Concetti Chiave
- La PCR (reazione a catena della polimerasi) è una tecnica per amplificare copie di un gene tramite variazioni di temperatura.
- Le applicazioni della PCR includono lo studio di geni patogeni, impronte genetiche, terapia genica e la ricostruzione di corredi genetici di animali estinti.
- Le impronte genetiche sono uniche per ogni individuo e richiedono l'estrazione del DNA, il taglio con enzimi di restrizione e la separazione tramite elettroforesi su gel.
- La mappatura del DNA consiste nel determinare la sequenza di nucleotidi di un gene, iniziando dai singoli geni fino all'intero genoma umano nel progetto "Genoma umano".
- Dal 1995, il progresso nella mappatura ha permesso di sequenziare interi genomi di batteri e del moscerino della frutta, avanzando verso il genoma umano.
PCR o letteralmente "reazione a catena della polimerasi" è la tecnica che permette di ottenere moltissime copie di un gene grazie ad un macchinario, che sfrutta diverse temperature, inventato da Mullis.
Applicazione della PCR
-studio di geni patogeni all'interno di un cromosoma
-migliorare la conoscenza di meccanismi di regolazione genica
-impronte genetiche
-terapia genica (sia additiva che sostitutiva)
-ricostruzione corredi genetici di animali estinti.
Processo delle impronte genetiche
Le impronte genetiche sono diverse in tutti noi. Per rilevarle sono necessari vari passaggi:
-estrazione DNA da pelle, capelli, unghie...
-selezione delle sequenze ripetitive del DNA che sono diverse in ognuno di noi.
-sottoporre il DNA ad un enzima di restrizione ottenendo veri frammenti.
-amplificare i segmenti tramite PCR (reazione a catena della polimerasi)
-sottoporre i frammenti ad una "elettroforesi su gel" che separa i frammenti in base al loro peso molecolare ottenendo così un "pattern", uno schema, formato da bande scure dove ciascuna delle quali corrisponde ad un tipo di frammento.
Sequenziamento del genoma
Si tratta di determinare la sequenza di nucleotidi che compongono un gene. Si inizia mappando singoli geni, poi con il tempo , nel 1995, fu mappato l'intero genoma di un batterio e poi quello del moscerino della frutta. In questi ultimi anni è stato inaugurato il progetto "Genoma umano" e furono mappati tutti i cromosomi umani.
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