particolari gruppi microbici. È un enzima della catena respiratoria di trasporto degli equivalenti redox. Si utilizza come reagente la tetrametil-p-fenilendiamina.

Test della ossidasi (procedura)

• Esistono kit rapidi costituiti da supporti (dischetti o bacchette) imbevuti del reagente.
• Si pone a contatto una colonia isolata con il supporto e si attende pochi secondi per osservare un eventuale viraggio color blu-viola.

Esempi

• Sono ossidasi positivi: Pseudomonas, Aeromonas, Moraxella, Neisseria.
• Sono ossidasi negativi: Enterobacteriaceae, Lactobacillus, Acinetobacter.