Concetti Chiave
- Il test di Ames è una tecnologia diffusa per valutare il potenziale mutageno dei composti utilizzando ceppi di salmonella typhimurium.
- Due ceppi di salmonella nel test evidenziano mutazioni puntiformi e frameshift, distinguendo tra diversi tipi di mutazioni.
- La procedura del test prevede l'uso di un terreno minimo privo di istidina e la presenza di omogenato di fegato di ratto per analizzare i mutageni.
- I risultati si basano sul conteggio delle colonie batteriche mutate, che indicano la presenza di mutageni quando raddoppiano rispetto al controllo.
- Il test rivela anche che molte sostanze mutagene sono potenzialmente cancerogene, sottolineando l'importanza della valutazione mutagena.
Tecnologie per saggiare il potenziale
Esistono delle tecnologie che permettono di saggiare il potenziale mutageno dei composti.
Tra di queste il più diffuso è il test di Ames, nel quale si utilizzano due ceppi di salmonella typhimurium che permettono di evidenziare diversi tipi di mutazioni puntiformi e frameshift; un ceppo infatti rileva mutazioni per inserzione/delezione di basi, ossia frameshift, invece l’altro ceppo rileva mutazioni per sostituzioni di basi.
Procedura del test di Ames
Entrambi i ceppi sono istidina-, ossia non metabolizzano l’istidina (auxotrofici). Il test permette anche di distinguere promutageni e mutageni franchi attraverso test che vengono condotti con o senza omogenato di fegato di ratto (S9).
È ora necessario inserire e non inserire i presunti mutageni e l’omogenato di fegato di ratto con mutanti di istidina- in un terreno minimo, privo di istidina.
Risultati e interpretazioni del test
Il giorno seguente si conta il numero di colonie batteriche mutate che crescono in assenza di istidina, dette revertenti (erano già mutate, ma subiscono una nuova mutazione). Un campione viene detto mutageno quando i revertenti, i quali sono his+, raddoppiano rispetto al controllo.
Se nel test con e senza l’omogenato di fegato di ratto nulla cambia, il mutageno è franco altrimenti è promutageno.
Il test di Ames dimostra anche che le sostanze mutagene per la maggior parte sono anche cancerogene.
Domande da interrogazione
- Qual è il principio fondamentale del test di Ames?
- Come si determina se un campione è mutageno nel test di Ames?
- Qual è la relazione tra sostanze mutagene e cancerogene secondo il test di Ames?
Il test di Ames utilizza ceppi di salmonella typhimurium per rilevare mutazioni puntiformi e frameshift, distinguendo tra mutageni e promutageni attraverso l'uso di omogenato di fegato di ratto (S9) (testo).
Un campione è considerato mutageno se il numero di colonie batteriche revertenti, che crescono in assenza di istidina, raddoppia rispetto al controllo (testo).
Il test di Ames evidenzia che la maggior parte delle sostanze mutagene è anche cancerogena, suggerendo un legame tra mutagenesi e carcinogenesi (testo).
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