Il cariotipo
Il contenuto di DNA e il numero di cromosomi variano negli esseri viventi: da uno nei batteri a centinaia negli organismi superiori. Il numero dei cromosomi è costante per una determinata specie vivente e cambia tra le diverse specie.
Eterocromatina
La cromatina interfase altamente condensata si divide in:
Eterocromatina costitutiva
Eterocromatina che rimane sempre eterocromatica in tutte le cellule.
Eterocromatina facoltativa
Eterocromatina che può diventare eucromatina e viceversa a seconda delle condizioni cellulari.
Eucromatina
Cromatina meno condensata, generalmente associata a geni attivi.
Procarioti
Il DNA nei procarioti si trova generalmente in forma circolare e non confinato in un nucleo definito.
La vita intima del genoma
Secondo Tom Misteli, i cromosomi non sono sparsi a caso. Ciascuno occupa una posizione specifica. Questa organizzazione nucleare riflette lo stato funzionale di ciascun cromosoma e dei geni che trasporta.
Visualizzazione dei cromosomi
I cromosomi espansi sono stati visualizzati mediante la tecnica Chromosome painting (Le Scienze 512). I cromosomi sono messi in evidenza con molecole fluorescenti legate a piccoli oligonucleotidi che riconoscono le sequenze nucleotide specifiche di ciascun cromosoma.
Interazioni tra cromosomi
I cromosomi che occupano posizioni vicine nel nucleo interagiscono tra di loro. I "vicini di casa" di solito sono costanti. I cromosomi sono disposti in modo differente nei diversi tipi di cellule.
Esperimento di Hershey-Chase
Quando una cellula batterica viene infettata da un virus, solo il DNA del virus entra nella cellula.
Struttura del DNA
La struttura a doppia elica del DNA consente di portare l'informazione e di autoreplicarsi: i nucleotidi si legano con legame fosfodiestereo. Estremità 3’ OH libera ed estremità 5’ fosfato libera.
Esperimento di Meselson e Stahl (1957)
Dimostrò che la replicazione del DNA è semiconservativa.
DNA eucariotico
La sintesi del filamento discontinuo richiede diversi enzimi:
- Primasi
- DNA polimerasi III
- DNA polimerasi I
- DNA ligasi
- DNA elicasi e proteine destabilizzatrici dell’elica
Le eliche del DNA devono essere tenute separate durante la replicazione. La sintesi procede in direzione 5' - 3', la DNA polimerasi forma legami fosfodiesterei tra il 3' OH della catena in allungamento ed il 5'P di un nuovo nucleoside trifosfato (energia). La sintesi necessita di un iniziatore di RNA: la Primasi.
Sintesi del DNA
La sintesi avviene in modo:
- Continuo
- Discontinuo con frammenti di Okazaki
DNA polimerasi III agisce come correttore delle bozze. Altrimenti, si possono verificare mutazioni puntiformi e alleli.
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