Lezioni, Citologia

CITOLOGIA

è la scienza che studia la cellula ➔ UNITÀ MORFOLOGICA e FISIOLOGICA

fondamentale degli organismi e ne possiede tutte le PROPRIETÀ

Due tipi:

• PROCARIOTTICA:
• membrana cellulare + parete cellulare (a volte)
• RNA a molecola circolare e libera ➔ NO NUCLEO
• solo RIBOSOMI
• EUCARIOTTICA:
• membrana plasmatica
• nucleo
• organelli

Composizione:

• acqua 85 %
• proteine 10 %
• lipidi 2-3 %
• carboidrati
• sol. inorganici
• acidi nucleici

DNA 0,4 %

RNA 0,7 %

Dimensioni:

• 20-30 μm e forma variabile

Il VOLUME delle cellule è costante per specie veget. e anim. ➔ LEGGE di DRIESCH

La diversa dimensione degli organismi è dovuta al numero ➔ LEGGE di LEY

Rapporto tra dimensioni citoplasma e nucleo è costante ➔ INDICE NUCLEOPLASMATICO

METODI di STUDIO:

studio sempre in INTERFASE

Si può studiare dal punto di vista:

• BIOCHIMICO = individua componenti ma non la localizzazione, con centrifugazione
• MORFOLOGICO = osservazione, prelievo t.

Strumenti:

• MICROSCOPIO OTTICO (MO) ➔ potere di risoluzione 0,25 μm
• sez. da 5-10 μm ➔ MICROTONO
• ELETTRONICO a:
• TRASMISSIONE (TEM): potere di risoluz. 0,1 nm
• sez. 20-40 nm ➔ ULTRAMICROTONO
• SCANSIONE (SEM): potere di risoluz 10 nm
• imm. 3D sezione preparato con metalli pesanti, vongozzati X elettroni

È ampliata anche microscopia a contrasto di fase e ad interferenza ➔ aumento

Il contrasto grazie a differenze nell'INDICE di RIFRAZIONE

CITOLOGIA

È la scienza che studia la cellula, unità morfologica e fisiologica fondamentale degli organismi e ne passegge tutte le proprietà.

Due tipi:

• PROCAR1OTT1CA:
  • no membrana cellulare e parete cellulare (a volte)
  • DNA a molecola circolare e libera - NO NUCLEO
  • solo RIBOSOMI
• EUCARIOTICA:
  • membrana plasmatica
  • nucleo
  • organelli

Composizione:

• acqua 85 %
• proteine 10 %
• lipidi 2-3 %
• carboidrati 1 %
• sali inorganici 1 %
• acidi nucleici
  • DNA 0,2 %
  • RNA 0,7 %

Dimensioni: 20-30 μm e forma variabile

• min granulocito 4-5 0,4 μm
• max cellula uovo 150 μm

Il VOLUME della cellula è costante per specie uguali. Affini: LEGGE DI DRIESCH

La diversa dimensione degli organismi è dovuta al numero: LEGGE 1. LEVY

Rapporto tra dimensioni citoplasma e nucleo è costante: INDICE NUCLEOPLASMAT1CO

METODI di STUDIO:

si studiano sempre in INTERFASE

Li puoi studiare dal punto di vista:

• BIOCHIMICO = individua componenti ma non la localizzazione, con centrifugazione
• MORFOLOGICO = osservazione preparati

Strumenti:

• MICROSCOPIO OTTICO (MO) = potere di risoluzione 0,25 μm (5-10 μm)
• ELETTRONICO a
  • TRASMISSIONE (TEM): potere di risoluzione 0,4 nm (20-40 nm)
  • SCANSIONE (SEM): potere di risoluzione 10 nm (3-D e 10 nm; sezione di preparato con metalli, permette di vedere la superficie della cellula e l'immagine è sempre aumentata)

(usato anche microscopio a CONTRASTO di FASE, ad INTERFERENZA, e a campo scuro, CONSENTE sezionamento e aumento del CONTRASTO grazie a differenze nell'indice di RIFRAZIONE)

e infine quello → LUCE POLARIZZATA → vi hanno sostanze:

• ISOTROPE → monorifrangenti → DISORDINATE
• ANISOTROPE → birifrangenti → ORDINATE → luce su grani

Realizzazione di preparati:

• biopsia → prelievo tessuto
• fissazione
• inclusione
• sezionamento
• colorazione

La FISSAZIONE può essere

• FISICA → ESSICAMENTO
• CONGELAMENTO → con azoto liquidoe acetone (no inclusione) edmolto veloce
• CHIMICA → FISSATIVI:
• COAGULANTI → rapido;formolo
• NON COAGULANTI → meno prontoquieti

Prima di fare l'INCLUSIONE → sezionare bisogna DISIDRATARE → si immergein una serie graduale di soluzioni di alcool e poi si include con

• PARAFFINA → l’ottica
• RESINA EPOSSIDICA → ultraelettronico → fotosferica chiarodroglobe (in soluzione subolica)

Dopo sezionamento si deve colorare con soluzioni ACQUOSE → èogni volta REIDRATARE

colorare con COLORANTI → ACIDI → sostanze ACIDOFILO acido borico

e per DISIDRATARE conservare a lungo

colorare con COLORANTI → BASICI → sostanze BASOFILO acido acetico

Tecniche particolari:

• METACROMASIA
• REAZIONE PAS → zuccheri in ros