DNA esperimenti famosi
1% !! ! " morte.aeChargaff
Friedrich Miescher
Friedrich medico Miescher → svizzero ↳ isolare ad primo il DNA ( )1860 ↳ suscitò non interesse.
Frederick fino Griffith ascoltato non venne → ai microbiologi successivi rro smooth ↳ l' dimostrò esistenza con, esperimenti cap di " principio con un → { patogeni Streptococcus trasformante " → patogeni ( )f. 1928 non borough di Carrier senza, ftp.r informazioni al cap ÷ la ⑧⑧ miscela la dei? s → { risultava due patogeno della natura chimica ↳ trasformante sostanza batteri ridiventavano 5.
Avery, Mcleod e Mccarty
Mcleod Mccarty Avery e, ↳ il che scoprirono lo degradando dimostrarono trasformante principio → la molecola il DNA è enzimi con macromolecole specifici ogni per ↳ bloccata trasformazione la veniva aggiunta del solo DNA si in.
Hershey e Chase
Hershey Chase e lo dimostrarono utilizzarono definitivamente → che marcati DNA dei il è il FACI materiale genetico f. Marcatori { radioattivi agitando 6 lo provette le 32 35 p i separano )( (proteine batteri acidi il surnatante e )nucleici 1 lo contenevano contenevano n non 32 35 p ha) batterio nel entrava • le proteine virali DNA il quale il, staccano l' si dai unico grado in era l' fornire batterio informazione di ↳ tratti di si esperimento un convincente (( )regole biochimico Chargaff di f1950 → ! " ÷÷ a sperimentali ↳ esiste relazione una rapporto di condizionato azotate per basi uguale tutti le tra → 1 viventi del DNA struttura pubblicazione della Crick Watson 1953 e # → doppia elica DNA del fa a studi in seguito agli Franklin di Rosalind ↳ ha una DNA il /parallela antistruttura calcolò alcune misure { ↳ § filamenti distanza tra i mia: [ dell' etica → passo, tra le distanza 0,34mm • di coppie basi la estremita del' ① 'Estremita DNA s' è legame fosfodiesterico ← te l' altro /① Filamento è voi " ruotato " di estremità ¥.180 'HO 3 + caratteristiche le legate azotate basi ponti da della elica doppia sono → → interno rivolte all' idrogeno lo a\scheletro stabilizzate di coppie desossiribosio interazioni fosfato da WDW di ↳ caratteristiche interazione gli con → )istoni ( basici polari acide ↳ tra' diverse proprieta solco minore maggiore e.
Brenner, Meselson, Jacob e strutture secondarie
Brenner Meselson 1964 Jacob e →, lo esistenza l' scoprirono di mRNA intermedia molecola una → ↳ contenuto il varia suoda cellula cellula a ↳ strutture secondarie DNA del ↳ alle eccezioni nodi esb no. regole Chargaff di G-C e C- o coinvolte nella regolazione ↳ quella diverse presenti genica dell' espressione da → Crick ( anche RNA Watson nel di ) promotore e o ↳ tele situate anche telomeri nei strutture del DNA secondarie i ↳ G-motif quadruple lX -ÀÀ È6 la può formarsi promotori trovano si nei nella dei replicazione ' ho '5 regioni telomeri anche nei cromosomi in e mRNA dei '3 dei trascrizione nella - di promotori geni ↳ abbondanti nelle zone nella traduzione mRNA citosina ricche di dei' dei geni nell' tra interazione RNA' codificante bersagli non e cito plasmatici catalogazione ontologia genica dei geni nomenclatura • a ↳ { proteina una più può categorie 3 avere identificativi codici \i. ✓ .funziona compartimento processo biologico molecolare cellulare - modalità generale dal → dettaglio gerarchica al.
Replicazione del DNA
Replicazione del DNA 9 conservativa semi - ha funge filamento da ogni filamento complementare il stampo per F- li ATP enzima dipendente casi -0 ↳ fondamentale la di forcella apre la per -0 → replicazione replicazione elica doppia.
Topo collabora isomerasi la indica di casi le posizione → a con- della forcella ↳ topologia la indica posizione → lata "forcella " topoisomerasi rilassa replicare di la ( la filamenti molecola dei ) . ' lo tensioni nella catena crea taglia riunisce ruota e, catene due delle una.
Prima sintetizza primer il si → ↳ RNA tanto è poi i molto primer è polimerasi → un non- → eliminati preciso ↳ vengono differenza delle poli a DNA le- , polimerasi RNA (necessitano mutazioni non ) no innesco di un.
Polimerasi DNA sintesi del filamento DNA → di. ↳ efficace più quando all' vicina apertura è della forcella ' '3 -5 veloce filamento • d ha la è sintesi la polimerasi DNA prosegue veloce) s' ' (opposta -3 l' nucleotide ultimo e corregge filamento veloce f.1 si fa prima: 3 # topo isomerasi i -; sina.si # Ne| in liga DNA si di Okazaki frammenti | /, g# ' : si [ ritardato filamento DNA l' liga fosfodiestere salda legame usando energia si na un derivante idrolisi dall' ATP di di molecola una di frammenti unisce Okazaki lo i ③ procarioti forcelle nei replicati eucarioti sola ha si negli → una va, ( ) mammiferi nei mol molte 20 50000 sono perce ne - . ↳ origine replicanti nativi a- ← a- i ↳ -0 → → ' "3 s-→.
Attività di correzione e SSBP
Attività correzione attivita di • bozze interrompe estremità esonucleasica l' di a} filamento del la ↳ solo corregge mismatch l' rottura legame del ultimo nucl. Fosfodi stereo ↳ appaia mento scorretto ↳ rimpiazzo il di nucleotide un segue ( ) Chargzff quello corretto di di regole le non segue.
Binding strand protein single SSBP → ↳ che proteine agiscono opposto filamento creano sul ingombro un → e che impediscono forcella richiuda a [ si ( filamento) ' ritardato filamento ' lento s -3 a ↳ utilizzati vengono la DNA primer numerosi poli rendono na . più molto efficace fa frammenti Okazaki di F- sono nucleasi gli inneschi rimuovono • polimerasi DNA tipologie di ha la è mitocondriale DNA del replicazione 8 polimerasi • fattore 8 replicati principale polimerasi → vo::::: : :c: ÷ i :S ..B riparazione Polimerasi -0 'dell'aumento atipico attivita un.
Telomerasi e telomeri
Telomerasi telomeri telomerasica 'dei correlato riparazione → e → neoplastica un con insorgenza ↳ la ( inattività determina sua invecchiamento → l' dei accorciamento cromosomi { uff 200 divisione Accorciamento circa bp sene per { enza io → → dei telomeri apoptosi @ ↳ temevasi la attiva è in egmerbmrifnn cellule { attivita lungo attive la' l' varia molto staminali tumorali -0 vita dell' negli embrioni organismo ↳ Go attive cellule in nelle poco { ( ) assenti nei neuroni.
Funzionamento ( ! numerosissime TTAGGG es → ↳ . telomeri da cine ( ) nell' sono uomo µ ad alcune si specifiche perdono sequenze replicazione ogni ↳ appaiono ripiegate | se stabilità stesse replicazione su necessari → per e del completa genoma • ① Estensione sintesi complementare modulo DNA primo di → un allo stampo RNA di ② Traslocazione il estremita filamento all' sposta ' si → ↳ il ripetuto viene termina no processo ↳ telomeri con i ( ) stessa è la la del loop ST sempre sequenza - ↳ associati a Shelter Inab. ). è enzimatico struttura complesso proteici un complessi non che subunità di 6 ↳ associata diverse DNA polimerasi dipendente RNA → lia proteggono ( tra cui proteine degradazione dalla ↳ la discherina ) TERT TERC esonudeasi delle ↳ + | 6 partendo sintetizza DNA trascritta si componente da RNA di stampo uno inversa RNA ad nn @ Tofofifreherpirn.Ie TERT telomeri senescenza invecchiamento cellulare → : stampo TERC ( di ) RNA { rare malattie genetiche Anemia plastica a deficit telone ras dovute a che, bischerata si congenita osservati la per →.
Genomi virali
Genomi virali nel volta prima 1960 trovano si tutti in → regni viventi i } TMV Virus tabacco virus Mosaic -0- ↳ ↳ in mini " ÷?* " ," no.
Caratteristiche dei virus ( RNA elemento ) DNA comunicazione di solo possiedono " un o bio altri di sintetici apparati di cellule impossessano si. assemblano molto efficientemente presentano si enzimi che si → - attivano interno all' della solo cellula bersaglio tropismo virale specificità virus del -0' lo selettivi' piu essere possono o meno salto specie di struttura dei virus ha da permesso proteine virali che riconoscono i cellulari # vece 6g { filamento singolo DNA o filamento doppio RNA { lineare circolare (tipologie 7 classificazione.
Classificazione secondo → Baltimore )1971, ↳ vedi slides lo basata sulla 'modalita la con virus il produce quale mRNA replicazione { fusione membrana la con Passaggio critico per A i treni! 1- endocitosi Dss ; → rbimento il fermare processo → il Inda virus disassemblaggio 2- spontaneo invisibile • " • InIIII : termiti IIII → 3- replicazione "- .. µ, la sfruttare respirazione cellulare Assemblaggio 4- spontaneo • Rilascio {5- !! Lisi cellulare " : ri- v → ." r . Gemmazione > v. con involucro F- soci Tosi ↳ { litico distruzione ciclo della la prevede FAOI es -0 virus. , → bersaglio cellula Herpes dell' liso genico ciclo il alcuni solo ↳ virale viene { per genoma • nella integrato (virus cellula) Es retrovirus. ospite.
Alternanza di i tramite virus i quali Questi cicli -0. l' accompagnato evoluzione hanno tutti i di viventi ↳ volte i virus si appropriano a materiale cellulare di tipologie 7 neoplasie virus diretta di causa oncogeni -0 a lo i. contengono leucemia la proteine che HTLV e causa es a-. sviluppo lo cellule nelle T promuovono incontrollato cellulare dell' adulto virus che RNA si DNA replicano retrovirus → a a Lo6 filamento di doppio RNA tra scritta si inversa la ponti da unita H ↳ trascrive RNA l' che enzima virale filamento in DNA di un ↳ integrato viene cellula nella e utilizzato produrre per proteine virali RUA e.
Denaturazione del DNA
Denaturazione del DNA Allontanamento dei a filamenti due { lo processo Tm temperatura di reversibile → denaturazione del 501 molecola della. ↳ lo della studio Tm dfna i3. PCR. permette la % meno SEQ .' denat2 ripetute. | § Sea mediamente. ripetute lo sequenze es 1° denat .. mitocondriali effetto iper cronico sequenze più ripetute ↳ l' DNA assorbimento dei Uv denaturato aumenta è se ↳ 260mm.
PCR e ibridazione
PCR Mary Mullis 1983 → , la ottenere tecnica permette che di in poco di tempo quantità partenza elevata un' DNA di halo specifica altamente e ( ) denaturazione tt campioni partire micro da può - aggiunta di primer un. pori valutazione classificazioni applicazioni - → specie di \/ aggiunta polimerasi \ DNA di • elettroforesi → identificazione clonaggio e il ripete di patogeni si cicli sequenziamento a processo. prodotti di, med legale analisi in • . di diagnosi.
Ibridazione malattie ereditarie tumorali eb. ibridazione molte si in analisi applica con na molecolare biologia marcate sonde di per analizzare to sequenze 6 specifiche di DNA radioattive fluorescenti 6 ↳ 32Pa 355 es .5.F. HI. .
Trascrizione
Trascrizione da copiatura informazione RNA dell' DNA → a io enzima dogma centrale RNA polimerasi RNA Proteina DNA biologia della ↳ ↳ trasferimento inf dell' . possibile è geni 20000 con genetica ) produrre di mRNA più 200000 0 ( ) proteine quindi A. NA. N → .. proteina NA. →.
Gene 'unita informazione di ereditaria → LD per codificano. diversi di tipi RNA ↳ altre tipologie torna 1I sntnn.sn? rnatamirna: crnatrnamrna 6 RNA Unico do lololo codificante regolazione codifica non splicing di displicing NTI la altri espressione gli geni dell' 21000 rrna mrna ( ) regolatori genica dell', espr6 Genica d .! centinaia poche hanno ne modulari nucleari traduzione la bloccano selezionati di mRNA ' RNA ' Polimerasi filamento stampo il -53 direzione → → determinato filamento dai il è ↳ ' promotore ' è -35 ↳ ) fine allungamento inizio a, , regioni piccole DNA nel ↳ la { arriva polimerasi RNA CC box CAAT box ,, tipologia unica mRNA • tata box → Italiana procarioti nei l'.
Splicing e traduzione
Splicing di permette espressione → differenti proteine in calcitonina es le → . Corp diverse cellule e ↳ stesso trascritto primario modificazione, identifica due proteine diverse tiroide prodotte dalla post trascrizione le trascritto I-- proteine introni @ SPLICEosoma - compl. di altre La rimozione degli spliceosoma lo protein binding RNA alternative degli unioni esami -+ rimuove non gli introni { ' aggiunta 5 di cap un Post trascrizione modificazioni "- , aggiunta, poi a di coda 3 una _ Lo prer na RNA maturo → trasp splicing citosol nel.
Traduzione tramite il genetico codice polipeptide sintesi di un → io. Equivocabile un { mRNA codificante subunità la minore riconos ribosomi. RNA inizio l' direzione la di sequenza e&r
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