Anticorpi monoclonali - produzione e utilizzo in terapia

VIRUS ONCOLITICI

Sono virus programmati in laboratorio per duplicarsi esclusivamente in cellule tumorali. Quando li somministriamo, quindi, la cellula normale può essere infettata ma il virus non cresce e quindi la cellula normale non ha problemi. Nel caso di cellula tumorale, invece, il virus trova proteine o oncogeni (in generale, materiale genetico e proteico proprio delle cellule tumorali) che ne inducono la replicazione e quindi l'uccisione della cellula tumorale.

Inoltre, questi virus sono programmati per far produrre alla cellula tumorale, prima di ucciderla, una potente citochina GM-CSF. Quando la cellula si rompe si liberano i virus che possono infettare altre cellule tumorali e la citochina che attira nel tumore cellule del sistema immunitario che contribuiranno alla distruzione delle cellule tumorali.

Imlygic - Virus oncolitico derivante da herpes simplex virus indebolito - Autorizzato nel 2016 - Indicazione per melanoma di cui sfrutta l'organizzazione interna per

replicarsi- Viene somministrato mediante iniezione nel sito del melanoma (l'iniezione topica è possibile perché sono tumori cutanei)I pazienti affetti da melanoma inoperabile diffuso hanno dimostrato un aumento del tempo di vita libero da malattia ma non è ancora noto se questo beneficio si tradurrà in una sopravvivenza maggiore perché è stato approvato da poco; in alcuni casi per ora si è osservata una remissione ma ancora non si hanno dati sulla sopravvivenza a 5 anni.

Effetti indesiderati lievi data la selettività del meccanismo d'azione -> speranza maggiore sul mercato per i malati di melanoma.

CART CELLS (chimeric antigen receptor T cells) Tecnica che si sta cercando di sviluppare soprattutto per il trattamento di tumori liquidi. L'obiettivo è quello di programmare i linfociti T in modo da riconoscere antigeni definiti identificati dal ricercatore per poi scatenare gli stessi eventi che portano

All'attivazione linfocitaria si ottiene grazie a recettori chimera con una porzione (catena variabili di un anticorpo monoclonale) per il riconoscimento specifico dell'antigene di interesse e con l'altra di un TCR in modo da attivare le vie di trasduzione che portano all'attivazione linfocitaria.

Recettori di seconda generazione: il linfocita T viene geneticamente modificato in modo che (dall'esterno all'interno) esprima una parte di sequenze di catena variabile che riconosce un antigene tumorale, uno spacer, un dominio transmembrana e dei domini tipici di TCR a livello intracellulare che attivino tutte le vie di trasduzione che portano all'attivazione linfocitaria.

Recettori di terza generazione: hanno più domini di attivazione delle vie di trasduzione rispetto a quelli di seconda generazione e, quindi, sono più potenti! Il primo utilizzo in terapia di queste cellule ha dimostrato una remissione sostenuta in pazienti con leucemia (Chimeric

Obbiettivo: modificare T in modo che possano riconoscere antigeni tumorali ed esplicare comunque la loro azione citotossica.

Problema: i linfociti T modificati vengono attaccati dal sistema immunitario che riconosce proteine eterologhe.

Soluzione: modifico TCR con delle catene di anticorpo umano. TCR è costituito da una catena α e β extracellulari per il riconoscimento del ligando e catene ζ intracellulari responsabili dell'attivazione delle vie di trasduzione che porta all'attivazione dei T. In prossimità del TCR si trova CD3 che potenzia l'effetto del legame Ag-TCR contribuendo al segnale di attivazione dei T.

Per ottenere il recettore chimerico desiderato:

1. Individuo l'antigene di interesse sulle cellule tumorali
2. Costruisco anticorpo monoclonale (possibilmente umano) con le tecniche solite che riconosca l'antigene di interesse.
3. Seleziono le catene variabili dell'anticorpo.