Report Microbiologia applicata

Report tecnico-scientifico microbiologia applicata

Anno accademico 2021/2022 0

Indice

• Microbiologia generale .................................................................................................... 3
• 1. Valutazione carica batterica mesofila, aerobia di un campione di suolo .... 3
• 1.1 Introduzione e scopo .................................................................................................. 3
• 1.2 Materiale e metodi..................................................................................................... 3
• 1.3 Risultati....................................................................................................................... 6
• 2. Ottenimento coltura pura di microrganismi ambientali ................................ 7
• 2.1 Introduzione e scopo .................................................................................................. 7
• 2.2 Materiali e metodi ...................................................................................................... 7
• 2.3 Risultati e discussione ................................................................................................. 8
• 3. Valutazione attivita’ proteolitica, amilasica e catalasica di un microorganismo ............................................................................................................. 9
• 3.1 Introduzione e scopo .................................................................................................. 9
• 3.2 Materiale e metodi..................................................................................................... 9
• 3.3 Risultati e conclusioni ............................................................................................... 10
• 4. Valutazione utilizzo di zuccheri di S. thermophilus e L. delbruckii subsp. Bulgaricus ........................................................................................................................... 11
• 4.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 11
• 4.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 11
• 4.3 Risultati e conclusioni ............................................................................................... 12
• 5. Colorazione di Gram ................................................................................................ 13
• 5.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 13
• 5.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 13
• 5.3 Risultati e discussione .............................................................................................. 14
• Microbiologia industriale .............................................................................................. 16
• 1. Semina di Saccharomyces cereviseae ............................................................................ 16
• 1.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 16
• 1.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 16
• 1.3 Risultati e discussione ............................................................................................... 17
• 2. Semina di Penicillium chrysogenum ............................................................................. 17
• 2.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 17
• 2.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 18
• 2.3 Risultati e discussioni ............................................................................................... 19
• 3. Semina di Rhizopus oryzae ........................................................................................... 20
• 3.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 20
• 1 3.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 20
• 3.3 Risultati e discussione .............................................................................................. 21
• Microbiologia alimentare .............................................................................................. 22
• 1. Analisi microbiologiche su alimenti freschi ..................................................................... 22
• 1.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 22
• 1.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 22
• 1.3 Risultati e discussione .............................................................................................. 23
• 2. Analisi microbiologiche su alimenti fermentati ............................................................. 24
• 2.1 Introduzione e scopo ................................................................................................ 24
• 2.2 Materiali e metodi .................................................................................................... 24
• 1.3 Risultati e discussione .............................................................................................. 25

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Microbiologia generale

1. Valutazione carica batterica mesofila, aerobia di un campione di suolo

1.1 Introduzione e scopo

Lo scopo di questa attività è quello di determinare la carica batterica mesofila e aerobia di un campione prelevato dal suolo, ad una temperatura di circa 10°C in condizioni umide. La determinazione della carica batterica sarà possibile a seguito di tecniche di diluizione, semina in piastra per spatolamento e incubazione, e il risultato ottenuto verrà espresso in UFC per grammo di campione.

1.2 Materiale e metodi

I materiali utilizzati per questa attività sono:

• Beuta per il campione
• Campione di suolo
• Bilancia tecnica
• Soluzione fisiologica (9 g/L di NaCl)
• 4 capsule Petri con terreno agarizzato (2 con Nutriet agar e 2 con malt agar)
• Provette di vetro
• Vortex
• Pipette e pro-pipette
• Spatole
• Becco bunsen

La prima operazione da fare per poter condurre l’attività è la preparazione del campione e quindi bisogna procedere con operazioni di diluizione e piastramento. Preparare la diluizione 10^-1 utilizzando 180 mL di soluzione fisiologica contente 9 g/L di NaCl (serve per evitare stress osmotici) e 20 gr circa di terra, prelevata a circa 10°C in condizioni di umidità, e omogenizzare la provetta con un vortex, strumento che serve per omogenizzare il campione.

Al fine di lavorare in condizioni di sterilità ed evitare contaminazioni del campione, si lavora utilizzando un becco Bulsen, strumento formato da due fiamme, una fiamma riducente che risulta essere la fiamma più visibile ma che non ha funzioni sterilizzanti, e una fiamma ossidante che si vede meno e viene utilizzata per sterilizzare.

Utilizzare in seguito cinque provette e marcarle con un pennarello con il numero corrispondente alla diluizione da effettuare (partendo dalla diluizione -1 fino alla diluizione -5) e ciascuna contiene 9 mL di soluzione fisiologica. Per effettuare la prima diluizione decimale si utilizza una pipetta sterile monouso e una pro-pipetta e si preleva 1 mL di campione avvicinandosi al becco bunsen con fiamma ossidante accesa per garantire la sterilità. Inserire il campione prelevato all’interno di una provetta (la provetta -2) e omogeneizzare nel vortex, ottenendo la diluizione 10^-2. Prelevare nuovamente 1 mL dalla provetta -2 e inserirlo nella provetta -3, omogeneizzare e ripetere l’operazione fino ad ottenere la diluizione 10^-5.

Una volta effettuate le diluizioni, si può procedere con l’operazione di piastramento andando innanzitutto a nominare le quattro piastre che conterranno terreno agarizzato di due diverse tipologie. Due piastre contengono terreno Nutriet agar (NA), che è un terreno non selettivo che favorisce la crescita di batteri ma si potrebbero anche osservare delle muffe. Le altre due pia