Biochimica clinica - Appunti (Biotecnologie mediche)

Effetti dell'ipertensione portale

1) Shunt porto-sistemico e relativa encefalopatia epatica: sviluppo di circoli collaterali: il sangue non detossificato giunge agli organi vitali (ammoniaca)

2) Varici: I nuovi vasi collaterali hanno un'elevata tendenza alla dilatazione e contorsione, se la pressione portale rimane molto elevata per molto tempo possono insorgere episodi emorragici (esofago)

3) Ascite: forte pressione idrostatica porta ad aumento velocità di filtrazione con accumulo conseguente di liquido plasmatico in cavità peritoneale (alcune complicanze possono portare a morte) (ipoalbuminemia cofattore)

Stadi della cirrosi:

1) Agli stadi iniziali la patologia non si manifesta con segni clinici evidenti (cirrosi compensata).

2) Cirrosi scompensata sintomi tipici del problema fegato oramai evoluto (ipertensione portale): Asciti, Ginecomastia, Pruriti, Ittero, Perdita di massa muscolare, Nausea, Inappetenza, Sanguinamenti (fattori di coagulazione) ed Encefalopatia (metaboliti tossici)

1. Test di I livello di funzionalità
• Valutazione della capacità di sintesi e di metabolismo (in seguito ad una compromissione estesa e prolungata)

Es.: Proteine totali, albumina, profilo elettroforetico, pseudocolinesterasi, fattori della coagulazione (fattore VII, PT, fibrinogeno)...

• Test di escrezione: bilirubina totale, diretta, indiretta, ammonioemia...
• Test di citolisi: enzimi plasmatici (AST, ALT, fosfatasi alcalina...)

Questo gruppo di test consente di distinguere correttamente circa l'80% dei casi di epatopatia

2. Test di II livello di funzionalità specifica
3. Test diagnostici di patologia epatica

ITTERO= Manifestazione clinica per eccellenza di malattia epatica

A cosa è dovuto?

Accumulo di bilirubina nel sangue quando la concentrazione è superiore a 2 mg/dL si ha la tipica colorazione giallastra di cute e sclera.

La Bilirubina deriva dalla degradazione del gruppo Eme dei globuli rossi.

Quando

L'intervallo entro il quale i valori sono considerati nella norma:

• Bilirubina diretta: 0.1 - 0.3 mg/dL.
• Bilirubina totale: 0.1 - 1.0 mg/dL.

TIPOLOGIE DI ITTERO: → ITTERO EMOLITICO marker diagnostici: bilirubina indiretta che raramente >6mg/dL, si hanno aumenti di AST( ) e latticodeidrogenasi Transamilasi, vedi sez proteine(NBDH), aptoglobina↓, urobilina↑, nel sangue Reticolociti> e Emoglobina>.

ITTERI PER CAUSE GENETICHE

• CRIGLER-NAJJAR SYNDROME I e II (difetti nella gluconazione: iperbilirubinemia indiretta)
• SINDROME DI GILBERT (difetto guconazione e captazione epatica: iperbilirubinemia indiretta)
• SINDROME DI DUBIN-JOHNSON (alterata escrezione di biluribina: iperbilirubinemia diretta)

ENZIMI EPATICI: La conferma di una presunta epatopatia non può prescindere dal dosaggio delle transaminasi (AST & ALT), che permettono di porre la diagnosi differenziale con alterazioni primitive delle vie biliari. AST (SGOT)→substrato

che ALT sono valori di riferimento per dannoepato cellulare 7x URL (upper reference limit=range di limite)= diagnosi certadimalattia epatica

ALT elevate per più di sei mesi: epatiti croniche

• ALT più utile di AST nei test di funzionalità/danno epatico
• AST particolarmente sensibile ad esposizione ad alcol (aumenta nelle 24h)

INDICE DE RITIS: AST/ALT

AST/ALT >1 maggior parte delle epatitialcoliche (diminuisce sintesi ALT; bassaB6; aumento rilascio di ASTm), cirrosiepatiche e neoplasie

AST/ALT: indice di grado di fibrosi inepatite cronica (utile per prognosi)

dove URL sta per Upper Reference Limit, cioè un valore maggiore del range diriferimento.

Fosfatasi alcalina (ALP) → bile

Presente in abbondanza fegato e ossa, ma ancheintestino, rene, placenta (profili isoenzimaticimolto diversi)

• Localizzato in membrane plasmatiche
• In siero 50% ALP ossea:50% +ALP epatica

RICORDA ALP e ɣGT sono a livello dellamembrana, mentre AST, ALT (=transamilasi)sono a livello intracellulare.

livello citosolico e mitocondriale.

ALP aumenta:

• in ogni forma di ostruzione delle vie biliari. L'aumento è dovuto all'aumentata sintesi da parte degli epatociti indotta dall'aumento della concentrazione locale degli acidi biliari e bilirubina.
• ALP ossea (BAP), presente in osteoblasti, scinde il pirofosfato (inibitore mineralizzazione).
• Tumori isoenzimi carcinoplacentari (Regan e Nagao).

Aumenta in due condizioni fisiologiche:

• bambini (per l'accrescimento osseo).
• gravidanza (isoenzima circolante di origine placentare).

ɣGlutamil transpeptidasi (ɣGT o GGT)

Uomini (URL): 70 U/L; Donne (URL): 40 U/L

presente ad alte concentrazioni in rene, fegato e pancreas; la GGT del plasma è di orgine epatica.

Non è un buon marker per le epatopatie perché mediante la sua valutazione difficilmente si possono discriminare le epatiti da danno cellulare da quelle colestatiche, però la GGT può aumentare nelle ostruzioni biliari molto prima.

nelleepatiti acute e croniche.

Significato clinico:

• Epatopatie
• Deficit vit K→ cascata coagulativa
• Carenza/Alterazione congenita di fattiri I, II, V, X

Altri fattori:

• Tromboplastina=fattore tissutale ottenuto da organi come cervello, placenta e polmone nelmomento in cui vi é un danno.
• Usata in laboratorio per simulare danno endoteliare (ferita) e per innescare la via estrinseca ecomune La tromboplastina catalizza la formazione di trombina da protrombina e converte ilfibrinogeno in fibrina. Protrombina ed i fattori V,IX e X necessitano della vit K per l’attivazione.
• Attenzione alla vit K che va assorbita tramite acidibiliari perche liposolubile, se bile non arrivaall’intestino (ittero ostruttivo) non si assorbe la vit.

Patologia Test Risultato

Epatica

• Colestasi = Bilirubina ↑riduzione o ALP (fosfatasi alcalina) ↑arresto del GGT (ɣGT) ↑flussobiliare Colesterolo ↑
• Danno ALT ↑epatocellulare AST ↑
• Albumina ↓
• Colesterolo ↓
• PT (tempo

protrombina) ↑CHE=pseudocolinesterasi (o colinesterasi 2) argomento successivotempo di Quick=tempo di protrombina

ENZIMOLOGIA CLINICA

in laboratorio si valuta la velocitá di reazione enzimatica.

La concentrazione si misura in unitá standard (U/L). Enzimi dosabili nel sangue:

• PLASMASPECIFICI: enzimiche esercitano la loro azionebiologica nel plasma. (Es: fattori di coaugulazione)
• TISSUTALI: enzimi chevanno nel sangue circolante oper normale turnover cellulare(DIFFUSIONE) oppure inseguito a fenomeni di lisi ocomunque alteratapermeabilità della membrana(es. ALT)
• DI SECREZIONE: enzimi prodotti da cellule competenti per essere secrete in liquido biologico(es. enzimi gastrici, fosfatasi prostatica, LIPASI ecc.…)

Marker di danno cellulare:

1. Danno membrana (riduzione produzione ATP, necrosi) comporta fuoriuscita di materiale cellularetra cui:
• Enzimi citosolici: marcatori precoci
• Enzimi mitocondriali: marcatori intermedi
• Enzimi della membrana

marcatori tardivi

Velocità di fuoriuscita enzimi è inversamente proporzionale alle dimensioni della proteina

2) Alterata sintesi:

• Per fattori endogeni/esogeni: ALP (aumento attività osteoblasti o induzione da bilirubina e salibiliari)

3) Alterata clearance (→ pulizia di elementi potenzialmente tossici)

• clearance mediante SRE (soprattutto fegato): cirrosi: diminuzione velocità eliminazione
• clearance mediante rene (amilasi)

Enzimi muscolari:

• Creatinasi (CK)→ Promuove il trasporto dell’ATP (“int