Basi di morfologia umana - esercitazione microscopi

7-3-2014

[MICROSCOPIO OTTICO]

immagini >1micron

.potere risoluzione:distinguere due punti come separati

.vetrini sono sempre miscugli di tessuti

microscopi:

-ottico

-a fluorescenza

-fluorescenza confocali (piu piani)

-Elettronico a scansione

-elettronico a trasmissione

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CREAZIONE DEL PREPARATO

FISSAZIONE= impedire la degradazione

2 tecniche

.A FREDDO: si abbassa la temperatura --> si inattivano enzimi degradanti

Si usa qualora serva una diagnosi velocissima per operazioni imminenti

problemi: è meno definito

vantaggi: richiede meno tempo

.CHIMICA: si usano aldeidi che rallentano gli enzimi--> PREPARATI PIU DEFINITI

Problemi: richiede molto molto tempo

.non si puo usare in emergenza

TAGLIARE: posso tagliare organo solo se e solido

. A FREDDO --> è solido per forza abbassato a temperatura bassa

diagnosi veloce

.CHIMICI--> devo INCLUDERLO in PARAFFINA

Per farlo essendo che la paraffina e lipidica devo disidratare il preparato

-->lo disidrato facendolo passare in soluzione alcolica

---> fettina finale = pochi micron

AFFETTATO DA UN MICROTOMO

.ATTENZIONE= la forma sara diversa in relazione a che tipo di colorante ho usato

COLORARE:

piu comune

-EMATOSSILINA EOSINA

EMATOSSILINA BLU colora ACIDI --> nuclei (dna) rna zone ad attiva sintesi

proteica

EOSINA ROSSA colora BASI--> CITOPLASMA COLLAGENE ECCETRA

.Attenizone : a causa del processo spesso i lipidi possono andare persi ---> cio

che e lipidico puo risultare vuoto

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Se si devono evidenziare altre strutture --< si usano coloranti specifici