Domande Microbiologia

DOMANDE MICROBIOLOGIA

1) Descrivi la parete di streptococcus thermophilus.

1) Lo streptococcus thermophilus è un gram+ quindi ha una parete

monostrato formata prevalentemente da peptidoglicano e in minor

parte da fosfolipidi. È dura e rigida per resistere allo stress osmotico

ed ha funzioni di ancoraggio; Il peptidoglicano è formato da

glicani(zuccheri) e da peptidi; è costituito da 2 amminozuccheri il

NAG e il NAM che vengono alternati, la parete può essere distrutta

con il lisozima ottenendo un m.o. senza parete.

Questo microrganismo è un batterio lattico, omofermentante e

anaerobio-aerotollerante.

2)Quali sono i reattivi della colorazione di gram.

2) per fare una colorazione di gram innanzitutto faccio 1 prima

colorazione con cristalvioletto; poi metto il mordente che è ioduro di

potassio che serve a formare con il cristalvioletto un composto

insolubile. Poi faccio una decolorazione utilizzando etanolo che mi

permette una prima distinzione tra gram+ e gram-, infatti la parete

dei gram – che è prevalentemente formata da fosfolipidi si scioglie

in etanolo e quindi si stacca dal vetrino e quindi i gram- diventano

trasparenti, sui gram+ che sono formati prevalentemente da

peptidoglicano non causa tutto ciò e rimangono colorati di viola.

L’etanolo disidrata e devo quindi reidratare con acqua e infine fare

la colorazione di contrasto con safranina che colora di rosso solo i

gram-.

3)Se coltivi un M.O sull’insalata qual è il metodo di conta che ti dice

anche la fase di morte?

3) È la citometria; che è una tecnica di conta che mi permette di

vedere le cellule microbiche messe in un fluido che viene fatto

passare in un macchinario che mi rileva le caratteristiche del

microrganismo.

Il fluido viene fatto passare in questo macchinario che grazie a un

principio termodinamico allinea le cellule che vengono fatte passare

in fila indiana sotto uno scanner che rileva forma e grandezza e

caratteristiche quantitative, lo scanner rileva tuttu quello che c’è

nella cellula che sia più grande di 0,5um. Utilizzando delle molecole

coloranti che si legano a qualche struttura interna delle cellule

oppure che si legano alla parete esterna e che vengono degradate

solo dalle cellule vive, rilevo quali sono le cellule morte.L’unità di

misura è evento/ml.

4)Se ho 56 colonie, ho spatolato 0,1ml della diluizione 10^-6 .quanti

ufc ho?

4) UFC: 56x10^6x10= 56x10^7 ufc/ml

5) Descrivi il ciclo vitale del Saccharomyces cerevisiae.

5) è un lievito gram – che fa la fermentazione alcolica; si riproduce

per via asessuata con la gemmazione, durante la quale dalla cellula

madre fuoriesce un cellula figlia più piccola che poi dovrà

accrescersi prima di duplicarsi a sua volta per gemmazione. In

determinate condizioni di stress ,come la carenza di zucchero e

l’eccesso di etanolo, possono fare anche la riproduzione sessuata

in cui la cellula produce un asco con dentro 4 spore di cui 2 A e 2

alfa. Queste spore hanno corredo cromosomico dimezzato, poi in

determinate condizioni ottimali germineranno.

In determinate condizioni 2 spore posso fare la coniugazione e

unirsi per dar vita a una spora diploide, questa coniugazione

avviene tra 1 spora A e una alfa ed è mediato da ferormoni e da

recettori di membrana, avviene per contatto diretto tra le 2 spore.

Il saccharomyces può sia respirare che fermentare.

6) Elenca i metodi di trasferimento orizzontale.

Sono: la trasformazione in cui la cellula attraverso proteine di

membrana prende dall’esterno della cellula del dna libero

proveniente da cellule morte e lo integra nel suo materiale genetico.

Trasduzione in cui un per casualità ruba un pezzo di dna batterico,

poi esce dal batterio e fa un ciclo litico e quando si integrerà con un

nuovo dna batterico gli donerà l informazione presente nel

frammento di dna del batterio precedente.

Coniugazione in cui 2 plasmidi si passano un informazione utile per

il microrganismo. Uno dei 2 plasmidi aquisisce un informazione

rilevante tipo la resistenza a un antibiotico e per contatto diretto la

fa acquisire anche a un secondo plasmide che non ha questa

informazione.

7)Dove finiscono gli elettroni del NADH dopo la glicolisi?

7) finiscono nella catena di trasporto degli elettroni che utilizza

come accettore di elettroni l’ossigeno, gli elettroni mi servono per

creare la differenza di potenziale che mi serve per generare atp con

l’atpiasi.

Il nadh poi verrà riossidato in krebs.

8)descrivi i batteri acetici e il loro metabolismo.

8) Sono gram - , sono aerobi, non fermentano e ossidano l’etanolo,

sono acetobacter e gluconobacter.

Possono usare anche glicerolo e ac lattico come fonte di carbonio.

I gluconobacter non hanno il ciclo di krebs funzionante quindi

ossidano l’etanolo a ac acetico.

Gli acetobacter invece hanno il ciclo di krebs e quindi ossidano

l’etanolo in ac acetico e poi l’ac acetico entra nel ciclo di krebs e

ottengo CO2 e atp.

Se usano il glicerolo al posto dell’etanolo fanno la via dei pentoso

fosfati.

9) Denaturazione dna.

9) Il dna viene denaturato rompendo i suoi legami a idrogeno che lo

tengono unito, in questo modo ottendo 2 filamenti separati, per

denaturarlo sottoponendolo a una temperatura di 94-96°.

Tm è la temperatura media di denaturazione del dna; più è alta la %

di guanina-citosina nel dna più ho legami a idrogeno e più sarà alta

la temperatura di denaturazione.

10)Se diminuisci da 100 a 40 come cambia la crescita del m.o.?

qual è l’unità di misura?

Se è un m.o. che vive a 100° mettendolo a 40 rallento la sua

crescita,se lo inoculo a 40° allungo la sua fase di latenza.

L’unità di misura sono i UFC cioè unità formanti colonia.

11) acetobacter è un gram+ o un gram-?

11) è un gram-

12) come si fa a identificare gram + e gram - ?

12) attraverso la colorazione, attraverso la tappa di decolorazione

con etalono distinguo gram + da gram-

13) descrivi una spora batterica.

13) Un m.o quando è in mancanza di nutrimento oppure quando

viene sottoposto a trattamenti termici può formare delle spore. La

cellula inizia a produrre dentro di se una spora racchiusa da una

membrara in cui è racchiuso il materiale genetico poi oltre la

membrana viene costruita una parete della spora e una corteccia e

la cellula si disgrega, tutto questo rivestimento serve a proteggere

la spora per esempio dai trattamenti termici e dalla disidratazione.

La spora è inattiva metabolicamente ed è quiescente, se si trova in

condizioni ottimali può germinare.

14) quale strumento ci permette di vedere tutte le varie fasi di

crescita di un microrganismo?

14) il citometro di flusso.

15) Se si danno 25g/L di glucosio a saccharomyces cerevisiae

questo fermenta o respira?

15) fermenta anche se siamo in presenza di ossigeno per l’effetto

crabtree, se questo m.o. è in presenza di una concentrazione di

zucchero maggiore di 10g/L fermenta.

16) Riproduzione asessuale eumiceti.

16)Gli Eumiceti comprendono funghi fruttiferi,muffe e lieviti.

Gli eumiceti si riproducono asessualmente tramite gemmazione,

blastogonia ,schizogonia. Le muffe tramite i corpi fruttiferi.

17) Se si coltiva il battere a 45° invece che a 42° cosa succede alla

sua crescita?

Se la sua temperatura ottimale era 42° ho variato di poco la sua

temperatura e quindi l’unica cosa che dovrebbe accadere e che

diminuisce poco la sua velocità di crescita se innalzassi di più la

temperatura potrei causare la denaturazione dei suoi enzimi.

18) Dimensioni batteri.

18) 1um, i virus invece 1 nanometro e i lieviti circa 10um.

19) Quali sono le strutture che rivestono Ec?

19) una membrana formata da un doppio strato di fosfolipidi e

proteine e una parete da gram – cioè formata da un doppio strato

fosfolipidico con in mezzo un sottile strato di peptidoglicano.

20) Con quale obbiettivo si osserva licheniformis a un microscopio

ottico a contrasto di fase con un oculare 10x?

20)Con l’obbiettivo 100x perché devo ingrandire di 1000 volte per

vedere i m.o.

21) Differenze tra eucarioti e procarioti.

21) Negli eucarioti il dna è racchiuso nella membrana nucleare nei

procarioti no, gli eucarioti hanno più cromosomi i procarioti ne

hanno solo 1, i procarioti hanno i ribosomi di 70S gli eucarioti di

80S, entrambi fanno la mitosi ma solo gli eucarioti fanno la meiosi,

solo gli eucarioti hanno i mitocondri, solo i procarioti hanno una

parete di peptidoglicano, solo gli eucarioti hanno i plastidi.