Concetti Chiave
- La preparazione degli strisci richiede due fasi fondamentali: disposizione del materiale su un vetrino e fissazione mediante calore.
- Il materiale biologico utilizzato comprende muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino, essenziali per l'analisi microscopica.
- È importante sterilizzare l'ansa prima di prelevare il campione e lavorare vicino alla fiamma del Bunsen per garantire un ambiente sterile.
- La colorazione al blu di metilene permette di osservare la forma delle cellule, richiedendo un'applicazione di massimo tre minuti e un successivo risciacquo.
- L'osservazione al microscopio avviene con ingrandimenti di 40x e 100x, utilizzando olio per immersione per una visione dettagliata.
Preparazione degli strisci
L’allestimento di questi preparati comporta due fasi antecedenti alla prova stessa:
1. Preparazione degli strisci, ossia la disposizione del materiale da osservare su un vetrino portaoggetti in modo da formare una sottile pellicola permeabile alla sorgente luminosa del microscopio
2. Fissazione degli strisci, di norma effettuata con il calore che permette l’uccisione delle cellule e la penetrazione del colore nel momento successivo. Generalmente questa operazione comporta la modifica delle caratteristiche primarie della cellula (forma, dimensioni, ..)
• Materiale biologico: Muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino
• Attrezzature: Vetrini portaoggetti, ansa, Bunsen e pinze in legno con punte ricurve
Procedimento: Per eseguire al meglio questa prova si consiglia di utilizzare vetrini ben puliti e di lavorare vicino alla fiamma del Bunsen. Inizialmente è necessario sterilizzare l’ansa che si andrà ad utilizzare per prelevare il campione da esaminare.
Fissazione e colorazione
Prelevare vicino al becco Bunsen, con l’ansa precedentemente sterilizzata, una patina di campione dal prodotto su cui giacciono le cellule da osservare e porle sul vetrino portaoggetti stemperandole con delle gocce di acqua distillata; allontanare poi il prodotto in eccesso. In un secondo momento impugnare il vetrino portaoggetti con la pinza in legno e porlo sopra la fiamma del bunsen facendogli compiere dei movimenti rotatori per far evaporare l’acqua in eccesso. In fine si procede con la fissazione che viene effettuata tagliando o da destra verso sinistra o dall’alto verso il basso la fiamma del bunsen. Arrivati a questo punto si può proceder con la colorazione.
Osservazione al microscopio
La colorazione al blu di metilene è una colorazione semplice o monocromatica che consente di osservare principalmente la forma delle cellule in esame.
Materiali e Strumenti:
• Materiale Biologico: Muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino
• Attrezzature: Vetrini portaoggetti, ansa, bacchette, vaschetta per colorazione, spruzzetta con acqua, contagocce e Bunsen
Procedimento: Prendere i campioni precedentemente fissati e porli sopra i supporti costituiti dalle bacchette di vetro sopra la vaschetta per la colorazione. Ricoprire completamente lo striscio con il blu di metilene e lasciare agire per un tempo massimo di tre minuti. Successivamente risciacquare delicatamente con acqua e far asciugare il vetrino sulla parte alta della fiamma del Bunsen. In fine osservare i campioni al microscopio con ingrandimenti di 40x e successivamente a 100x con l’olio per immersione.
Domande da interrogazione
- Quali sono le fasi principali nella preparazione degli strisci per l'osservazione al microscopio?
- Quali materiali e attrezzature sono necessari per la preparazione e la colorazione degli strisci?
- Come avviene la colorazione e l'osservazione dei campioni al microscopio?
La preparazione degli strisci comprende due fasi fondamentali: la disposizione del materiale biologico su un vetrino portaoggetti per formare una pellicola sottile e la fissazione delle cellule tramite calore, che modifica le loro caratteristiche primarie (forma e dimensioni).
Per la preparazione e la colorazione degli strisci sono necessari vetrini portaoggetti, un'ansa, un Bunsen, pinze in legno, bacchette di vetro, una vaschetta per colorazione, spruzzetta con acqua e contagocce, oltre al materiale biologico come muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino.
La colorazione avviene utilizzando il blu di metilene, che deve coprire completamente lo striscio per un massimo di tre minuti. Dopo il risciacquo, i campioni vengono asciugati e osservati al microscopio con ingrandimenti di 40x e 100x con olio per immersione.
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