Biologia generale e cellulare

Il DNA entra nel nucleo come linear DNA e poi circolarizza grazie alla proteina cellulare DNA ligase

• La replicazione del DNA di Herpes avviene nel nucleo

• Uno strand viene tagliato liberando un 3’OH

• Da qui parte la sintesi del nuovo filamento

• Il nuovo filamento causa un dislocamento del vecchio filamento identico che diventa ssDNA e viene copiato

tramite sintesi discontinua

• Si formano concatameri di genoma che poi vengono tagliati

• NO problema al 5’

Proteina primer: Adenovirus

Il primer è una proteina chiamata preterminal protein legata ad un C

La C legata alla preterminal protein si appaia con una G sulle ITR in un sito più interno

Vengono sintetizzate alcune basi

La preterminal protein fa uno shift all’inizio delle ITR, la polimerasi si stacca e la replicazione continua

Mentre l’altro strand viene rimpiazzato da quello nuovo la proteina virale DNA binding protein lo lega

Le 2 ITR si legano tra loro formando una regione di dsDNA, a questo punto la pTP e la Pol si legano e la

sintesi del nuovo strand ha inizio

Variola Virus (virus del vaiolo)

• Linear dsDNA 135-360kbp (grande)

• replica nel citoplasma: codifica per tutte le proteine necessarie a replicare il suo genoma

• 5’e3’ sono legati in maniera covalente a formare un loop

Poxvirus

• Virus Variola (variola, vaiolo: dsDNA, Orthopoxvirus, Poxviridae)

• XVIII° secolo: responsabile del 20% dei decessi in Europa

• Anni '50: 50 milioni di casi/anno

• La vaccinazione di massa ha ufficialmente eradicato il virus nel 1980

La trasmissione dei Poxvirus avviene generalemente tramite contatto con persone, animali o persone infette

Poxvirus circolanti:

mollusco contagioso e del vaiolo delle scimmie (monkeypox)

Generalmente le infezioni da poxvirus possono comportare la comparsa di: lesioni cutanee, noduli cutanei e

rash disseminati.

Papilloma Virus:

• oltre 200 genotipi virali: la maggior parte causa lesioni benigne, come le verruche che colpiscono la cute ed

i condilomi o papillomi che interessano le mucose genitali e orali.

• I tipi più pericolosi provocano lesioni a evolutività maligna nelle vie respiratorie superiori o ai genitali

maschili e femminili

• L’unica vera forma di prevenzione è rappresentata dalla vaccinazione. vaccino nonavalente Gardasil 9

• Pap Test ogni 3 anni dai 25 anni e dai 33 anni l’HPV DNA Test ogni 5 anni.

Replicazione del Papilloma Virus (Virus di Classe I)

DNA circolare a doppia elica 8 kb. Si replica nel nucleo.

Infetta l'epitelio stratificato o la mucosa, dove i cheratinociti proliferanti indifferenziati sono i bersagli iniziali

dell'infezione virale produttiva

Innanzitutto, avviene l'attivazione del promotore nella regione regolatrice a monte che avvia l'espressione

delle prime proteine. Due di essi, E1 ed E2, dirigono i fattori di replicazione della cellula ospite verso l'origine

virale della replicazione

L'HPV si replica utilizzando un sistema di replicazione del DNA del tipo a buccia di cipolla (replication fork)

Eritema Infettivo o quinta malattia:

• Parvovirus B19

• Contratta durante l'infanzia, Trasmissione per via aerea

• Temporanea soppressione dell'eritropoiesi

• Eritema caratteristico su braccia, gambe e guance, nonché di sintomi più aspecifici, come mal di testa,

senso di fatica, febbre lieve (febbricola), mal di gola e nausea.

• Sintomi dopo 6 giorni dal contagio e si protraggono per circa una settimana, durante la quale si ritiene che i

soggetti infetti non trasmettano più il virus

Replicazione del Parvovirus (Virus di Classe II):

ssDNA: codifica pochissime proteine: solo proteine di replicazione (repORF) per replicare il genoma e

proteina del capside (capORF) per produrre il virione. Parte del genoma costituisce il primer

• il genoma del parvovirus è ssDNA e non può essere trascritto in mRNA e tradotto in proteine

• il genoma del parvovirus viene visto dalla cellula come un DNA da riparare perché non ci sono ssDNA nella

cellula

• la pol cellulare riapre il fermento e lo fa diventare dsDNA

• a questo punto può essere trascritto e tradotto: viene prodotta la proteina virale Rep78/68

• La proteina virale Rep78/68 fa un taglio nel genoma e la pold finisce di replicare le TR

• Le TR si ibridizzano tra di loro

• la replicazione avviene tramite STRAND DISPLACEMENT

• uno strand diventa DNA genomico e l’altro funge da templato

Priming del DNA: Parvovirus

• La replica è continua

• Nessuna pol , utilizza ITR per l'autoadescamento

• Richiede pol 8, RF-C e PCNA

Per l'inizio sono necessarie le proteine Rep78/68 e risoluzione: endonucleasi, elicasi, lega il terminale 5'

Nessuna forcella di replicazione, spostamento del filamento

ALCUNI VIRUS MODIFICANO LE CAPACITA’ REPLICATIVE DELLA CELLULA OSPITE:

• La maggior parte delle nostre cellule è quiescente: non si replica

• Ma i virus replicano male in cellule quiescenti

• Alcuni virus inducono, tramite proteine virali la replicazione della cellula ospite

• Cellular retinoblastoma (rb) gene

• Rb protein controlla entrata in fase S

• Rb = tumor suppressor gene

Rb si lega a fattori di trascrizione E2F necessari per la replicazione cellulare e non gli permette di legarsi a

promotori cellulari e indurre la trascrizione dei geni importanti per il ciclo cellulare

Epstein-Barr Virus

È un Herpesvirus. Infette linfociti B. È la causa della mononucleosis. Associato ai Linfomi di Burkitt

• EBV può indurre l’immortalizzazione della cellula ospite: la cellula si divide infinite volte, non muore mai

• Le protein virali coinvolte in questo processo sono EBNA-1,2,3,LP e LMP-1

• EBNA2 gioca un ruolo cruciale nell’attivazione e proliferazione del linfocita B subito dopo l’infezione

• EBNA2 e EBNA-LP regolano l’espressione di protoncogeni come MYC e attivano fattori di trascrizione

come IRF4, CBF1 e PU.1

• Questi geni promuovono l’attivazione dei linfociti B e la loro proliferazione