Concetti Chiave

  • Il microscopio ottico ingrandisce le immagini delle cellule fino a 1000-1500 volte, rendendo visibili oggetti altrimenti invisibili a occhio nudo.
  • Funziona grazie alla rifrazione della luce, con due sistemi di lenti biconvesse che creano immagini ingrandite di oggetti ben collocati.
  • Il limite di risoluzione per l'occhio umano è di circa 0,1 mm, mentre con il microscopio si arriva a 0,2 micrometri, migliorando la distinzione di punti vicini.
  • Il potere di risoluzione dipende dalla lunghezza d'onda della luce e dall'indice di rifrazione del mezzo, influenzando la capacità di vedere dettagli ravvicinati.
  • Utilizzare olio da immersione può migliorare il valore di n, riducendo il limite di risoluzione e aumentando la capacità di osservazione dettagliata.

Il microscopio ottico

Le cellule, a causa delle loro piccole dimensioni (dell’ordine di pochi micrometri) non sono visibili ad occhio nudo: è possibile osservarle invece grazie all’uso del microscopio ottico che ne ingrandisce l’immagine fino a circa 1000-1500 volte.
Il microscopio ottico composto è costituito da due sistemi di lenti biconvesse ed è fondato sul fenomeno della rifrazione delle radiazioni luminose. I raggi di luce nel passare da un mezzo ad un altro di differente densità (aria-lente) subiscono una deviazione o rifrazione e restituiscono di un oggetto, opportunamente collocato rispetto alla sorgente di luce e alla lente, un'immagine ingrandita.
Nella microscopia in campo chiaro il raggio di luce attraversa direttamente l'oggetto da osservare ed esso è visibile sullo sfondo chiaro.
La capacità di ingrandimento è condizionata dal limite di risoluzione dello strumento, che corrisponde alla distanza minima alla quale oggetti o punti molto vicini sono ancora distinguibili.
Per l’occhio umano, senza l’uso di lenti, il limite di risoluzione è di circa 0,1 mm; al di sotto di tale valore i due punti risultano indistinti. Con l’uso del microscopio il limite di risoluzione è spinto fino a 0,2
[math] \micro m [/math]
, ovvero 200
[math]nm[/math]
.

Il potere di risoluzione

Per potere di risoluzione si intende invece la capacità di vedere distinti due punti molto vicini. Essa evidentemente rappresenta l’inverso dei limite di risoluzione:

[math] Potere ris = \frac{1}{Lr} [/math]

Il limite di risoluzione è dovuto non alle lenti, ma alla natura ondulatoria della luce: assume pertanto grande importanza nella microscopia la natura della sorgente luminosa.
Il limite di risoluzione si calcola mediante la frazione:

[math] I_{r}=\frac{0.61}{n \sin( \alpha) }\lambda [/math]
dove:
  • [math] \lambda[/math]
    è la lunghezza d’onda della radiazione;
  • [math]n[/math]
    è l’indice di rifrazione del mezzo attraversato dalla luce;
  • [math] \alpha [/math]
    è l'angolo al centro del cono di luce che entra nel cono dell’obiettivo;
  • [math] n \sin(\alpha) [/math]
    è l’apertura numerica.

Dipendenza di Lr in funzione dei parametri

Il valore di Lr varia al variare di
[math]\lambda[/math]
ed è tanto più basso (viceversa la capacità di risoluzione è tanto più alta), quanto più piccolo è il valore di
[math]\lambda[/math]
Il valore di
[math]n[/math]
può essere potenziato con l’uso d’olio da immersione fra l’obiettivo e il preparato. La presenza dell’olio comporta una nuova rifrazione delle radiazioni.
Studia con la mappa concettuale

Domande da interrogazione

  1. Qual è il principio di funzionamento del microscopio ottico?
  2. Il microscopio ottico funziona grazie alla rifrazione della luce attraverso due sistemi di lenti biconvesse, ingrandendo l'immagine di oggetti piccoli fino a 1000-1500 volte, permettendo così di osservare cellule non visibili ad occhio nudo.

  3. Qual è il limite di risoluzione del microscopio ottico e come si confronta con quello dell'occhio umano?
  4. Il limite di risoluzione del microscopio ottico è di 0,2 micrometri, molto più fine rispetto al limite di 0,1 mm dell'occhio umano, consentendo di distinguere punti molto vicini.

  5. Come influiscono i parametri come la lunghezza d'onda e l'indice di rifrazione sulla capacità di risoluzione del microscopio?
  6. La capacità di risoluzione è influenzata dalla lunghezza d'onda della luce e dall'indice di rifrazione del mezzo; un valore di lunghezza d'onda più basso e un indice di rifrazione più alto migliorano la risoluzione, come evidenziato dalla formula del limite di risoluzione.

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