Misurazione della crescita

Misurazione della crescita

Esistono molti modi per misurare la crescita microbica, così da determinare la velocità di crescita e i tempi di generazione. Si può seguire l'andamento sia della massa sia del numero di cellule di una popolazione microbica, dato che entrambi aumentano con la crescita. Le due tecniche più usate per misurare direttamente il numero di cellule sono la camera per la conta e gli apparecchi contacellule (o contacolonie) elettronici.

Tecniche di misurazione

La tecnica più comune, semplice, rapida ed economica per misurare il numero di cellule è senza dubbio la conta diretta, che tradizionalmente viene effettuata con un'idonea camera per la conta di Petroff-Hausser. Oltre al numero di cellule, essa fornisce anche informazioni circa le dimensioni e la morfologia dei microrganismi. La camera di Petroff-Hausser è formata da uno speciale vetrino da microscopio provvisto di camere a profondità nota sul cui fondo è incisa una griglia. Dopo aver depositato una quantità nota del campione sul vetrino, il numero di batteri o altri microrganismi di un dato campione viene calcolato al microscopio rapportandolo al volume della camera e al tipo di diluizione del campione.

Vi sono poi gli strumenti contacellule o contacolonie elettronici come il Coulter counter, apparecchio che conta direttamente i microrganismi più grossi (come protozoi, alghe e lieviti), nei quali la sospensione microbica viene forzata attraverso un foro. Un flusso di corrente elettrica viene fatto passare attraverso tale foro mentre due elettrodi posti ai lati dell'orifizio misurano la resistenza elettrica; ogni volta che un microrganismo transita nel foro, si registra un aumento della resistenza elettrica (o una caduta della conducibilità) e così la cellula viene contata. Tali apparecchi elettronici possono tuttavia non essere precisi per il conteggio dei batteri, che, essendo molto piccoli, interferiscono con i detriti e possono formare filamenti; sono apparecchi comunemente usati nei laboratori ospedalieri per contare globuli rossi e globuli bianchi (contaglobuli). Per la conta automatizzata dei batteri ci si avvale perciò di contatori automatizzati di colonie in piastra petri.

La camera per la conta e gli apparecchi elettronici permettono di effettuare la conta di tutte le cellule, sia vive sia morte; esistono poi delle tecniche particolarmente adatte ai batteri che consentono di contare direttamente cellule vive, capaci di crescere e riprodursi. Tali metodiche sono le tecniche colturali della piastrellatura e delle membrane filtranti. Nella piastrellatura si può risalire al numero di microrganismi vivi presenti.