Che materia stai cercando?

Anteprima

ESTRATTO DOCUMENTO

Colorazione di Gram

Osservazione microscopica

 I batteri Gram+ (Staphylococcus

spp, Streptococcus spp, etc)

appaiono colorati in blu

(Staphylococcus epidermidis)

 I batteri Gram- (E. coli, P.

aeruginosa, Neisseriaceae, etc.)

appaiono colorati in rosso

(Escherichia coli)

Colorazione di Gram

Casi particolari

 Trichomonas vaginalis (protozoo)

è Gram+

 Candida albicans (lievito),

Aspergillus fumigatus (muffa) sono

Gram+

 Occasionalmente, anche

Mycobacterium tuberculosis è

Gram+ (oppure Gram-variabile)

Colorazione di Gram

Utilità clinica (1 di 2)

 Idoneità del campione da sottoporre a coltura

 Diagnosi eziologica presuntiva (suggestiva)

meningiti e polmoniti batteriche, batteriuria, gonorrea

 ed infezioni piogene

 Suggerire la necessità di attuare tecniche di

coltivazione “non routinarie”

anaerobi, funghi

Ausilio nella interpretazione dell’esame colturale

 angina di Vincent (spirochete, fusobatteri)

 paziente antibiotizzato

Informazioni sulla natura dell’infezione

 infezioni poli/mono-microbiche

Colorazione di Gram

Utilità clinica (2 di 2)

Quindi:

La conoscenza del risultato di una

 colorazione di Gram può salvare una vita !

Tuttavia:

 La colorazione di Gram non deve essere effettuata su

campioni clinici (feci, escreato) in cui la flora patogena

non può essere differenziata da quella commensale

 La colorazione di Gram non è utile per la rilevazione di:

Legionella spp. (immunofluorescenza)

 bacilli acido-resistenti (micobatteri, Nocardia spp.) (Ziehl-

 Neelsen)

Colorazione di Gram

L’eccezione

 La colorazione di Gram non è applicabile a tutti i

batteri.

 Mycobacterium tuberculosis, M. leprae

incapacità di colorare la cellula per la natura

 “cerosa” dell’involucro esterno, altamente

impermeabile ai coloranti

colorazione di Ziehl-Nielsen

Mycobacterium spp.

Parete cellulare

 Composizione:

Grosse quantità di glicolipidi:

 acido micolico (60%)

 complessi lipidi-arabinogalattani

 lipoarabinomannani

Scarso petidoglicano

 Funzioni:

Condiziona la forma e previene la lisi osmotica

 (peptidoglicano)

Inibisce ingresso composti chimici

 crescita lenta

 maggiore resistenza agli agenti chimici

 maggiore resistenza alla fagocitosi

Mediante l’acido micolico, induce la sintesi di citochine

 (TNF- )

 Colorazioni:

Ziehl-Neelsen, Kinyoun

Colorazione di Ziehl-Neelsen

Tecnica (1 di 2)

Step 1:

 versare la fucsina fenicata

(fucsina basica in acqua, alcool e

fenolo)

Step 2:

 fare evaporare il colorante

alla fiamma per 5 min

 lavare con acqua

Colorazione di Ziehl-Neelsen

Tecnica (2 di 2)

Step 3:

 Decolorare (2 min, circa) con

alcool-acido fino alla scomparsa

del colorante

 Lavare con acqua

Step 4:

 Contrastare con blu di metilene

per 1-2 min

 Lavare con acqua

Colorazione di Ziehl-Neelsen

Osservazione microscopica

 Gli organismi acido-resistenti (AFB) appaiono

colorati in rosso

 Gli organismi non acido-resistenti risulteranno

colorati in blu

Le colorazioni in Microbiologia

Colorazioni speciali

La colorazione negativa consiste nella

colorazione di sottofondo con un colorante

acido (nero nigrosina). Viene usata quando

un organismo od una sua struttura non viene

colorata facilmente (esempio, la capsula).

La colorazione delle spore richiede calore

per facilitare la penetrazione del colorante

attraverso

(verde di malachite, fucsina fenicata)

gli involucri sporali.

La colorazione dei flagelli impiega un

mordenzante (precipitazione dei sali

dell’acido tannico) per evidenziare la struttura

flagellare altrimenti invisibile (d: 12-30 nm)


PAGINE

23

PESO

734.78 KB

AUTORE

Atreyu

PUBBLICATO

+1 anno fa


DESCRIZIONE DISPENSA

Materiale didattico per il corso di Microbiologia e Microbiologia Clinica tenuto dal prof. Giovanni Di Bonaventura, all’interno del quale sono affrontati i seguenti argomenti: le colorazioni utilizzate in batteriologia; tecniche di colorazione; la colorazione di Gram e la colorazione di Ziehl Neelsen; colorazioni di flagelli.


DETTAGLI
Corso di laurea: Corso di laurea magistrale in medicina e chirurgia (ordinamento U.E. - 6 anni)
SSD:
A.A.: 2011-2012

I contenuti di questa pagina costituiscono rielaborazioni personali del Publisher Atreyu di informazioni apprese con la frequenza delle lezioni di MICROBIOLOGIA E MICROBIOLOGIA GENERALE e studio autonomo di eventuali libri di riferimento in preparazione dell'esame finale o della tesi. Non devono intendersi come materiale ufficiale dell'università Gabriele D'Annunzio - Unich o del prof DI BONAVENTURA GIOCANNI.

Acquista con carta o conto PayPal

Scarica il file tutte le volte che vuoi

Paga con un conto PayPal per usufruire della garanzia Soddisfatto o rimborsato

Recensioni
Ti è piaciuto questo appunto? Valutalo!

Altri appunti di Microbiologia e microbiologia generale

Coltivazione batterica - Terreni di coltura
Dispensa
Disinfezione e sterilizzazione - Tecniche
Dispensa
Spora batterica
Dispensa
Miceti - Caratteristiche generali
Dispensa