Colture isolanti

Colture isolanti

Coltura pura

Quando una specie batterica è seminata su di un terreno solido, esso viene posto poi a temperatura ottimale (per esempio 36 °C per batteri patogeni) per un periodo di tempo (incubazione) che è in genere di 48-72 ore. Ciò permette una rapida crescita microbica in colonie. Trascorso tale termine i batteri, avendo consumato tutto il substrato nutritivo del terreno, tenderanno rapidamente all’estinzione.

Per evitare ciò e consentire la sopravvivenza in laboratorio della specie coltivata, si effettua il trapianto in altro terreno (coltura di mantenimento): con un ago di metallo si preleva una sospensione di batteri dalla coltura in estinzione e la si inocula strisciando l’ago su di un nuovo terreno fresco sterile.

La tecnica del trapianto e l’uso di terreni solidi consentono di effettuare l’isolamento in coltura pura di una singola specie batterica. L’isolamento in coltura pura è un metodo indispensabile qualora si voglia isolare un clone di una singola specie batterica da un materiale contenente popolazioni microbiche miste (pus, sangue infetto, escreato, feci).

Una coltura pura si ottiene mediante varie tecniche, la più semplice delle quali è la semina per disseminazione in superficie, ovvero per strisciamento e diffusione su piastra: si semina il materiale in agar (strisciandolo o distribuendolo con una spatola di plastica in modo da favorire la separazione dei batteri) e si pone poi la piastra Petri inoculata in termostato, alla temperatura ottimale, per 48 ore.

I batteri incubati si moltiplicheranno sul terreno solido producendo colonie distinte l’una dall’altra, ciascuna delle quali sarà composta da una singola specie batterica. Si preleva poi con un’ansa una piccola porzione di una colonia pura e la si trapianta in altro terreno sterile, ottenendo in quest’ultimo, dopo incubazione in termostato, una coltura pura.