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Slide12­13­14

Ricerca batteri

Ricerca proteine ( )e zuccheri ( )

Diagnosi

Materiale: Liquor (in assenza di terapia): non è necessario aspirare, perché il batterio fa aumentare la

pressione del liquor, che viene spinto verso il canale ependimale

Identificazione mediante IIF con pool di sieri specifici (se il materiale in esame è ricco di batteri)

Ipoglicemia (mangiano glucosio): prendere 2 provette di liquor

Vetrino a fresco

Ricercare la presenza di batteri (se cospicui sono visibili anche a fresco) e cellule polimorfonucleate (PMN_già 3­4 globuli bianchi per campo sono

indicativi_i globuli bianchi possono essere presenti anche in seguito ad una puntura lombare non eseguita bene)

In caso di scarsa cellularità si considera negativo.

­depositare una goccia di liquido sul vetrino e coprire con un vetrino copri oggetto

­depositare una goccia di liquido sul vetrino e lasciare asciugare per la successiva colorazione di Gram;

­depositare una goccia di liquido sul vetrino e lasciare asciugare per la successiva colorazione di Ziehl­Neelsen solo se richiesta la ricerca

Mycobatteri;

I risultati dell’esame microscopico, in caso di positività, devono essere immediatamente notificati al clinico telefonicamente.

Su liquor in toto: si esegue il test rapido per lo pneumococco

Esame colturale

Terreno: agar cioccolato.

Incubazione: a 37°C in presenza del 5% di CO per 24­48h

2

Colonie: rotondeggianti, di 2­3 mm di diametro, translucido e di aspetto mucoso, colore giallognolo

Esame microscopico (Gram­)

Prove biochimiche

­ossidasi+: il citocromo c ossidato, è a sua volta, in grado di ossidare alcuni reagenti incolori trasformandoli in prodotti colorati in pochi minuti. Si

impiegano come substrati monocloroidrato di paradimetillanilina o dicloroidrato di tetrametil parafenilendiamina. Su carta da filtro viene depositata

una goccia di substrato. L’eventuale attività enzimatica viene evidenziata tramite la formazione di un prodotto di colore violaceo entro pochi

secondi. zuccheri

­fermentazione degli per distinguere le specie

Prove sierologiche

Antisieri: utilizzati per riconoscere i vari sierotipi

Sistemi al lattice con Ab­anti meningococco, dove si striscia una goccia di liquoragglutinazione (sens bassa

Test rapido: su liquor in toto, per pneumococco

Antibiotici

Sensibile alla penicillina (attenzione alle reazioni allergiche) e ai sulfamidici (non sempre, alcuni resistenti).

I sulfamidici riescono a raggiungere elevate concentrazioni liquorali, mentre la penicillina ottiene lo stesso risultato solo quando i processi

infiammatori sono particolarmente estesi.

Vaccino

Contenente polisaccaridi purificati con meningococchi di gruppo A, C,Y e W135

Nel 2000 sono iniziate le prove sperimentali, concluse nel 2007 per il ceppo B. La vaccinazione non è obbligatoria, ma in alcune regioni è gratuita.

Efficace dopo 2­3 settimane dalla inoculazione (ma valevole solo per 2­3 anni)

Nuovo Vaccino allestito con antigeni polisaccaridici coniugate a proteine immunogene

Vaccino anti­meningococco tipo C è raccomandato nei soggetti ad elevato rischio e in base a specifici programmi regionali; è in grado di indurre

una buona risposta anticorpale a partire dal 3° mese di vita.

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Essere a conoscenza di alcuni parametri chimico clinici del paziente può essere utile, per esempio un aumento delle proteine nel sangue e una

diminuzione della concentrazione di glucosio è indicativa di infezione batterica delle meningi.

Nel caso di meningite da meningococco tutte le persone venute a contatto con il paziente vengono messe sotto terapia antibiotica, rifampicina o

ciprofloxacina, con rischio di shock anafilattico.

GRAM + : ­Streptococco pn. ­Streptococchi gruppo B ­Listeria

GRAM ­ : ­Neisseria Meningitidis ­Emofilo

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Una piastra di agar sangue di cavallo e quelle di agar sale mannite, Agar Azide sodica con cristalvioletto, Agar Herellea incubate in aerobiosi

vanno lette a 24, 48 e 72 ore

La piastra di agar sangue di cavallo incubata in anaerobiosi va letta dopo 72 ore di incubazione;

Lo slide/piastra di piastra di Agar Cioccolato Selettivo va letta dopo 48 ore di incubazione;

Segnalare, isolare, tipizzare ed eseguire antibiogramma di qualsiasi tipo di colonia, indipendentemente dalla carica;

2 flaconi per emoculture (brodo di arricchimento): 1 per anaerobi, 1 per aerobi Nel 1999 sono stati introdotti i vaccini contro le infezioni invasive

da Hib.

Sono raccomandate le vaccinazioni contro la pertosse, contro il

morbillo, la parotite, la rosolia e quella contro le forme invasive da

Haemophilus influenzae b (Hib).

Sono disponibili sia vaccini monovalenti contro il solo Hib, che

vaccini combinati con altri antigeni. Per il ciclo vaccinale di base nei

nuovi nati vengono utilizzati attualmente soprattutto vaccini

esavalenti (DTP, IPV, Epatite B, Hib).

Terreni

Agar sangue di cavallo (AS)

Streptococchi (o viridanti) Streptococcus pneumoniae

Streptococcus pneumoniae (crescita in condizioni di anerobiosi)

Agar Cioccolato (GC)

Haemophylus influenzae, Neisseria meningitidis

Slide Biocult­GC o

piastra di Agar Cioccolato Selettivo

Agar Sale Mannite (ASM) Staphylococcus aureus

Agar Herellea (HeA) Escherichia coli

Agar sangue Azide sodica con cristalvioletto (Az) selettivo per gli streptococchi

Dettagli
Publisher
A.A. 2015-2016
6 pagine
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SSD Scienze mediche MED/07 Microbiologia e microbiologia clinica

I contenuti di questa pagina costituiscono rielaborazioni personali del Publisher Andrea P. di informazioni apprese con la frequenza delle lezioni di Tecniche diagnostiche in Virologia, Micologia e Microbiologia e studio autonomo di eventuali libri di riferimento in preparazione dell'esame finale o della tesi. Non devono intendersi come materiale ufficiale dell'università Università degli Studi di Milano o del prof Clerici Pierangelo.