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Metodi di tipizzazione DEA
Immunoprecipitazione in tubo (lab) ✓
Citometria a flusso (lab) ✓
Agglutinazione ✓
Immunomigrazione cromatografica ✓
TEST DI AGGLUTINAZIONE SU CARTINA (DEA1)
È un test che prevede la presenza di cartine. Si mette una goccia di sangue in EDTA del paziente e si verifica se è presente il fenomeno dell'auto agglutinazione (perché è un fenomeno che va a testare il Gruppo sanguigno in base alla Figura 3 Slides prof presenza o meno dell'agglutinazione). Se il paziente auto agglutina di per sé, il test è invalidato! Se non c'è auto agglutinazione, si procede col test.
Nel pozzetto ci sono gli Ac contro il DEA1. Mettiamo sangue in EDTA, se non si agglutina vuol dire che è DEA1 negativo. Se lo fa, è DEA1+.
I limiti della metodica hanno a che fare col fatto che è influenzata dall'agglutinazione e dal grado di anemia. Se c'è una grave anemia (ematocrito molto basso), ci
sarannopochi g.rossi che possono reagire, quindi potrebbe venire negativo perché questi magari non agglutinano. Accuratezza attorno al 90% (specificità arriva al 77-88% - Seth M et al., 2012)TEST DI AGGLUTINAZIONE SU COLONNA DI GEL (Lab)
Elevata sensibilità per DEA 3, 4, Dal ((Kessler RJ et al., 2011; Seth M et al.,2012)
Per DEA 7, la sensibilità è bassa (53 %) -- (Kessler RJ et al., 2011) la sottostima è legata alla scarsa reazione di agglutinazione.
TEST AUTOMATICO DI AGGLUTINAZIONE SU CARTUCCIA Figura 4Slides prof
Influenzato dall'agglutinazione e dall'emolisi (risultati inconclusivi). Se il campione è emolitico, o autoagglutina la cartuccia non ci dirà nulla.
Sensibilità del 92% e specificità del 100% (Kohn B et al., 2012) Falsi negativi bassisimi!
Figura 5Slides prof
TEST DI IMMUNOMIGRAZIONE SU STRISCIA
Non è influenzato dall'agglutinazione ed ha una accuratezza del
94% (specificità 100% e sensibilità 88% - Seth M. et al. 2012).
Figura 6
Slides prof
Potremmo avere falsi negativi quei cani che sono DEA1 positivi debolmente, che hanno una quantità di antigene DEA1 bassa (prima venivano considerati DEA1.1 positivi); però se si guarda bene, si vede la bandina.
TEST DI IMMUNOMIGRAZIONE SU CARTUCCIA
Test immunocromatografico, ma in circolazione c'è solo quello per il gatto.
Figura 7
Slides prof
(questo è del cane ma non c'è in circolo)
DONATORE IDEALE
Ha un peso sufficientemente elevato per poter prelevare una unità di sangue (minimo 350ml). Quindi non può avere un peso inferiore ai 25kg. Si prelevano 15-18% di sangue. Età tra i 2 e i 5 anni, di indole buona. (deve essere un animale che non si stressi alla sola vista del camice) Il volume ematico del cane si calcola facendo: Peso (kg) x coefficiente (85/90).
Figura 8
Slides prof
Deve essere clinicamente sano. Ad oggi c'è una
direttivaattuale che impone specifici controlli da effettuare per il donatore.
Esistono due tipi di strutture:
- Banca del sangue: ha il suo pacco di animali donatori che deve essere controllato per tutte le patologie e i parametri clinici ed ematobiochimici imposti dalla direttiva. Bisogna rispettare dei tempi tra un prelievo e l'altro. È una struttura che può anche STOCCARE il sangue a terzi! È autorizzata dalla ASL.
- Strutture emotrasfusionali: ambulatori autorizzati dalla ASL. Non possono conservare il sangue, ma possono prelevarlo per necessità interne. Devono avere dei donatori catalogati e registrati (e sottoposti a determinati controlli imposti dalla regione); possono chiamare questi per le necessità che si presentano. Il sangue che prelevano deve essere trasfuso subito, non si può conservare.
DEA1 negativo
DEA4 positivo (perché abbiamo visto che i DEA4+ sono molti)
DEA 3,5,7 negativo (anche se non si testano)