Concetti Chiave
- La preparazione degli strisci batterici prevede la disposizione del materiale su un vetrino per formare una pellicola sottile e permeabile alla luce del microscopio.
- La fissazione degli strisci viene solitamente eseguita con il calore, che uccide le cellule e permette la penetrazione del colorante, alterando le caratteristiche cellulari primarie.
- Materiali biologici utilizzati includono muffe da formaggio e mandarino, con attrezzature come vetrini, ansa, Bunsen e pinze in legno.
- Il processo di colorazione al blu di metilene è semplice e monocromatico, utile per osservare la forma delle cellule.
- La colorazione prevede l'applicazione del blu di metilene per tre minuti, seguita da un risciacquo e un'asciugatura prima dell'osservazione al microscopio.
Preparazione degli strisci
L’allestimento di questi preparati comporta due fasi antecedenti alla prova stessa:
1. Preparazione degli strisci, ossia la disposizione del materiale da osservare su un vetrino portaoggetti in modo da formare una sottile pellicola permeabile alla sorgente luminosa del microscopio
2. Fissazione degli strisci, di norma effettuata con il calore che permette l’uccisione delle cellule e la penetrazione del colore nel momento successivo. Generalmente questa operazione comporta la modifica delle caratteristiche primarie della cellula (forma, dimensioni, ..)
• Materiale biologico: Muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino
• Attrezzature: Vetrini portaoggetti, ansa, Bunsen e pinze in legno con punte ricurve
Procedimento: Per eseguire al meglio questa prova si consiglia di utilizzare vetrini ben puliti e di lavorare vicino alla fiamma del Bunsen. Inizialmente è necessario sterilizzare l’ansa che si andrà ad utilizzare per prelevare il campione da esaminare.
Fissazione e colorazione
Prelevare vicino al becco Bunsen, con l’ansa precedentemente sterilizzata, una patina di campione dal prodotto su cui giacciono le cellule da osservare e porle sul vetrino portaoggetti stemperandole con delle gocce di acqua distillata; allontanare poi il prodotto in eccesso. In un secondo momento impugnare il vetrino portaoggetti con la pinza in legno e porlo sopra la fiamma del bunsen facendogli compiere dei movimenti rotatori per far evaporare l’acqua in eccesso. In fine si procede con la fissazione che viene effettuata tagliando o da destra verso sinistra o dall’alto verso il basso la fiamma del bunsen. Arrivati a questo punto si può proceder con la colorazione.
Osservazione al microscopio
La colorazione al blu di metilene è una colorazione semplice o monocromatica che consente di osservare principalmente la forma delle cellule in esame.
Materiali e Strumenti:
• Materiale Biologico: Muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino
• Attrezzature: Vetrini portaoggetti, ansa, bacchette, vaschetta per colorazione, spruzzetta con acqua, contagocce e Bunsen
Procedimento: Prendere i campioni precedentemente fissati e porli sopra i supporti costituiti dalle bacchette di vetro sopra la vaschetta per la colorazione. Ricoprire completamente lo striscio con il blu di metilene e lasciare agire per un tempo massimo di tre minuti. Successivamente risciacquare delicatamente con acqua e far asciugare il vetrino sulla parte alta della fiamma del Bunsen. In fine osservare i campioni al microscopio con ingrandimenti di 40x e successivamente a 100x con l’olio per immersione.
Domande da interrogazione
- Quali sono le fasi principali per la preparazione degli strisci batterici?
- Quali materiali biologici vengono utilizzati per la preparazione degli strisci?
- Come si esegue la colorazione al blu di metilene?
Le fasi principali sono la preparazione degli strisci, che consiste nel disporre il materiale su un vetrino, e la fissazione degli strisci, solitamente effettuata con il calore per uccidere le cellule e permettere la penetrazione del colore.
I materiali biologici utilizzati sono muffe prelevate da campioni di formaggio e mandarino.
La colorazione al blu di metilene si esegue ricoprendo lo striscio con il colorante per un massimo di tre minuti, risciacquando con acqua, asciugando il vetrino e osservando i campioni al microscopio.
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