Concetti Chiave
- L'operone lac di E. coli può essere regolato oltre il semplice meccanismo "acceso-spento", modulando il livello di trascrizione.
- In presenza di solo lattosio e assenza di glucosio, l'adenilato ciclasi produce AMPciclico, che attiva il complesso CAP-promotore per massimizzare la trascrizione.
- La massima espressione dell'operone si verifica quando l'attività di RNA polimerasi è spinta al massimo dal complesso CAP-AMPciclico.
- Quando ci sono sia lattosio che glucosio, l'operone è attivato, ma la trascrizione è minima poiché l'adenilato ciclasi è inibito dal glucosio.
- L'assenza di AMPciclico impedisce al complesso CAP di legarsi al promotore, riducendo la trascrizione dei geni strutturali a livelli minimi.
Indice
Regolazione dell'espressione genica
L’espressione genica dell’operone LAC può essere regolata più finemente che semplicemente con il meccanismo “acceso-spento” appena illustrato, si può infatti regolare il livello di trascrizione; ipotizziamo quindi le due situazioni principali in cui può trovarsi un E.Coli:
Condizioni di massimo potenziamento
• nel terreno di coltura c’è solo lattosio e non glucosio, vi è quindi un potenziamento della trascrizione dei geni strutturali dell’operone; in assenza di glucosio l'adenilato ciclasi trasforma l'ATP in AMPciclico: quando ci sono livelli elevati di AMPciclico questo si associa a una proteina (CAP), formando un complesso attivatore della trascrizione che si lega al promotore, spingendo al massimo l'attività di RNA polimerasi. Questa è la situazione di massima espressione;
Condizioni di trascrizione minima
• nel terreno di coltura c'è sia lattosio che glucosio: l'operone è attivato, perchè la presenza del lattosio blocca il repressore, però la trascrizione è regolata a livelli minimi perchè in presenza di glucosio l'enzima adenilato ciclasi non funziona, viene inibito (ci sono concentrazioni soglia oltre il quale adenilato ciclasi non funziona); non viene quindi prodotto AMP ciclico, non si forma il complesso con CAP, che è presente ma non si lega al promotore, la trascrizione dei geni A, Z e Y avviene al livelli minimi fino a quando il glucosio non scende sotto una certa soglia.