Riassunto esame Laboratorio chimica degli alimenti, Prof. Plastina Sandra, libro consigliato La chimica e gli alimenti. Nutrienti e aspetti nutraceutici, Luisa Mannina

Esercitazione di laboratorio

Esperimento 1

Estrazione, ripartizione e analisi cromatografica su strato sottile (TLC) di carotenoidi da matrici alimentari

Obiettivo

I carotenoidi, pigmenti presenti in svariate matrici alimentari, vengono estratti con solvente polare (pretrattamento), purificati usando un solvente apolare (ripartizione liquido-liquido) e separati utilizzando la cromatografia su strato sottile.

Principi teorici

La cromatografia su strato sottile (TLC) è una tecnica cromatografica utilizzata per separare dei componenti da una miscela omogenea. Questo metodo si basa sul diverso adsorbimento delle sostanze, ovvero sulla diversa capacità che le molecole di ogni sostanza hanno di legarsi alle molecole del solvente (fase mobile) e sulla diversa capacità del solido (fase stazionaria) di trattenere le molecole del campione.

• Fase stazionaria: è fissa (solido o liquido supportato). Rappresenta la resistenza alla migrazione di un soluto.
• Fase mobile (fase eluente): liquido o gas che scorre sulla fase fissa: provoca la migrazione di un soluto nella direzione del suo scorrimento.

Il pretrattamento è l’insieme delle procedure richieste per avere l’analita o gli analiti di interesse in forma determinabile. Cioè, lo stadio preliminare che consiste nel portare la matrice nella forma più opportuna ai fini della determinazione analitica.

Materiali di consumo

• Matrice alimentare: Spinaci.
• Lastre di gel di silice su supporto di alluminio (TLC).
• Carta da filtro.
• Cotone.
• Solvente di estrazione: MeOH. (20 mL)
• Solvente di ripartizione: Esano. (30 mL)
• Solvente di eluizione (fase mobile): Esano/ AcOEt
• Na SO₂ 4

Attrezzatura

• Mortaio e pestello
• Coltello
• Beute
• Imbuto separatore
• Pallone da 50 mL
• Camara eluente
• Imbuto per liquidi
• Bacchette di vetro
• Capillari di vetro

Procedura

Fase 1: Estrazione dei carotenoidi

• Gli spinaci sono stati ridotti in piccoli pezzi con un coltello e trasferiti nel mortaio, poi abbiamo schiacciato con il pestello i pezzi e aggiunto 20 mL di solvente di estrazione (MeOH) fino ad ottenere una poltiglia con un liquido di colore verde.
• Abbiamo lasciato decantare la miscela pochi minuti.
• A questo punto abbiamo trasferito la soluzione in una beuta facendo uso dell’imbuto munito di carta da filtro per trattenere eventuali sospensioni solide.
• Aggiungiamo altri 10 mL di solvente di estrazione (MeOH) ai residui nel mortaio e abbiamo filtrato la soluzione nella beuta (contenente la prima filtrazione) utilizzando l’imbuto.