Riassunto esame Chimica analitica farmaecutica, Prof. Orlandini Serena, libro consigliato Riassunto Elettroforesi, Convalida e Disegno Sperimentale, Lorenzo Coppini

Elettroforesi capillare

È una tecnica separativa. Si basa sull'applicazione di un campo elettrico agli estremi di un capillare (di 10 e 100 micro metri di Ø e da 20 cm in lunghezza) ed è riempito di un tampone che si chiama Background Electro Lyte (BGE).

L'analita è soggetto ad un forte campo elettrico alle estremità del capillare che tende a separare all'interno del capillare l'analita nelle sue differenti velocità di migrazione.

A seconda di alcuni parametri, specie si muovono qui:

• Caratteristiche chimico-fisiche (massa, carica, forma)
• Campo elettrico applicato
• Caratteristica del BGE (tipo, pH, conc., additivi)

Le estremità del capillare riempito di BGE, quando viene messo nella macchina, si trovano all'interno di camere contenenti BGE in corrispondenza degli elettrodi. L'entrata del capillare si trova in corrispondenza del catodo (cato) mentre l'uscita del capillare in corrispondenza dell'anodo.

L'analione è caricato nel capillare sostituendo dei compartimenti (di solito all'angolo) con un concentrato di campione ed effettuando l'ingestione all'entrata del capillare.

• S. effettua, passaggio capillare
• S. riempie di BGE
• S. inietta il campione
• S. ripresa BGE e passato il campione e applica campo E

Elettroforesi capillare

È una tecnica separativa si basa sull'applicazione di un campo elettrico agli estremi di un capillare [...] un diametro di 20-100 cm di lunghezza ed è riempito con un tampone detto BGE (Background Electrolyte). [...]

Le particelle sono soggette ad un forte campo elettrico alle estremità del capillare che le spinge da separati all'interno [...]

A seconda di alcuni parametri le specie si muovono qui:

• Caratteristiche chimico-fisiche (massa, carica, forma)
• Campo elettrico applicato
• Caratteristica del BGE (tipo, pH, conc., additivi)

Schema presentazione strumenti

PC --- monitor --- macchina per elettroforesi

Le estremità del capillare riempito di BGE quando viene messo nella macchina si trovano all'interno di camere contenenti BGE in corrispondenza degli elettrodi. L'entrata del capillare si trova in corrispondenza del catodo mentre l'uscita del capillare [...]

• Si effettua passaggio capillare
• Si riempie di BGE
• Si inietta il campione
• Si impiega BGE e si applica campo

Le viali chi sono i serbatoi dai coi all'interno della migrazionesi sposta bott a campione hanno volumi modesti maiai 500 o 1000 microlitri. L'importante nel green chromatography.

Elettroferogramma

L'elettroferogramma e il grafico che risulta di questa luminosadi una sequenza di picchi gaussiani su una linea di base.

TempoMigrazione(min)Segnale Ampilico(Dipende dal rivelatore)

Una sequenza di picchi gaussiani separati tra loro e strettiquesto integral HIre a baseline mi indica che ho fattouna buona analisi.

Il tempo di migrazione nell'elettroferogramma correlato conidentita del soluto. Mentra la concentrazione misurata con ampiezzasegnale in resposta del rivelatore con maggione area piccolo.maggiore la sensa del rivelatore compl.

L'elettroferesi capillare a livello farmaceutico ha molte applicazioninell'analisi farmaci e loro impurrezze separazioni deneomeritrali deifarmaci nello studio degradazioni.

Bio molecole o macromolecole piu' complesse come quellese diminish, non lungo si appiaccice numerose. Situazioni,

• Alto potere risolutivo e effizientt (picchi, strelti, separati)
• Morfi, moda di separazione e selettivita
• Universalita d'analisi
• Richiede pochi volum. di campione (~50 ml)
• Richiede piccoli volumi di Campione (ml) acquoso
• Automatizzazione mesa con operatore presente
• Profilo flusso elettosmotico
• Robustezza capillare

Aspetti teorici elettrofores. capillare

0. Questa tecnica si basa pri che altro su due fondamenti, principai:

• Elettososmosis (flusso)
• Elettroforetica Mobilit

Elettrosmosi: Il flusso elettro-osmocico (== EOF) e il flussodella massa di acqua nel capillare, ess gnero applicando ladifferenzia di potenziale al capillare dorro nel gramma sog mentela direzioni è sempre al nodo e Gthodulina.

La parte del capillari è ricoprata da gruppi S silanolica, S-OHqueste con pi basa si dissociano dunque il parate e quel pidel sopro IR sorba elettr ct cariche negative, l'veronde ai que gruppisi dissoca. Il questo cariche negative sorno fisse percheimpapolite, dal parate della pera del capillare.

Questo questo la prima seffa di cariche nega re fiss, forliamola creazione del B febbraio base sezicril e align. B 80.% tof attiene se.

La part di califare (Cariche negtiche se mometare) ei alicon i sua viso. è uno sfolta diffuso di Gthom prevelane.

Quando с'impata un campo elettrosi semenau un flusso metv