Biologia animale

Biologia

Composizione chimica dei viventi

Acqua

L'acqua è il più importante composto sulla Terra, assolutamente necessario alla vita. Le sue proprietà più importanti sono l'asimmetria (che vede i due atomi di H opposti a quello di O), la polarizzazione dei legami covalenti presenti nella molecola, e la tendenza dei suoi elementi a formare legami idrogeno (fino a quattro in contemporanea). Queste proprietà sono in grado di far sì che l'acqua formi dei reticoli molto fitti che richiedono energia per rompersi (con conseguente evaporazione). Inoltre, tende a formare legami deboli con numerosi gruppi chimici, quindi può fungere da solvente e può proteggere la cellula da eccessivo calore, da freddo e da radiazioni dannose. La sua polarità è molto importante poiché è in grado di interagire con altre molecole polari, che diventano, quindi, solubili al suo interno. È, infine, una sostanza anfotera, perché in grado di essere sia un acido (H₃O⁺) che una base (OH^-). Gli acidi sono quelle sostanze in grado di donare uno ione idrogeno, mentre le basi lo ricevono. La concentrazione molare dei protoni (H⁺) in una soluzione è detta pH e si esprime pH = -log [H⁺], e corrisponde, ad esempio, a 10^-5 M in una soluzione con pH 5.

La natura delle molecole biologiche

Oltre all'acqua, alla base della vita ci sono gli atomi di carbonio. Le sue proprietà lo rendono un elemento unico, in quanto, con i suoi quattro elettroni al livello esterno e con la dimensione media del suo nucleo, è in grado di formare legami con moltissime molecole, e può legare altri atomi di carbonio, creando catene lineari, cicliche o ramificate. I composti più semplici del carbonio sono gli idrocarburi (C₂H₆). Il carbonio, inoltre, è alla base della formazione dei gruppi funzionali, che si comportano come unità che si aggiungono ad altre molecole organiche, conferendo le proprietà chimiche, fisiche e solubili ad esse. I composti del carbonio possono essere distinti per il ruolo nel metabolismo in macromolecole (catene molto lunghe e complesse, come le proteine, gli acidi nucleici, i polisaccaridi e i lipidi - polimeri i primi tre sono composti da monomeri), unità costitutive delle macromolecole (come gli aminoacidi per le proteine, i nucleotidi per gli acidi nucleici, gli zuccheri per i polisaccaridi e gli acidi grassi incorporati nei lipidi), i metaboliti (le sostanze usate dalle cellule e sintetizzate in molecole con funzioni diverse), e le unità più piccole, come le vitamine, l'ATP, che si associano a proteine e ormoni, e l'urea.

Le famiglie di molecole biologiche

Carboidrati

Includono gli zuccheri semplici (monosaccaridi) e i loro polimeri. Hanno funzioni energetiche e strutturali. I più interessanti dal punto di vista biologico sono quelli dai 3 ai 7 atomi di carbonio, in particolare i pentosi e gli esosi che formano molecole circolari (planari). Ogni molecola di zucchero semplice ha uno scheletro lineare i cui atomi di carbonio sono legati a gruppi ossidrilici, e ad un gruppo carbonilico (C=O) che forma un chetosio (se all’interno della molecola, come il fruttosio), o un aldosio (se all’esterno, come il glucosio). Negli anelli planari i gruppi H e OH si proiettano sopra o sotto l’anello. Gli zuccheri più grandi si costruiscono tramite legami glicosidici (-C-O-C-) tra il C1 di uno zucchero e il gruppo ossidrilico di un altro. Quando sono composti da due soli zuccheri si dicono disaccaridi (a funzione energetica, come il lattosio), quando sono composti da due a otto zuccheri si dicono oligosaccaridi, che se legati covalentemente a lipidi o proteine si dicono rispettivamente glicolipidi o glicoproteine (hanno funzione di riconoscimento nelle membrane plasmatiche). Invece, polimeri di zuccheri semplici si dicono polisaccaridi. Esempi sono il glicogeno (formato da monomeri di glucosio, ha funzioni di riserva d’energia nelle cellule, come nei muscoli), l’amido (anch’esso con riserva d’energia, ma nelle piante, è formato dalla miscela di amilosio e amilopectina), e la cellulosa (sempre costituita da glucosio, a funzione però strutturale tipica delle pareti delle cellule vegetali). La chitina è un polimero di N-acetilglucosamina, ha funzione strutturale e si trova spesso nell’esoscheletro degli invertebrati. Infine, i glicosamminoglicani (GAG) sono formati da polimeri di due zuccheri alternati (come l’eparina).

Lipidi

Sono molecole non polari insolubili in acqua, tra cui i più importanti sono:

• Grassi: Sono composti da una molecola di glicerolo esterificata da tre acidi grassi (triacilglicerolo). Gli acidi grassi sono catene idrofobe di idrocarburi con un gruppo carbossilico ad un’estremità idrofila, proprietà che li rendono sostanze anfipatiche. Sono in grado di formare micelle, in cui le code si uniscono al centro. Gli acidi grassi in cui sono presenti legami doppi sono detti insaturi, quelli in cui mancano sono detti saturi, e la maggior presenza di legami doppi abbassa il punto di fusione, come gli oli, che sono liquidi a temperatura ambiente. I grassi sono molto energici. Sono praticamente insolubili in acqua e si trovano dispersi nelle cellule in goccioline lipidiche.
• Steroidi: Hanno uno scheletro a quattro anelli e spesso hanno funzioni di mantenimento del calore o sono precursori di ormoni steroidei, come il colesterolo (forma il testosterone, il progesterone ed estrogeni).
• Fosfolipidi: Sono diacilgliceroli, poiché sono legati solo a due acidi grassi, mentre il terzo gruppo ossidrilico è legato ad un fosfato che è legato ad un piccolo gruppo polare, la colina. L’estremità con il fosfato è idrofila, mentre quella con le catene è idrofobica, perciò sono i lipidi fondamentali delle membrane cellulari.

Proteine

Sono macromolecole le cui funzioni sono numerosissime. Possono essere enzimi, ormoni, recettori di membrana, elementi contrattili, anticorpi, tossine, trasportatori, possono formare strutture. Tutto questo grazie all’illimitato numero di forme che possono avere. Sono polimeri degli amminoacidi, piccole sostanze con un gruppo carbossilico ed un gruppo amminico, separati dal carbonio α, al quale è legato un gruppo R laterale. Gli aminoacidi sono uniti tra loro con legami peptidici (tra il gruppo amminico di un aminoacido con il gruppo carbossilico del successivo, al liberare una molecola di acqua), formando una catena polipeptidica. I gruppi R sono responsabili delle proprietà chimiche dei residui e possono essere polari con carica (in grado, cioè, di formare legami ionici agendo come acidi o basi, e sono l’acido aspartico, l’acido glutammico, la lisina, l’arginina e l’istidina; polari senza carica (sono idrofili, basi o acidi deboli e tendono a formare legami idrogeno, sono la serina, la treonina, la glutammina, l’asparagina e la tirosina), non polari (sono idrofobici, s’inseriscono all’interno della proteina associandosi grazie alle forze di Van der Waals, sono la alanina, la valina, la leucina, l’isoleucina, la metionina, la fenilalanina e il triptofano), con cariche particolari (la glicina è formata solo da un H ed è anfipatica, la prolina ha carattere idrofobico, la cisteina può formare ponti disolfuro -S-S- con altre cisteine grazie al suo gruppo solfidrico -SH). Gli aminoacidi si legano formando strutture diverse, che sono l’esempio di come la funzione dipenda dalla forma. La struttura primaria è la semplice sequenza peptidica. La struttura secondaria è la conformazione più stabile delle catene peptidiche, grazie alla formazione di legami idrogeno tra aminoacidi vicini ma non in sequenza. La conformazione α-elica è una struttura ad avvolgimento ad elica stabilizzata dai legami idrogeno tra gli O e gli atomi N del quarto residuo in direzione C-terminale, e spesso i residui polari sono esterni all’elica ad interagire con il solvente. L’altra conformazione è il foglietto β, in cui lo scheletro ha una conformazione ripiegata simile, appunto, a foglietti, in cui i legami idrogeno si formano lateralmente. La struttura terziaria è la struttura tridimensionale delle proteine, responsabile delle funzioni della proteina stessa, stabilizzata da legami non covalenti tra le catene laterali degli aminoacidi, e a volte da ponti disolfuro. In genere, si possono distinguere strutture fibrose (a forma allungata) o globulari (più compatte). In queste strutture si possono trovare zone funzionalmente distinte, dette domini, che possono avere funzioni differenti. La struttura quaternaria, infine, è il legame di più subunità distinte, che possono formare omodimeri, nel caso in cui le subunità siano identiche, ed eterodimeri, nel caso in cui siano composte da differenti subunità. L’assemblaggio proteico avviene con il minor dispendio di energia, seguendo una serie di eventi non ancora ben compresi. Talvolta, proteine ausiliari come i chaperoni molecolari aiutano altre proteine non ripiegate, o ripiegate male, a raggiungere la loro conformazione. Particolare interesse va rivolto verso gli enzimi, proteine in grado di catalizzare diverse reazioni chimiche all’interno delle cellule. Spesso sono proteine coniugate, cioè proteine legate a cofattori (organici o inorganici). Gli enzimi sono necessari solo in piccole quantità, non si alterano irreversibilmente allo svolgere le loro funzioni, non hanno effetto termodinamico sulla reazione, aumentano solamente la velocità di una reazione, abbassando l’energia di attivazione richiesta per la reazione stessa. Essi legano le sostanze implicate nella reazione da siti attivi, che sono localizzati in tasche o cavità che, per la loro forma e localizzazione precisa, rendono gli enzimi altamente specifici per tipo di reazione e per molecole che esso può legare. Spesso, viene fornita energia alle reazioni grazie alla presenza di ATP che viene idrolizzato in ADP, soprattutto nei processi endoergonici, cioè che richiedono energia. Infatti, l’idrolisi dell’ATP rilascia energia (è una reazione esoergonica), cosicché spesso le reazioni endoergoniche sono accoppiate all’idrolisi dell’ATP.

Acidi nucleici

Sono filamenti di nucleotidi, le cui funzioni principali sono l’archiviazione e la trasmissione genetica, ma talvolta possono avere ruoli strutturali e catalitici. Gli acidi nucleici sono il DNA (acido desossiribonucleico) e l’RNA (acido ribonucleico). I nucleotidi di un RNA sono costituiti da un pentoso (ribosio), una base azotata e da un gruppo fosfato. Lo zucchero e la base azotata formano un nucleoside. All’interno del nucleotide, il fosfato si lega al carbonio 5’ e la base azotata al carbonio 3’ dello zucchero. Nel filamento il gruppo ossidrilico del carbonio 3’ dello zucchero di un nucleotide esterifica con il fosfato del gruppo 5’ di un altro nucleotide. Le basi azotate sono distinte in pirimidine (costituite da un solo anello, sono la citosina, la timina e l’uracile) e in purine (costituite da due anelli, sono l’adenina e la guanina). La citosina è complementare con la guanina, mentre l’adenina è complementare con la timina nel DNA e con l’uracile nel RNA. L’RNA è a filamento singolo che può avvolgersi a formare strutture diverse. Tra queste ci sono gli rRNA, che servono da impalcatura per la sintesi proteica, e i ribozimi, enzimi ad RNA che tagliano i filamenti dell’RNA. Altri acidi nucleici sono l’ATP (adenosin trifosfato) e il GTP (guanosin trifosfato), entrambe molecole che attivano altre molecole fornendo l’energia chimica necessaria.

Compartimentazione cellulare e organuli citoplasmatici

I confini cellulari di una cellula eucariotica sono definiti dalla membrana plasmatica, che è costituente anche dei vari compartimenti subcellulari, chiamati organuli. Ogni organulo ha contenuti e funzioni distinte rispetto agli altri. La membrana plasmatica, come ogni membrana cellulare, può introflettersi attivamente, creando invaginazioni che potrebbero staccarsi creando delle vescicole. In ogni organulo si possono confinare molecole specifiche e avere microambienti diversi dove possono accadere reazioni non compatibili con l’ambiente esterno all’organulo e, talvolta, addirittura dannose per la cellula. Inoltre, l’avere microambienti diversi crea la possibilità di ottenere certi risultati in minor tempo, grazie ad una precisa coordinazione tra le parti in causa. Ogni organulo si trova immerso in una componente solubile chiamata citoplasma. Il citoplasma, detto anche citosol, è una matrice acquosa che occupa circa la metà dello spazio cellulare nel quale si trovano disperse le sostanze fondamentali al sostenimento della vita cellulare, tra cui sali, ioni, zuccheri, una grande quantità di enzimi e proteine e la maggior parte dell’RNA. L’acqua è componente principale del citoplasma ed occupa circa l’80% dello spazio. Si trova sia nelle cellule eucariotiche che in quelle procariotiche.

Tecniche di frazionamento cellulare

Esistono vari metodi per lo studio degli organi cellulari, che prevedono però l’utilizzo di tecniche di purificazione tra cui l’omogeneizzazione e la centrifugazione differenziale.

Omogeneizzazione

Solitamente il tessuto da omogeneizzare viene tagliato in frammenti di piccole dimensioni a bassa temperatura, e poi viene omogeneizzato. I due principali tipi di omogeneizzatori sono a lama e a pistone. Gli omogeneizzatori a lama rotante funzionano come un semplice frullatore, e tendono a rompere completamente l’ordine tissutale e cellulare. Quelli a pistoni tendono, invece, a salvare meglio gli organuli grazie alle dimensioni accuratamente calibrate della provetta e del pistone che, girando su se stesso, rompe le membrane plasmatiche e gli organuli più grandi che sono, però, in grado di risaldarsi. Il tessuto è immerso in soluzioni tampone isotoniche a pH fisiologico e con concentrazione chimica in base al tipo di analisi da eseguire.

Centrifugazione differenziale

L’omogenato è sottoposto a centrifugazione a velocità diverse che, in funzione del peso dell’organulo, crea diverse frazioni arricchite. È da precisare che le frazioni ottenute tramite una ultracentrifuga non sono pure, ma contengono maggiori proporzioni dell’organulo da analizzare.

Reticolo endoplasmatico

Uno degli organuli più importanti delle cellule eucarioti è il cosiddetto reticolo endoplasmatico, un insieme di cisterne, sacchetti appiattiti e tubuli membranosi che delimitano cavità ampiamente intercomunicanti. È parte integrante dell’involucro nucleare. Svolge numerose operazioni necessarie alla vita della cellula. Si distinguono morfologicamente due tipi di reticolo endoplasmatico: reticolo endoplasmatico liscio e reticolo endoplasmatico rugoso.

Reticolo endoplasmatico rugoso

Si dice rugoso per via dell’aspetto rugoso della faccia citoplasmatica delle sue membrane, cui si trovano numerosi ribosomi. Le sue funzioni principali sono di isolare ed elaborare proteine sintetizzate dai ribosomi, che vengono poi impacchettate tramite vescicole e spedite dove servono o dove possono maturare. È responsabile della sintesi di proteine di membrana. Nel reticolo endoplasmatico rugoso avviene la sintesi proteica.

Reticolo endoplasmatico liscio

Manca di ribosomi ed è in continuità con il reticolo endoplasmatico rugoso. Svolge numerose funzioni di fondamentale importanza:

• Biogenesi delle membrane: Avviene tramite enzimi che inseriscono fosfolipidi, nella cui sintesi sono coinvolti, nel foglietto citoplasmatico della membrana, determinando un accrescimento asimmetrico della stessa risolto, poi, da altri enzimi che rimescolano le componenti lipidiche per riportare le dimensioni corrette. Questi enzimi sono le scramblasi e le filippasi.
• Biosintesi di colesterolo e ormoni steroidei: Determina una maggiore presenza di reticolo endoplasmatico liscio nelle cellule a specializzazione produttiva.
• Immagazzinamento del calcio: È uno ione importantissimo per le sue funzioni di segnalazione. Il reticolo endoplasmatico liscio mantiene bassa la concentrazione di calcio nel citoplasma tramite pompe ATPasiche che lo trasferiscono all’interno della membrana e canali specifici si aprono per rilasciarlo in risposta di impulsi esterni.
• Detossificazione: Catalizza, cioè, reazioni di idrossilazione tramite enzimi presenti nel reticolo, che rendendo molecole potenzialmente tossiche solubili in acqua e, quindi, facilmente eliminabili dall’organismo.

Apparato di Golgi

Scoperto dal medico e istologo Camillo Golgi, è un apparato costituito da un insieme di cisterne.