Concetti Chiave
- Il test di emoagglutinazione identifica il gruppo sanguigno tramite la presenza o assenza di agglutinazione degli eritrociti, utilizzando anticorpi IgM.
- La tipizzazione sanguigna è certa per il gruppo 0, che presenta anticorpi anti-A e anti-B, mentre per altri gruppi potrebbe non essere possibile distinguere tra omozigote ed eterozigote.
- Il test diretto di Coombs è utilizzato per determinare il gruppo AB0, basandosi sulla formazione di un aggregato di globuli rossi legati da immunoglobuline.
- Il sistema Ii condivide alcuni aspetti con il sistema AB0, ma differisce per le reazioni enzimatiche e la posizione genetica, con geni su cromosomi diversi.
- Il sistema degli antigeni di Lewis è glicoproteico e non è limitato ai globuli rossi, potendo interagire con selectine e mostrando una diversità antigenica determinata da fucosiltrasferasi.
Indice
Test di emoagglutinazione
Per tipizzare i globuli rossi del soggetto, tramite emazie purificate, si usa il test di emoagglutinazione, il quale si basa sulla presenza o assenza di agglutinazione: è quindi un’identificazione indiretta.
Gli anticorpi IgM (detti isoagglutinine) e la densità degli epitopi consentono di legarsi tra di loro a ponte (cross-linking) e quindi legare insieme più eritrociti (formando, appunto, un’agglutinato).
Determinazione del gruppo sanguigno
Il soggetto della prima colonna ha anticorpi anti-A e anti-B: agglutinerà emazie A0, B0, AB mentre non agglutinerà emazie di tipo 0. Si può quindi dire con certezza che il soggetto è di gruppo sanguigno 0, quindi omozigote 00.
Negli altri casi la tipizzazione non è certa, poiché non è possibile determinare se il soggetto è omozigote o eterozigote, ovvero se possiede due alleli dello stesso tipo (AA oppure BB) o uno dei due corrisponde all’allele 0 (A0 o B0).
Test diretto di Coombs
La determinazione del AB0 si compie attraverso il test diretto di Coombs. Il test si basa sul principio per cui due globuli rossi per essere agglutinati devono essere legati da un’immunoglobulina, sufficientemente estesa per creare un ponte e superare la carica netta negativa tra gli eritrociti. Inoltre, anche la densità dell’epitopo riconosciuto deve essere abbastanza alta per farlo interagire con l’anticorpo. In questo modo i globuli rossi formano un aggregato, separandosi dal siero.
L’agglutinato è visibile in una piastra da laboratorio (es. imm a lato; le due colonne più a destra (pos., neg.) sono di controllo).
Sistema Ii e AB0
Il sistema Ii è parzialmente sovrapponibile al sistema AB0, perché si basa su gruppi di carboidrati. Inoltre, gli antigeni Ii sono generati da sistemi enzimatici che agiscono sullo stesso precursore necessario per generare i gruppi AB0.
Sono, però, diverse le reazioni enzimatiche che ne determinano la formazione: nell’Ii si formano rami collaterali anche molto lunghi, rappresentati da ripetizioni di dimeri diversi. Dal punto di vista genetico, i geni per il sistema Ii si trovano nel cromosoma 6, mentre quelli per il sistema AB0 si trovano nel cromosoma 9.
Sistema degli antigeni di Lewis
Il sistema degli antigeni di Lewis è glicoproteico come il gruppo AB0. Nel sistema Lewis fucosiltrasferasi determinano la diversità del gruppo antigenico (gruppo Lewis), che può essere anche sialilato. Antigeni e carboidrati appartenenti al sistema Lewis sono anche ligandi delle selectine (E, P) e quindi non sono espressi unicamente su globuli rossi.
Proteina Duffy
Duffy è una proteina integrale di membrana. Rispetto a un sistema basato sui carboidrati, il numero di epitopi è minore. Di conseguenza anche la densità e l’intensità di reazione da loro scatenate sono meno gravi.
Domande da interrogazione
- Qual è il principio alla base del test di emoagglutinazione?
- Come si determina il gruppo sanguigno di un soggetto?
- Qual è il ruolo del test diretto di Coombs nella tipizzazione sanguigna?
- Quali sono le differenze tra i sistemi Ii e AB0?
Il test di emoagglutinazione si basa sulla presenza o assenza di agglutinazione delle emazie, permettendo un'identificazione indiretta dei globuli rossi del soggetto.
Il gruppo sanguigno si determina osservando la reazione degli anticorpi anti-A e anti-B con le emazie; ad esempio, un soggetto con anticorpi anti-A e anti-B agglutinerà emazie A0, B0, AB, confermando un gruppo sanguigno 0 (omozigote 00).
Il test diretto di Coombs determina il gruppo AB0 legando globuli rossi tramite immunoglobuline, creando un ponte che supera la carica negativa tra gli eritrociti, permettendo così la formazione di aggregati visibili.
I sistemi Ii e AB0 sono parzialmente sovrapponibili, ma differiscono nelle reazioni enzimatiche e nella genetica: i geni per il sistema Ii si trovano nel cromosoma 6, mentre quelli per il sistema AB0 sono nel cromosoma 9.
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