Schemi Laboratorio di Biologia di ogni argomento

INTRODUZIONE BECHER : bicchieri dotati di beccuccio nella

parte superiore per facilitare il travaso dei liquidi.

✓ varia capacità (25-100-250-400-600-1000 ml

ed oltre)

✓ NON sono adatti per misurazioni del volume →

errore elevato

Si utilizzano per riscaldare liquidi, travasare

liquidi, sciogliere un soluto in un solvente

CILINDRO GRADUATO : sono cilindri dotati di

una base d’appoggio e con un beccuccio che

consente di versare i liquidi con facilità. Lungo

il cilindro è posta una scala graduata, che ci

permette di misurare tutti i volumi intermedi

rispetto alla sua capacità totale.

vietato fumare, consumare cibi e Con i cilindri si effettuano misure CON UNA

bevande. CERTA APPROSSIMAZIONE,

•Non ingombrare con borse, pacchi o altri

oggetti le zone intorno al bancone o le Il MATRACCIO è un pallone a fondo piatto con collo lungo sul quale

uscite di sicurezza viene indicato il livello del liquido da raggiungere perché il

volume corrisponda esattamente alla capacità indicata.

•Non si deve correre in laboratorio E’ un contenitore tarato con molta precisione e costituisce un vero

e proprio strumento di misura: viene infatti usato per la

•Non ci si arrampica preparazione di soluzioni a concentrazione nota (soluzioni titolate)

e per diluire campioni ad un volume esatto. Possono essere chiusi

Mantenere in ordine e pulito il con appositi tappi in vetro o in PTFE. Il matraccio non è costruito in

laboratorio. Rimuovere vetreria e vetro da fuoco, non può quindi essere usato per il riscaldamento di

attrezzature da bancone quando soluzioni o liquidi di qualsiasi genere.

non servono più. BEUTA (matracci conici): nella parte superiore terminano

con un collo cilindrico che può essere smerigliato in modo da

• Non abbandonare la propria poter apporre un tappo.

postazione di lavoro durante lo ✓ varia capacità (25-50-100-500...ml)

svolgimento dell’esperienza. Contenitori per liquidi, quando si vogliono ridurre le perdite di

liquido per evaporazione

• Durante i mesi estivi evitare l'uso di

sandali o scarpe troppo aperte Provette: sono tubi di vetro o plastica di

NORME DI COMPORTAMENTO E DISPOSITIVI PER LA DISPOSITIVI DI PROTEZIONE STRUMENTAZIONE E MATERIALI varia misura, con o senza scala graduata

• Non toccare i reagenti con le mani: DI SICUREZZA PROTEZIONE INDIVIDUALE COLLETTIVA DI USO COMUNE IN UN

preleva i reagenti solidi con spatole,non Provette tipo eppendorf

appoggiare la bocca sul bordo delle LABORATORIO Provette tipo falcon

pipette di vetro. Contenitori per piccoli volumi di campione

• Indossare sempre guanti di protezione Esposizione a materiale biologico: cappa da laboratorio su cui effettuare le analisi

• Non usare il cellulare con i guanti. (opportuni per l’attività che si sta In caso di puntura o taglio

svolgendo) • Aumentare il sanguinamento Fiasche: nella parte superiore terminano

• Utilizzare sempre un quaderno non fogli • Indossare sempre il camice • Detergere con acqua e sapone con un

cappa a flusso laminare cappa chimica

volanti e appuntare tutto • Indossare gli occhiali di protezione • Disinfettare la ferita utilizzando i prodotti collo cilindrico ed un tappo a vite.

• I capelli lunghi devono essere sempre contenuti nella cassetta del pronto Contenitori per

• Scrivere le proprie osservazioni raccolti; anche gioielli penzolanti soccorso crescita cellule in fase liquida.

ordinatamente, in modo che si possa La cappa a flusso laminare è una cappa La cappa d'aspirazione in ambito chimico

(orecchini, bracciali etc…) possono In caso di contatto cutaneo

sempre ricostruire, anche a distanza di utilizzata in ambito biologico per la ha la funzione di proteggere

rappresentare un fattore di rischio • Lavare la zona con acqua e sapone Piastre petri: Vetro o plastica, costituite da

tempo, la sequenza di ciò che si è fatto in protezione dell'operatore e dell'ambiente l'operatore da eventuali vapori sprigionati

• La vetreria va lavata con acqua corrente e In caso di schizzi negli occhi un

ogni momento circostante da parte di agenti biologici da reazioni chimiche (come ad esempio

sapone (poco) per vetreria; solo alla fine va • Sciacquare gli occhi con acqua piattino e coperchio; ideali per la

(generalmente microrganismi patogeni); i vapori di cloro, mercurio, solventi organici

risciacquata con acqua deionizzata; utilizzando i lava occhi microbiologia

• Eseguire le esperienze solo dopo aver inoltre, la cappa a flusso laminare elimina acidi o alcali concentrati). Alcune

• Usare con attenzione la vetreria! Piastre multipozzetto: plastica, costituite

scritto, capito e discusso criticamente ciò la possibilità di contaminazione del sostanze producono infatti vapori tossici

• Non lasciare recipienti, bottiglie o da un

che si vuole fare. campione biologico, consentendo un che non devono essere inalati dagli

apparecchi in bilico o vicino al bordo supporto e coperchio; diverse applicazioni

lavoro in condizioni di sterilità. operatori: per ovviare a ciò, si adottano

del banco di lavoro. in

• Non annusare ne assaggiare le sostanze. cappe che aspirano tali vapori e che li funzione del numero di pozzetti, da 6 a 96.

eliminano dall'ambiente in cui si lavora

NO TABLET O PC Pipetta tarata: sono tubi sottili di

vetro, tarati per volumi di 0.5. 1, 2, 5,

NO CELLULARE 10, 25 ml.

Pipetta pasteur: essa è formata da un

PIPETTE tubicino vitreo abbastanza sottile con

un’estremità larga e una parte inferiore

che è quasi un capillare; poco precisa

perché priva di una scala graduata

Dispositivi per prelevare i liquidi con le pipette (pro-pipette):

Porcellino

Pompetta a stantuffo

Tettarella (per pipette pasteur)

Pipettatore automatico

Spatoline: servono per prelevare delle polveri dai contenitori 10-50 mg

Navicelle da pesata: servono per pesare delle polveri

Ancorette magnetiche: Servono per miscelare soluzioni

Vetrino portaoggetto e coprioggetto: Servono per allestire preparati istologici

Portaprovette e porta eppendorf: Servono per mantenere in posizione

verticale provette ed eppendorf micropipette volumetriche

Uno stantuffo, la cui corsa è regolata da una vite, permette di spostare una

determinata quantità di aria che per pressione positiva o negativa, farà scendere o salire

il liquido nel puntale.

Omeostasi: insieme di processi

con i quali l’organismo mantiene

il proprio ambiente interno

stabile a fronte di perturbazioni

esterne o interne SOLUZIONI DELL'ORAGNISMO

ABBASSAMENTO DELLA PRESSIONE DI VAPORE

Alla fine dell’800 fu sperimentalmente osservato che la tensione di

vapore del solvente veniva abbassata dall’aggiunta di un soluto

non volatile.

Ogni liquido è in equilibrio con il suo vapore (o gas reale) che si I fattori che determinano la dissoluzione di un solido ionico in un

produce costantemente alla superficie del liquido stesso, per solvente polare sono due: - l’energia reticolare del solido (somma

evaporazione, e che costantemente ricondensa sul liquido stesso. delle energie di attrazione fra anioni e cationi): più è grande e minore

Si definisce pressione di vapore saturo (tensione di vapore) la è la tendenza del solido a sciogliersi. - l’energia di attrazione ione-

pressione del vapore in equilibrio con il liquido ad ogni dipolo fra gli ioni e i dipoli elettrici costituiti dalle molecole di

determinata temperatura (infatti la pressione di vapore saturo solvente opportunamente orientati: più è grande maggiore è la

aumenta con l'aumentare della temperatura). tendenza del solido a sciogliersi

INNALZAMENTO EBULLOSCOPICO E ABBASSAMENTO Lo ione in soluzione è circondato da una sfera di molecole di

PROPRIETA' COLLIGATIVE:Le proprietà pH SOLUZIONI TAMPONE SOLUZIONI IONICHE

CRIOSCOPICO solvente ordinate rispetto alla polarità (sfera di solvatazione; se il

colligative non dipendono solamente dalla

Abbiamo visto che l’aggiunta di un soluto non volatile abbassa la solvente è l'acqua, sfera di idratazione); queste ordinano a loro volta

concentrazione del soluto disciolto nella

tensione di vapore della soluzione. L’abbassamento della pressione una seconda sfera di solvatazione più debolmente legata, ed

La concentrazione degli ioni H+ Una soluzione tampone è una soluzione il cui pH Abbiamo perciò il massimo potere

di vapore di una soluzione rispetto al solvente puro ha importanti eventualmente una terza.

soluzione poiché la sua dissoluzione nel in soluzione acquosa è particolarmente non è apprezzabilmente modificato dall’aggiunta tampone di una soluzione quando un

conseguenze sulle temperature di ebollizione e Tale fenomeno è detto idratazione e l’energia elettrostatica di

solvente libera un numero di particelle diverse importante in chimica e biologia perché di modiche quantità di acidi o basi forti. valore di pH è pari al pKa dell’acido debole.

congelamento della soluzione. Punto di ebollizione è la temperatura interazione di uno ione con le molecole di acqua è detta

influenza la funzionalità di enzimi e proteine. Una soluzione tampone è formata da un acido

attraverso fenomeni di associazione e

alla quale la pressione di vapore uguaglia la pressione atmosferica. energia di idratazione.

Soluzione neutra: soluzione in cui la debole e la propria base coniugata o da una base

Alla pressione atmosferica di 1 atm: il punto di ebollizione di una La solubilità di un solido ionico in acqua dipende da un bilancio fra

dissociazione. concentrazione idrogenionica rimane la stessa debole e il proprio acido coniugato. Una soluzione tampone può svolgere la

soluzione è > di quella del solvente puro energia reticolare (del solido) ed energia di idratazione (dell’acqua).

dell’acqua pura [H+] = [OH-] = 10-7 M a 25°C sua funzione tampone anche se l’acido Maggiore è l’energia reticolare di un composto ionico, minore è la

Soluzione acida: soluzione in cui la debole è presente in concentrazioni sua solubilità e viceversa.

OSMOSI Coinvolge le membrane semipermeabili. Per effetto concentrazione idrogenionica è superiore a10-7 maggiori rispetto al suo sale o viceversa

tamponi fisiologici

dell’osmosi si crea un flusso di molecole dal solvente puro alla Soluzione basica: soluzione in cui la purchè i rapporti delle due specie

soluzione (o dalla soluzione a minore concentrazione a quella a concentrazione idrogenionica è inferiore a10-7 rimangano all’interno di un intervallo

maggiore concentrazione). Pressione osmotica: pressione che Per rendere più facilmente utilizzabile la misura compreso

Tampone fosfato Tampone bicarbonato

occorre esercitare sulla soluzione A, per bloccare l’osmosi (pressione dell’acidità è stato introdotto il pH (logaritmo tra 10:1 e 1:10

Ioni diidrogeno fosfato/ Acido carbonico/ione idrogeno carbonato

idrostatica necessaria ad impedire lo spostamento di un solvente decimale negativo della concentrazione degli monoidrogeno fosfato. Fosfato

puro in una sua soluzione attraverso una membrana ioni H+ ). monobasico/fosfato dibasico

semipermeabile) pH = -log [H+]

π= M*R*T (per non elettrolita)

π= M*i*R*T (per elettroliti) pHmetro

Il pHmetro misura il voltaggio tra due Esso è costituito da un piccolo tubo di Taratura: - La taratura richiede l’utilizzo di

elettrodi immersi in una soluzione (uno di vetro molto sottile (membrana di vetro) due soluzioni a pH diverso

misura e uno di riferimento) terminante con un bulbo. All'interno del - Di norma si effettua prima la taratura con

tubo è posta una soluzione tampone un tampone a pH 7 e

(cioè a pH noto) nella quale è posto un filo poi con uno a pH 4 oppure a pH 9 - Dopo

di platino necessario per il la taratura, l’elettrodo a pH è

collegamento elettrico. Tra le due superfici semplicemente

della sottile membrana di vetro si immerso nella soluzione in esame e fornirà

crea una differenza di potenziale che è una misura rapida ed accurata del pH

funzione della differenza di pH ATTENZIONE ALLA TEMPERATURA!

esistente fra la soluzione interna (a pH Spesso le sonde immerse nella soluzione

noto) e quella esterna (a pH incognito) sono due: oltre all'elettrodo viene immersa

(vedi figura lucido seguente) anche una sonda di temperatura, il cui

I due elettrodi sono collegati al pHmetro, compito è correggere la lettura

nel quale un'apposita amplificazione dell'elettrodo in funzione dell'effettiva

della differenza di potenziale viene temperatura del campione

evidenziata tramite segnale analogico e

misurata in mV CENTRIFUGHE: PREPARATIVE E

ANALITICHE

Rotore a flusso continuo (adatti a centrifugare

grandi volumi in quanto consentono

l’immissione della sospensione e il deflusso del

sopranatante in modo continuo

Rotori ad angolo fisso:Sono dotati di

alloggiamenti per le provette disposti attorno

all’asse di rotazione centrale con un angolo fisso CENTRIFUGAZIONE

che varia in genere tra 20° e 40°. DIFFERENZIALE

Questi rotori sono i più adatti per la separazione Separa i componenti in base

frazionata dei componenti cellulari, perché, alla loro dimensione e densità

essendo la forza centrifuga applicata

obli