Citologia, embriologia e istologia - Appunti lezioni

Sabato 28-11-2013

ISTOLOGIA

I e II sutdio dei tessuti

Metodi di indagine istologica:

• Microscopia
• Microscopia
• Preparazione dei vetrini

Istologia (classificazioni tessuti):

• Epiteliale
  • Rivestimento
  • Ghiandolare
• Connettivo
  • Riproprianamento dato
  • Speciali:
    • Cartilagine
    • Osseo
    • Sangue e linfa
• Muscolare: striato scheletrico, striato cardiaco, liscio
• Nervoso

Unità di misura in istologia:

• Millimetro (mm) - 1/1000 m - < microscopio ottico, occhio umano
• Micrometro (µm) - 1/1000 mm - < microscopio ottico
• Nanometro (nm) - 1/1000 µm - < microscopio elettronico
• Angström (Å) - 1/10 nm - < microscopio elettronico

I tessuti sono l'insieme omogeneo di cellule [...]

Cellule - Tessuti - Organi - Apparati - Corpo

Istologia

Studio dei tessuti

Metodi di indagine istologica:

• Microscopia
• Telecamera
• Preparazione dei vetrini

Tipologia (Classificazioni tessuti):

• Epiteliale
  • Rivestimento
  • Ghiandolare
• Connettivo
  • Prevalentemente denso
  • Speciali:
    • Cartilagine
    • Osseo
    • Sangue e linfa
• Muscolare
• Nervoso

Unità di misura in istologia:

• Millimetro (mm) = 1/1000 m = microscopio ottico occhio umano
• Micrometro (µm) = 1/1000 mm = microscopio ottico
• Nanometro (nm) = 1/1000 µm = microscopio elettronico
• Angstrom (Å) = 1/10 nm = microscopio elettronico

I tessuti sono formati da insiemi omogenei di cellule e di sostanze

Cellule → tessuti → organi → apparati → corpo

• MICROSCOPIO •

• luce visibile = 380-800 nm
• UV
• infrarossi

• Limiti di ingrandimento: Potere di risoluzione.

• Diffrazione: distanza alla quale due oggetti possono essere distinti.
• Cambia a seconda delle condizioni in cui osservi.
• Può essere migliorato con strumenti ottici.
• Limite separatorio occhio = 75nm ai 25cm di distanza.

• Microscopio ottico (luce) :

Struttura di illuminazione: fare scorrere.

• Preparato al centro luce.

Condensatore:

• Fa scorrere porta-oggetto. Movimento e ampiezza all'altezza.
• Obiettivo: 2,4,10, e.g. 4X, 10X, 40X. Più grande (4X = 40 ingrandimenti).

Oculare: 4-15.

• Microscopio a fluorescenza:

• Strumento specifico adatto a rilevazione fluttuazioni.
• Da auto-fluorescenze (fluorescenza propria).
• Ansioluminodatori con epitopo a fluorocromi (marcati) (fluorescenza secondaria).
• Proiettano il coloro particolarmente delle onde lunghe nel microscopio diretto della lunghezza.

d'acciaio (noi fusi) che diventa visibile

lampada a vapori di mercurio

• Fluorescenza naturale
  • Vitamina A
  • Rafine
  • Clorofilla
• Fluorescenza indotta: uso di fluorocromi
  • Fluoresceina (verde-giallo)
  • Rodamina (rosso)
  • Issopo (Ros.) —+ nucleo

Vetri in quarzina; usa telecamera per fotografare o filmare il vetrino; visto che la fluorescenza decade

Tutti fluorocromi sono legabili in modo specifico fa proteine (immuno fluorescenza ); permettendo la colorazione di strutture cellulari di interesse e usando queste può selezionarle;

Microscopio elettronico:

Passaggio di elettroni (non luce); elettronde d'oro sul preparato per lo studio delle strutture subcellulari

• Due tipi o a trasmissione (TEM)
  • Visione bidimensionale delle strutture cellulari
• o a scansione (SEM)
  • Visione tridimensionale delle strutture cellulari

Prestazioni di un apparato istologico

• Fissazione
• Disidratazione (serie ascendente degli alcoli)
• Diafanizzazione
• Inclusione
• Incisione
• Inclusione
• Taglio (citotomia)
• Depiatinizzazione
• Re-idratazione (serie ascendente degli alcoli)
• Colorazione
• Disidratazione (Ct. serie ascendente degli alcoli)
• Chiarificazione
• Montaggio

1) Fissazione

Ha lo scopo di impedire che i tessuti escano dall'organismo vadano incontro ai processi di autolisi (distruzione dei tessuti operata dagli enzimi cellulari in assenza di O2) e di putrefazione (distruzione dei tessuti provocata dai germi).Ha lo scopo di: Bloccare l'attività enzimatica:

• Evitare l'attivazione dei germi;
• Fissare le cellule in modo che corrispondano alle condizioni che si presentano al momento del prelievo;
• Vanno dall'essiccamento: Fissativi secchi e fissa