Metodi di misurazione dell'emoglobina mutata

Metodica HPLC e cromatogramma

Viene utilizzata la metodica HPLC (Cromatografia liquida ad alta prestazione); essa permette di suddividere le diverse classi di emoglobine in base alle differenze di carica. Così facendo è possibile calcolare la quantità di HbA glicata e successivamente relazionarla al totale (in percentuale), ottenendo un cromatogramma.

Andamento della glicemia

Curiosità: Tabella che presentano condizioni particolari che determinano dei cambiamenti del valore di Hba1

si può notare come l’andamento è dipendente sia dall’introduzione di cibo sia dal quantitativo di ormoni secreti (glucagone e insulina in primis, ma anche altri come ormone della crescita).
Durante il pomeriggio si assiste ad un calo della glicemia di circa il 5%, mentre intorno alle 18.00 è possibile che si verifichi un picco. Quindi è importantissimo scegliere il momento più adatto per poter effettuare il prelievo di glicemia a digiuno. Solitamente viene consigliata una fascia oraria compresa dalle 7.00 alle 9.00 del mattino. Questa fascia oraria vale per tutti gli esami di laboratorio, in quanto i cut-off siano stati standardizzati in questo modo.

Quindi per fare un prelievo corretto è necessario:

- Tra le 7:00 e le 9:00 del mattino;

- Il paziente deve essere a digiuno da almeno otto ore;

- Il paziente non deve, ad esempio, aver lavorato la notte precedente altrimenti il suo metabolismo potrebbe essere più rapido determinando una concentrazione più bassa di glucosio.

Tipi di matrice biologica

Esistono 3 tipi diversi di matrice biologica sulle quali misurare la glicemia:

1) Plasma

2) Siero

3) Sangue intero
La matrice biologica raccomandata dalle linee guida è il plasma (come dice il nome, Fasting Plasma Glucose). La molalità del glucosio (quantità di glucosio per unità di massa d’acqua) è costante, quello che cambia da una matrice biologica all’altra è la quantità di acqua (solvente): la quantità di acqua nel plasma è infatti più alta dell’11% rispetto al sangue intero, quindi la glicemia plasmatica sarà più alta dell’11% rispetto al sangue intero, mentre nel siero la concentrazione è ancora maggiore (3-5% più alta rispetto al plasma), quindi è molto importante il campione su cui avviene la misurazione

Esempio: in un soggetto viene misurata la glicemia su sangue intero riscontrando un valore pari a 88 mg/dl; nel caso in cui venga separata la parte corpuscolata e sia misurata solo su plasma si otterrebbe una concentrazione di 100 mg/dl. Lo screening va ripetuto ogni anno in caso di prediabete. I soggetti non a rischio iniziano lo screening dopo i 45 anni.