Concetti Chiave
- L'esperimento ha mostrato che la mutazione simultanea degli oncogeni Ras e Myc nei fibroblasti porta a una trasformazione visibile, a differenza delle mutazioni individuali.
- La trasformazione dei fibroblasti è caratterizzata dalla formazione di foci, con cellule che passano da fusiformi a rotondeggianti, distinguibili al microscopio.
- Le mutazioni missenso nel protooncogene Ras causano la produzione di una proteina mutante che rimane perennemente attivata.
- Le mutazioni specifiche coinvolgono la sostituzione di gly in posizione 12 o gln in posizione 61, cruciali per l'attività GTPasica di Ras.
- La proteina mutante, priva della capacità di idrolizzare GTP, stimola continuamente il ciclo cellulare attivando ciclina+CDK.
Esperimento sui fibroblasti
In un esperimento su fibroblasti, derivati da biopsia cutanea, si è verificato che se si fa mutare miratamente solo l’oncogene Ras o solo l’oncogene Myc, non si osserva nessun effetto evidente; se però mutiamo in contemporanea nella stessa cellula sia Ras che Myc osserviamo un evento di trasformazione chiaramente visibile al microscopio: le cellule danno dei foci, gruppi di cellule istologicamente distinguibili da quelle circostanti. I fibroblasti trasformati passano da fusiformi a rotondeggianti, le cellule trasformate infatti spesso non hanno lo stesso aspetto di quelle sane.
Mutazioni missenso e oncogene Ras
Sono note mutazioni di tipo missenso date dalla sostituzione di coppie di basi che cambiano il significato di uno o più codoni trasformando il protooncogene Ras nell'oncogene Ras: queste mutazioni causano la produzione di una proteina mutante perennemente attivata, sempre legata a GTP, che funziona quindi indipendentemente dallo stimolo esterno del fattore di crescita. Queste mutazioni in particolare comportano la sostituzione della gly in posizione 12 o della gln (glutammina) in posizione 61; questi due amminoacidi occupano una posizione importante per l'attività di Ras poiché si trovano nel sito dove avviene l'idrolisi del
GTP a GDP, processo dopo il quale la proteina entra in quiescenza: con queste modificazioni la proteina mutante perde la sua attività GTPasica, la capacità di idrolizzare GTP, e quindi rimane perennemente attivata continuando ad attivare ciclina+CDK, e stimolando conseguentemente il ciclo cellulare.
Domande da interrogazione
- Qual è l'effetto della mutazione simultanea degli oncogeni Ras e Myc nei fibroblasti?
- Quali amminoacidi sono coinvolti nelle mutazioni che attivano permanentemente Ras?
Quando sia Ras che Myc vengono mutati contemporaneamente nella stessa cellula, si osserva un evento di trasformazione visibile al microscopio, con la formazione di foci di cellule istologicamente distinguibili da quelle circostanti.
Le mutazioni che attivano permanentemente Ras coinvolgono la sostituzione della gly in posizione 12 o della gln in posizione 61, alterando il sito di idrolisi del GTP a GDP e impedendo la quiescenza della proteina.
Accedi a tutti gli appunti
Tutor AI: studia meglio e in meno tempo
