Relazione Laboratorio di Zoologia

Relazione laboratorio di zoologia 3-4 luglio 2020

Estrazione pigmenti dalle foglie e separazione con cromatografia

La cromatografia su carta assorbente è una tecnica di separazione ed individuazione di composti in una data miscela omogenea. In questo esperimento, vogliamo verificare la quantità e la presenza di pigmenti sia fotosintetici sia non fotosintetici presenti in alcune piante.

Per questo esperimento ho utilizzato 3 strisce di carta assorbente, 3 bicchieri a bordi alti, forbici, righello, matita, mortaio con pestello, alcool etilico al 96%, acetone (solvente per unghie). Su un’estremità delle strisce di carta ho segnato una riga a 2 cm dal bordo che indica il punto esatto dove depositare alcune gocce della soluzione da separare.

La soluzione da analizzare è stata ottenuta tramite triturazione delle foglie con un mortaio e pestello con aggiunta a filo di alcool etilico in modo tale da estrarre il pigmento dalla cellula vegetale. Questa operazione è stata eseguita per 3 specie vegetali: Radicchio, Lattuga e Spinaci. Qui di seguito riportate le foto fatte al momento.

Successivamente è stata estratta una goccia per volta della soluzione liquida contenuta nel mortaio e posta al centro della linea a matita fatta sulla striscia di carta assorbente. Operazione ripetuta per tutti e 3 i campioni. Una volta asciugato il campione, si è proceduto ad immergere in un bicchiere contenente acetone la striscia di carta al fine di verificare la risalita del sovente sulla stessa, effetto ottenuto per capillarità del substrato assorbente.

“L’azione del solvente è quella di migrare”, trascinandoli verso l’alto, i vari pigmenti contenuti nella soluzione campione. A diversi pesi specifici dei pigmenti, avremo delle chiare linee di separazione degli stessi individuabili attraverso le diverse colorazioni che si presenteranno sulle strisce di carta assorbente.

Risultati dell'esperimento

Come si può facilmente notare, nelle 3 specie vegetali ho ottenuto differente presenza di pigmento per tipologia e quantità: Clorofilla A, Clorofilla B, Carotene e Xantofille. Segnate delle linee verticali in corrispondenza del limite dei pigmenti, ho proceduto a misurarne la distanza percorsa dal punto di partenza della prima linea eseguita al principio. Di seguito una tabella riepilogativa con le risultanze emerse calcolando il fattore di ritenzione RF, comparato al percorso del solvente, di ogni tipo di pigmento per le 3 specie: