Concetti Chiave
- Il test di emoagglutinazione determina il gruppo sanguigno AB0 tramite la presenza o assenza di agglutinazione, usando anticorpi IgM che formano agglutinati con eritrociti.
- Il soggetto con anticorpi anti-A e anti-B non agglutina emazie di tipo 0, indicando il gruppo sanguigno 0, omozigote 00.
- Il test diretto di Coombs verifica l’agglutinazione dei globuli rossi, basandosi su immunoglobuline e densità dell’epitopo per superare la carica netta negativa tra gli eritrociti.
- Il sistema Ii, parzialmente sovrapponibile al sistema AB0, differisce nelle reazioni enzimatiche e si basa su gruppi di carboidrati con geni localizzati sul cromosoma 6.
- Il sistema antigenico di Lewis, glicoproteico come AB0, coinvolge fucosiltrasferasi e ligandi selectine, con antigeni espressi oltre che sui globuli rossi.
Indice
Test di emoagglutinazione
Per tipizzare i globuli rossi del soggetto, tramite emazie purificate, si usa il test di emoagglutinazione, il quale si basa sulla presenza o assenza di agglutinazione: è quindi un’identificazione indiretta.
Gli anticorpi IgM (detti isoagglutinine) e la densità degli epitopi consentono di legarsi tra di loro a ponte (cross-linking) e quindi legare insieme più eritrociti (formando, appunto, un’agglutinato).
Determinazione del gruppo sanguigno
Il soggetto della prima colonna ha anticorpi anti-A e anti-B: agglutinerà emazie A0, B0, AB mentre non agglutinerà emazie di tipo 0. Si può quindi dire con certezza che il soggetto è di gruppo sanguigno 0, quindi omozigote 00.
Negli altri casi la tipizzazione non è certa, poiché non è possibile determinare se il soggetto è omozigote o eterozigote, ovvero se possiede due alleli dello stesso tipo (AA oppure BB) o uno dei due corrisponde all’allele 0 (A0 o B0).
Test diretto di Coombs
La determinazione del AB0 si compie attraverso il test diretto di Coombs. Il test si basa sul principio per cui due globuli rossi per essere agglutinati devono essere legati da un’immunoglobulina, sufficientemente estesa per creare un ponte e superare la carica netta negativa tra gli eritrociti. Inoltre, anche la densità dell’epitopo riconosciuto deve essere abbastanza alta per farlo interagire con l’anticorpo. In questo modo i globuli rossi formano un aggregato, separandosi dal siero.
L’agglutinato è visibile in una piastra da laboratorio (es. imm a lato; le due colonne più a destra (pos., neg.) sono di controllo).
Sistema Ii e AB0
Il sistema Ii è parzialmente sovrapponibile al sistema AB0, perché si basa su gruppi di carboidrati. Inoltre, gli antigeni Ii sono generati da sistemi enzimatici che agiscono sullo stesso precursore necessario per generare i gruppi AB0.
Sono, però, diverse le reazioni enzimatiche che ne determinano la formazione: nell’Ii si formano rami collaterali anche molto lunghi, rappresentati da ripetizioni di dimeri diversi. Dal punto di vista genetico, i geni per il sistema Ii si trovano nel cromosoma 6, mentre quelli per il sistema AB0 si trovano nel cromosoma 9.
Sistema degli antigeni di Lewis
Il sistema degli antigeni di Lewis è glicoproteico come il gruppo AB0. Nel sistema Lewis fucosiltrasferasi determinano la diversità del gruppo antigenico (gruppo Lewis), che può essere anche sialilato. Antigeni e carboidrati appartenenti al sistema Lewis sono anche ligandi delle selectine (E, P) e quindi non sono espressi unicamente su globuli rossi.
Proteina Duffy
Duffy è una proteina integrale di membrana. Rispetto a un sistema basato sui carboidrati, il numero di epitopi è minore. Di conseguenza anche la densità e l’intensità di reazione da loro scatenate sono meno gravi.
Domande da interrogazione
- Qual è il principio alla base del test di emoagglutinazione per la determinazione del gruppo sanguigno AB0?
- Come si determina con certezza il gruppo sanguigno 0?
- Qual è la differenza tra il sistema AB0 e il sistema Ii?
- Qual è la funzione degli antigeni del sistema Lewis?
Il test di emoagglutinazione si basa sulla presenza o assenza di agglutinazione, che avviene quando gli anticorpi IgM si legano agli epitopi sui globuli rossi, formando un agglutinato visibile.
Il gruppo sanguigno 0 si determina con certezza quando il soggetto presenta anticorpi anti-A e anti-B, agglutinando emazie A0, B0, AB ma non quelle di tipo 0, indicando un genotipo omozigote 00.
Il sistema Ii è parzialmente sovrapponibile al sistema AB0, ma differisce per le reazioni enzimatiche che formano rami collaterali lunghi, e i geni si trovano su cromosomi diversi (Ii su cromosoma 6, AB0 su cromosoma 9).
Gli antigeni del sistema Lewis, determinati da fucosiltrasferasi, sono glicoproteici e possono essere ligandi delle selectine, espressi non solo sui globuli rossi ma anche su altre cellule.
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