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Tesina sperimentale di:
Orciani Chiara; Micello Fabiola; Mugianesi Sara; Talacchia Ludovica e
Pieroni Federica.
Classe 5C/B Anno scolastico 2007/2008
Obiettivo
Scopo della ricerca è quella di individuare e
quantificare i mutamenti che si verificano a
livello della struttura secondaria del
costituente proteico principale dei capelli
(cheratina) prima e dopo acconciature. Per
acconciatura si deve intendere il solo
trattamento al calore umido o secco dei
capelli per arricciarli.
Tecnica impiegata
La tecnica impiegata per l’indagine è la
spettroscopia infrarossa FTIR che utilizza il
sistema di campionamento ATR. Si focalizza
l’attenzione sulle frequenze di assorbimento
gruppi funzionali caratteristici della cheratina
sia prima che dopo il trattamento dei capelli.
Come è fatto un capello?
Il capello è costituito
prevalentemente da cheratina
(~90 %), una proteina fibrosa
che risulta dalla
policondensazione di vari α–
aminoacidi. I più importanti
sono:
cistina 17.5 % ;
serina 11.7 %;
acido glutammico 11.1 %;
treonina 6.9 %;
glicina 6.5 %;
arginina 5.6 %.
Come è fatto un capello?
E’ costituito da catene polimeriche
disposte parallelamente all’asse del
capello in forma ripiegata (β–cheratina)
o a spirale (α–cheratina).
Come è fatto un capello?
Nella struttura a foglietto β (detto anche foglietto β ripiegato)
è formato dai piani dei vari legami peptidici.
Tra i gruppi N–H e C=O delle catene che si interfacciano si formano legami
idrogeno (legami idrogeno intercatena); perciò i foglietti sono tenuti assieme da
interazioni dedoli. figura
1(struttura
β foglietto
del
polipeptide
CysSerGlu
)
ThrGlyArg
Come è fatto un capello?
In tutte le figure che rappresentano le superfici molecolari e la carica parziale, gli
atomi con elevata carica parziale negativa sono blu intenso; gli atomi con elevata
carica parziale positiva sono rosso intenso. Quando la carica parziale si avvicina
allo zero, l’atomo è più scolorito. Gli atomi con carica parziale nulla sono bianchi.
figura 2
(superficie
molecolare e
distribuzio
ne della
carica
parziale
della struttura
β–foglietto
del
polipeptide)
Come è fatto un capello?
Nella struttura ad α–elica i piani dei legami peptidici sono paralleli
all’asse dell’elica. All’interno dell’elica ogni legame peptidico partecipa alla
formazione di legami idrogeno (legami idrogeno intracatena).
figura 5 (struttura α– elica destrorsa,
a nastro , del polipeptide
figura 3 (struttura α– elica del CysSerGluThrGlyArg)
polipeptide CysSerGluThrGlyArg)
Come è fatto un capello?
figura 4 (superficie
molecolare e
distribuzione della
carica parziale della
struttura α–elica del
polipeptide
CysSerGluThrGlyArg
Come è fatto un capello?
Da cosa deriva l’estensibilità del capello?
Ogni giro dell’elica è tenuto unito a quelli adiacenti da
altri legami idrogeno. Da ciò deriva la notevole
estensibilità del capello sottoposto a trazione. In
ambiente umido è possibile raggiungere allungamenti
fino al doppio della lunghezza in quanto si ha una
transizione dalla forma α alla forma β.
Parte sperimentale
APPARECCHIATURE E STRUMENTI: Piastra professionale per acconciature
capelli: liscia e mini frisée; arriccia capelli; riscaldatore elettrico ; termometro;
spettrofotometro FTIR.
REAGENTI: n–pentano ; etere etilico.
MATERIALI: Vetreria di laboratorio , pinze metalliche
PROCEDIMENTO:
I capelli scelti sono lisci naturali e le acconciature consistono nell’arricciarli.
1) Si prendono diversi campioni di ciocche di capelli (non lavati con shampoo od
altri detergenti da qualche giorno ) e si puliscono, prima con n–pentano poi con
etere etilico per eliminare eventuale grasso presente.
2) Si lasciano asciugare all’aria e, quindi, si registrano gli spettri IR prima e dopo
acconciatura.
3) Per l’acconciatura al calor umido, la ciocca di capelli viene avvolta e fissata
attorno ad una piccola bacchetta di vetro che viene esposta, ad una distanza di
circa 7 cm, al vapore emesso da acqua bollente; successivamente viene
asciugata con asciugacapelli. Per le altre acconciature le ciocche di capelli
vengono inserite nella piastra o nell’arriccia capelli e riscaldate per pochi
secondi ad una temperatura elevata.
N.B. Gli spettri, dopo l’acconciatura, sono stati registrati campionando la zona che,
visivamente, presentava il cambiamento fisico più evidente (le zone che
presentavano la curvatura più marcata).
Parte sperimentale tabella1
Tipo di Aspetto del Trattamento termico
campi capello
one
1 s.m. Liscio naturale Nessuno
2 s.m. Arricciato Vapore acqueo a 75 °C per 50 minuti e
successiva asciugatura con asciuga
capelli.
1 s.b. Liscio naturale Nessuno
2 s.b. Frisée Piastra mini frisée
1 f. m. Liscio naturale Nessuno
2 f. m. Arricciato Arriccia capelli
Parte sperimentale
Risultati sperimentali spettri IR dei capelli prima e dopo
l’acconciatura:
figura 61
Spettri IR dei
sm
capelli : (1
blu) capelli tal
quali ; (2 nero)
capelli
arricciati con
vapore acqueo
ed asciugati
con aria calda. Parte sperimentale
Cosa andiamo ad osservare sullo spettro?
Le bande caratteristiche dei gruppi amidici delle proteine (simili alle bande di
assorbimento delle amidi secondarie, riportate nella tabella).
composto vibrazione di gruppo numero d’onda commenti
(cm )
– 1
amidi Stretching di N–H 3480 – 3440 (m) NH libero,
secondarie 3320 – 3270 trans–
(m) NH legato,
trans–
Stretching di C=O (Amide 1680 – 1630 (s) fase solida
I) 1700 – 1680 (s) soluzione
diluita
Deformazione N–H 1570 – 1515 (s) fase solida
(Amide II) 1550 – 1510 (s) soluzione
Parte sperimentale
Cos’è la banda AMIDE I ?
La banda amide I è una banda dello Spettro IR che cade
nell’intervallo tra certo
1630 cm –1 e 1640 cm –1. Essa è costituita da un
numero di bande componenti che si sovrappongono e che
rappresentano eliche , strutture β, avvolgimenti , strutture casuali,
catene laterali di aminoacidi.
Il numero e la loro posizione di tali bande componenti sono ottenuti
dagli spettri ad alta risoluzione.
Come si ottiene la sua risoluzione?
per ottenere la risoluzione della banda dell’amide I viene usato un algoritmo
detto deconvoluzione.
Parte sperimentale
Quindi per calcolare la percentuale delle singole strutture
prima e dopo l’acconciatura:
Dopo aver risolto la banda Amide I:
1) Si assegnano alle bande componenti le singole conformazioni
in base a delle tabelle di correlazione (che vedremo dopo);
2) Si calcolano le aree delle singole bande componenti
(corrispondenti alle conformazioni) direttamente sullo spettro;
3) Si eseguono i calcoli come suggerisce il metodo, usando le
aree corrette.
TABELLA di CORRELAZIONE
Legenda:
α (α–elica ); β (β–struttura ) ; 3t (3–turn è considerata una forma di elica )] ; R (random
coil) ; S (vibrazioni degli aminoacidi di catena laterale) ; T [turns and bends
(ripiegamenti ed anse che provocano un cambiamento di direzione della catena
polipeptidica e collegano le estremità di due segmenti con strutture ad α–elica oppure
a foglietto β. Comuni sono i ripiegamenti che uniscono segmenti consecutivi di un
foglietto β antiparallelo chiamati ripiegamenti β (β turns).
Numero d’onda (cm ) Assegnazione Simbolo
– 1
1695 – 1670 Struttura β intermolecolare β
1690 – 1680 Struttura β intramolecolare β
1666 – 1659 Elica “ 3–turn “ 3t
1657 – 1648 α–elica α
1645 – 1640 Random–coil R
1640 – 1630 Struttura β intramolecolare β
1625 – 1610 Struttura β intermolecolare β
1667, 1684, 1693 Turns and Bands T
1660–1610 Deformazione NH } S
(+)
3
1600–1560 Stretching CO (-)
2
TABELLA di CORRELAZIONE
Composto Vibrazione di Numero d’onda (cm Commenti
gruppo )
– 1
Aminoacid Deformazione 1660 – 1610 (w) (asym)
i NH 1550 – 1485 (m) sm.
(+)
3
Stretching 1600 – 1560 (s) asym
CO 1410 sym.
(-)
2 Parte sperimentale
Ecco la banda amide I visibile attraverso lo SPETTRO DECONVOLUTO
dei capelli sm prima dell’acconciatura figura 9
(a) spettro
normale ; (b)
spettro
deconvoluto.
(aree riportate in
tab. 5)