Tossicologia e mutagenesi ambientale - Appunti Lezione 10

Ricombinazione omologa

Reciproca Non reciproca

 

 Crossing-over

– ricombinazione intergenica

tra 2 loci genici

 tra il centromero ed un locus genico

 scambio dei marcatori (non sempre)



 Conversione genica

– ricombinazione intragenica

tra 2 siti mutati di un locus genico (correzione del

 malappaiamento)

Crossing-over

Introduzione DSB in un omologo

Resezione a dare estremità 3’OH

libere

Invasione dell’omologo intatto da parte

di un’elica e formazione ansa D

Nuova sintesi di DNA su stampo ansa

D ed estensione dell’ansa

Appaiamento con l’elica che non

aveva invaso

Nuova intesi e saldatura dei frammenti

→ doppia HJ

Risoluzione della struttura

Risoluzione giunzione di Holliday

Modalità di taglio della Hj

Taglio nord-sud (verticale al chiasma)

 – scambio dei marcatori esterni

– scambio dei marcatori esterni con conversione

genica (correzione del malappaiamento)

Taglio est-ovest (orizzontale al chiasma)

 – non c’è scambio dei marcatori esterni

– conversione genica

Concordanza tagli (N-S + N-S o E-O + E-O)

 – prodotti ricombinanti

Tagli discordanti (N-S + E-O)

 – prodotti non ricombinanti

mbinazione con o senza crossing-o

1 2

1. Crossing-over 2. No crossing-over

Crossing-over A b C

A b C A b C

A b C a B c

a B c a B c

a B c A b C

A b C A B c

A B c a b C

a b C a B c

a B c

Conversione genica

A b C

b

A C

B

b

a c

B

a B c A b C

A b C

b A C

A C B

a c a c

b B

a B c

a c

B

AbC AbC abc aBc AbC ABC aBc aBc

Saccharomices cerevisiae

12 Mb 16 cromosomi + 1 DNA mitocondriale

Fase aploide

Fase diploide

Saccharomices cerevisiae D7

ilv1-92

Cromosoma V ilv1-92

trp5-12 +

Cromosoma VII trp5-27

+

ade2-40 +

Cromosoma XV + ade2-119

Wild type: colonie bianche

Ricombinazione mitotica

ade2-40 +

ade2-40 + ade2-119

+ ade2-119

+

ade2-119

+ ade2-119

+

Colonie bianche Colonie rosse

ade2-40 + p

ade2-40 + r

ade2-40 +

ade2-119

+

ade2-40 + ade2-119

+ r

p

ade2-119

+ ade2-119

+

Colonie rosa

Conversione genica

trp5-12 +

trp5-12 + 

trp5-12 +

trp5-27

+

trp5-27

+ trp5-27

+

Colonie trp- trp5-27

+

trp5-12 + + +

+ + Colonie trp+

 →

conversione 5-12 +

trp5-27

+ trp5-12 +

trp5-27

+ trp5-27

+

A G

G G Col