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La soluzione di Luff era già preparata. Quindi sono passato direttamente alla

chiarificazione del succo di frutta.

In un matraccio da 250 ml ho introdotto 25 ml di succo e ho diluito con un po’ di

acqua.

Ho aggiunto 12.5 ml di soluzione al 15% di ferrocianuro di K (carrez 1) e 12.5 ml fi

soluzione al 30% di solfato di zinco (carrez 2). Per prelevare questi due volumi ho

usato una micropipetta e ho usato un puntale diverso per i due volumi.

In seguito, ho portato a volume con acqua e ho agitato, successivamente ho poi

filtrato con un filtro a pieghe in un Baker, il filtro si è intasato più volte, di

conseguenza, ne ho consumati molti. In questa fase ho eseguito l’operazione due volte

per una buona filtrazione.

Step della determinazione degli zuccheri riducenti:

ho prelevato con pipetta 25 ml del campione chiarificato e ho versato in un matraccio

da 50 ml, dove ho poi portato a volume agitando bene.

Su una piastra riscaldante ho poi messo una beuta da 300 ml con collo a smeriglio per

facilitare il collegamento con il refrigerante a riflusso. Ho prelevato con pipetta 25 ml

di soluzione di Luff e li ho versati nella beuta. Ho poi aggiunto con cilindro graduato 20

ml di acqua deionizzata assieme a delle palline di vetro, così da rendere la bollitura

omogena.

Con una pipetta ho prelevato 5 ml di campione chiarificato e diluito e lo ho versato

nella beuta. Qualche istante dopo ho collegato il refrigerato a riflusso. Nel riscaldatore

magnetico si mette il massimo del calore erogabile perché la soluzione deve bollire

entro due minuti da quando si inserisce il campione chiarificato.

Quando il campione bolle si lascia in questo stato per 8 minuti esatti e poi per

maneggiarlo si raffredda con acqua corrente e dopo due minuti ho aggiunto 9 ml di

soluzione di ioduro di potassio 166g/l e 20 ml di tiosolfato diluito 1 a 3. Il colore della

soluzione ora è bruno per via della formazione di iodio. Questo provoca della

effervescenza, per mandarla via ho agitato il campione preparato.

Una volta eliminata la schiuma si inizia a titolare con tiosolfato 0.1 molare e si osserva

che il colore della soluzione tende a schiarire.

Quando il colore tende a schiarire, verso la fine della titolazione ho aggiunto la salda

d’amido con una pipetta Pasteur, circa tre gocce. Il campione durante la titolazione

era diventato giallo pallido e poi con l’aggiunta della salda d’amido il colore della

reazione diventa incolore. A questo punto ho fermato la titolazione e letto il volume di

tiosolfato inserito: 28.5 ml.

Inoltre, ho eseguito una determinazione in bianco, dove al posto del campione ho

usato l’acqua con la soluzione di Luff. E ho poi titolato il volume equivalente del

bianco, 41.5 m

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Scienze biologiche BIO/10 Biochimica

I contenuti di questa pagina costituiscono rielaborazioni personali del Publisher giurup_1983 di informazioni apprese con la frequenza delle lezioni di Analisi biochimiche e studio autonomo di eventuali libri di riferimento in preparazione dell'esame finale o della tesi. Non devono intendersi come materiale ufficiale dell'università Università Politecnica delle Marche - Ancona o del prof Di Camillo Cristina Gioia.
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