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Saggio di Mutagenesi in S. cerevisiae con radiazione UVC Pag. 1
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Laboratorio di Mutageno:

Test di reversione in SACCHAROMYCES CEREVISIAE (lievito) ceppo D7

Ceppo D7 diploide.

Ha 3 marcatori di interesse ndi, caratteristiche del ceppo, che permetteranno di valutare 3 eventi di reversione differenti:

  1. “i”: 1 mutazione in omozigosi al locus 1 per l’istidina (ilva-92)
  2. “-” 2 mutazioni in eterozigosi al locus 5 per il triptofano (trp5-12 e trp5-27)
  3. “a”: 15 “ -- -- ” eterozigosi “ -- 2 l’adenina (ade2-40 e ade2-119)

Crescita del ceppo

Prelievo di una colonia di ceppo D7; inoculo in terreno completo liquido + H2O, a temperatura intorno ai 37° (crescita ottimale), in agitazione (per garantire l’ossigenazione).

NB il terreno è definito completo poiché i nutrienti non vanno reintegrati:

Con il tempo in ingresso diminuirà la concentrazione degli alimenti e in uscita aumenteranno i rifiuti.

Dopo 24h il ceppo avrà raggiunto la fase di crescita stazionaria, con una concentrazione cellulare dell’ordine delle 10 8 cellule/mL.

Fasi della crescita cellulare in terreno completo

Fase stazionaria: ofe numero di cellule permane costante, cioè:

numero di cellule in divisione (vive) = numero di cellule morte

Il saggio valuta i tassi di reversione a seguito di trattamento con UV-C (266 nm)

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Publisher
Omni@88
A.A. 2013-2014
5 pagine
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SSD Scienze biologiche BIO/18 Genetica
I contenuti di questa pagina costituiscono rielaborazioni personali del Publisher Omni@88 di informazioni apprese con la frequenza delle lezioni di Mutagenesi Ambientale e studio autonomo di eventuali libri di riferimento in preparazione dell'esame finale o della tesi. Non devono intendersi come materiale ufficiale dell'università Università degli Studi di Pisa o del prof Scarpato Roberto.