Presentazione sull'arteriosclerosi

GANODERMA LUCIDUM E GA

Si tratta di una tradizionale medicina cinese con varie attività farmacologiche e

una bassa tossicità.

Studi precedenti hanno dimostrato il potenziale ruolo terapeutico di estratti di

Ganoderma Lucidum sull’AS. Un estratto in questione è l’acido ganoderico (GA).

Il recente studio ha dimostrato che:

• GA diminuisce la risposta infiammatoria in seguito a danno da ischemia e

riperfusione renale.

• Un composto di GA riduce il totale ammontare di colesterolo contenuto nel

sangue e nel fegato in modelli murini affetti da steatosi epatica non alcolica

(accumulo di lipidi all’interno di cellule del fegato indipendente dall’assunzione

di alcol).

MODELLI IN VIVO E IN MODELLI IN VITRO

MODELLI IN VIVO MODELLI IN VITRO

• •

Modello murino ApoE- (Topi Macrofagi derivanti dal midollo

deficienti per il gene codificante osseo (BMDMs)

per apolipoproteina E) • Cellule RAW264.7

• Protagonisti dello studio sul ruolo • Studio del ruolo di GA sulla

di GA nell’aterosclerosi polarizzazione dei macrofagi

MODELLI IN VIVO E IN MODELLI IN VITRO

I macrofagi derivanti dal midollo

osseo e la linea cellulare

I topi ApoE- vengono nutriti con un a

dieta ad alto contenuto di colesterolo RAW264.7 sono stati stimolati con:

(HCD) al fine di indurre l’AS.

I modelli vengono poi suddivisi •

LPL

in quattro gruppi diversi: •

IL-4

•

Controllo •

oxLDL (LDL ossidate)

•

1mg/Kg (basso dosaggio)

•

5mg/Kg (medio dosaggio)

•

25mg/Kg (alto dosaggio)

TECNICHE SPERIMENTALI

Le sezioni dell’aorta estratta dai topi sono state colorate con Oil

Red O, Masson’s trichrome per determinare il contenuto di

lipidi e fibre di collagene nelle placche ed ematossilina-eosina

per determinarne la misura del cuore necrotico.

Per evidenziare il fenotipo dei macrofagi e l’espressione di p65

nella placca, le sezioni dell’aorta sono state marcate con specifici

Ab (anticorpi).

•

anti-CD68 di topo (marker per i macrofagi)

•

anti-CD86 di coniglio (marker per M1)

•

anti-CD206 di coniglio (marker per M2)

•

anti-p65 di coniglio

RISULTATI IN VIVO

Cosa possiamo apprezzare?

• Riduce il contenuto lipidico

• Aumenta densità di collagene

• Riduce le dimensioni del cuore

necrotico

RISULTATI IN VIVO

Durante le 16 settimane di dieta, non c’è stata nessuna

differenza significativa nel peso dei modelli murini di

tutti i gruppi. I risultati mostrano che, nei modelli

trattati con medio e alto dosaggio di GA, le dimensioni

della placca aterosclerotica aortica erano inferiori.

I livelli di citochine pro-infiammatorie risultano essere

ridotti rispetto al controllo.

•

TNF-

•

IL-1

•

IL-6

•

MCP-1

GA inibisce la lesione arteriosclerotica che potrebbe formarsi.

RISULTATI IN VIVO

GA non riduce il numero totale di macrofagi:

CD68+ rimane intaccato, però…

• Abbassamento livelli di M1 CD86+ in

25mg/Kg

• Quantità invariata di M2 CD206+ in

25mg/Kg

• Modelli sotto trattamento a basso dosaggio

inutili

RISULTATI IN VIVO

IN VITRO: dati coerenti al modello in vivo…

GA inibisce la polarizzazione in senso M1 nei macrofagi

derivanti da midollo osseo (BMDMs)

POLARIZZAZIONE IN SENSO M1

PATHWAY TLR4/MYD88/NF-KB

Cambiamento Myd88 recluta le

TLR4 riconosce conformazionale chinasi IRAK1,

LPS e oxLDL e reclutamento di TRAF6 e IKK

Myd88 NF-kB può

I-Kb fosforilato da traslocare al

I-Kb in condizioni IKKbeta (IKK nucleo e attiva la

fisiologiche lega complex) e trascrizione dei

NF-kB successivamente geni pro-

degradato infiammatori

POLARIZZAZIONE IN SENSO M1

PATHWAY TLR4/MYD88/NF-KB

PI3K/AKT: PATHWAY DI SEGNALAZIONE

ALTERNATIVO

PI3K/Akt regola la

sopravvivenza e migrazione

macrofagica

Akt può cooperare con altre

vie, come NF-kB per

aumentare la produzione di

citochine infiammatorie

Akt può anche attivare mTOR

(amplificatore della risposta

infiammatoria)

PI3K/akt è anche un regolatore

negativo dell’infiammazione e può

sopprimere l’attivazione di NF-kB