1 Esami ematologici di routine (pt, ptt, tt, emocromo, striscio di sangue, determinazione dei gruppi sanguigni, test di coombs)

Questi errori regolando adeguatamente il flusso delle cellule. Poiché ad ogni variazione di impulso corrisponde una cellula con un determinato volume, si può effettuare il conteggio delle cellule.

PRINCIPIO IMPEDENZIOMETRICO DI OULTER

Per il conteggio dei leucociti viene aggiunto un lisante, cioè un liquido che emolizza i globuli rossi (distruggono la membrana dei soli globuli rossi), e contati in una camera di lettura dedicata. I globuli bianchi generano impulsi compresi tra 35 fl e 450 fl (impulsi compresi tra 35 e 100 fl corrispondono a linfociti; impulsi compresi tra 100 e 190 fl corrispondono a monociti; impulsi compresi tra 190 e 450 fl corrispondono a granulociti). In base al volume l'apparecchio riesce a distinguere i linfociti dai macrofagi e dai polinucleati, ma non riesce a distinguere, nell'ambito dei polinucleati, gli eosinofili dai basofili ecc ecc. In questo caso si utilizza un raggio laser che viene deviato dalla cellula in base alle caratteristiche.

della membrana. Dei dectorposti ad angoli diversi rispetto alla luce incidente rilevano questa luce diffusa (cioè deviata in più direzioni casuali dalla cellula). Se la cellula è liscia viene deviato in un modo, se la cellule è granulosa, come capita con i polinucleati, la deviazione è maggiore. Questo fenomeno si chiama Light Scattering e in base al modo in cui la luce viene deviata si possono distinguere i vari tipi di globuli bianchi (formula leucocitaria).…DETERMINARE LA QUANTITÀ DI EMOGLOBINA…La sua determinazione quantitativa, rapportata al numero di eritrociti, è un parametro molto importante per valutare uno stato anemico. La concentrazione di emoglobina nel sangue viene valutata spettrofotometricamente con il metodo della cianmetaemoglobina. In pratica, il sangue viene prima trattato con una soluzione isotonica e poi con una ipotonica che provoca la lisi degli eritrociti. Si ottiene così una soluzione di emoglobina,

Che viene fatta reagire con il reattivo di Drabkin. Questo è una soluzione di ferrocianuro di potassio e di cianuro di potassio che trasforma l'emoglobina in cianmetaemoglobina, il quale è un pigmento molto stabile utilizzato per l'analisi spettrofotometrica. La cianmetaemoglobina (HiCN) presenta il massimo dell'assorbimento a 546 nm. Una volta ricavata l'assorbanza relativa al campione in esame, per sapere la concentrazione dell'emoglobina contenuta, si può fare riferimento a una curva di taratura che viene costruita mettendo in relazione su un grafico xy l'assorbanza di un calibratore con la concentrazione di emoglobina di quel calibratore. I calibratori sono delle soluzioni delle quali si conosce già la concentrazione dell'analita. Oppure, per ricavare la concentrazione di emoglobina del campione, se la lettura spettrofotometrica viene effettuata a 546 nm, si può utilizzare la seguente formula:

Hb(gr/100ml)=Estinzionex36.77

Dove "Estinzione"= Assorbanza.

I valori normali dell'emoglobina sono: uomo= 14-18 gr/100ml; donna=12-16 gr/100ml

Dalla concentrazione di emoglobina contenuta in 100ml si ottiene il valore MHC, cioè la concentrazione di emoglobina contenuta mediamente in un globulo rosso con la seguente formula: 3MHC= (Hb(gr/100ml)/eritrociti per mm )*10...

DETERMINAZIONE DEL VALORE DI EMATOCRITO...

Come detto precedentemente, l'ematocrito è un indice che rappresenta il volume di sangue (espresso in percentuale) che viene occupato dai globuli rossi. Per determinare il valore dell'ematocrito di un determinato campione si procede seguendo questi step:

1. il sangue viene inserito all'interno di tubi capillari eparinati. Questi hanno entrambe le estremità aperte, ma una delle due viene chiusa con della plastilina dopo che il sangue è stato inserito nel tubo. Il sangue viene versato nel tubo fino a riempirne circa